CERKL的过表达在人类视网膜变性疾病中的作用及其临床意义

目的:研究基因CERKL过度表达与色素性视网膜炎的关系及其临床治疗意义。方法:应用RT-PCR分析、比较基因序列CERKL的转录产物的结构差异。利用序列CERKL过表达的转化与细胞溶解,获得不同的CERKL蛋白,检测其体外磷酸化酶活性。结果:CERKL转录得到四种转录子,两个较长的CERKLa、CERKLb,两个较短的CERKLc、CERKLd。四种转录蛋白在体外酶活性实验中均没有产生酶解产物C1P,在300μM H2O2氧化条件下,转录子CERKL能有效抑制细胞凋亡,其24 h相对PARP清除率明显低于12 h相对PARP清除率(P0.01)。但在400μM H2O2氧化条件下其未能表现出抑制细胞凋亡的作用。结论:色素性视网膜炎有可能是基因CERKL转录时其终止子因无义突变导致缺陷,进而发生选择性转录,并由CERKL较长变异体(CERKLa、CERKLb)的缺失或CERKL较短变异体(CERKLc、CERKLd)毒性引起的。     

小檗碱对动脉粥样硬化形成的抑制作用及机制探讨

目的:研究小檗碱(Berberine)对家兔动脉粥样硬化形成的抑制,并探讨其可能的作用机制。方法:将32只雄性新西兰大白兔随机分为正常组、模型对照组、小檗碱组和阿托伐他汀组,每组各8只。正常组以普通饲料喂养,其余各组高脂喂养,小檗碱组和阿托伐他汀组分别灌胃给予小檗碱(100 mg/kg,1次/d)和阿托伐他汀(5 mg/kg,1次/d),饲养12周。利用全自动生化分析仪测定兔血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平,酶联免疫吸附法测定血清ox-LDL、MCP-1、MMP-9水平。观察斑块破裂和血栓形成情况,并进行苏木素-伊红(HE)染色,测量病变区域内膜与中膜的厚度。结果:小檗碱可显著降低高脂喂养家兔的血清TC、TG、LD-C水平,降低血清血清炎症因子ox-LDL、MCP-1、MMP-9水平(P0.01),与阿托伐他汀组相比无显著性差异。同时小檗碱组的内膜增生程度明显小于模型对照组,和阿托伐他汀组接近。结论:小檗碱可改善动脉粥样硬化病变的程度,抑制斑块的形成,同时降低血清中炎症因子标志物。     

高温胁迫下水稻基因组DNA表观遗传变化MSAP分析

目的:研究高温胁迫对水稻基因组DNA甲基化变化的影响,筛选出一批与高温胁迫的相关基因,研究DNA基因化与基因转录水平之间的关系。方法:在人工气候箱子中,对四叶期的水稻幼苗进行38度高温处理,分别取0 h、2 h、4 h、8 h、12 h、16 h和24 h七个不同时间点的幼叶提取DNA与RNA,利用MSAP技术检测总甲基化水平变化,RT-PCR检测相关基因的转录本的表达量变化。结果:与对照组0 h幼叶相比,高温处理下的2 h、4 h、8 h、12 h、16 h和24 h幼叶的总体甲基化水平依次是37.14%、36.79%、36.00%、35.50%、35.43%、34.64%和34.57%,可知幼叶DNA甲基化水平在高温处理后不断降低。此外,RT-PCR结果显示筛选的两个与甲基化相关的基因(PP2C和RAFP)的转录水平与甲基化水平呈负相关。结论:基因组甲基化作为一种重要的表观遗传调控方式,可以通过调控相关的基因的表达量水平来防御高温胁迫。     

产甾体皂甙华重楼内生真菌、放线菌的分离与筛选

目的:研究重楼内生菌的次生代谢产物的医用价值。方法:从产自四川彭州的华重楼(Paris polyphylla vat．chinensis Franch)地下块茎中分离、筛选内生菌,采用PDA液体培养基26℃发酵培养;发酵液分别经泡沫反应、Salkowski反应、Liberman反应及以薯蓣皂甙元为标准对照的薄层层析分析。结果:表明其中编号为SNUF-1的真菌和编号为SNUA-1、SNUA-2的放线菌菌株均能分泌甾体皂甙或其类似化合物。结论:华重楼内生菌发酵液具有产生宿主药用活性的成份。     

应用蛇伤镇痛酊的临床观察

毒蛇咬伤致局部肿胀剧痛,是蛇伤科临床常见症状之一,而目前国内治疗蛇伤后局部消肿镇痛外用药物品种甚少,且消肿镇痛效果欠佳。因此,作者在祖传药酒镇痛的基础上进一步改进,在几百味中草药中筛选出有效经验方——蛇伤镇痛酊。主要用于治疗毒蛇咬伤引起的伤口局部肿胀疼痛,也可治疗风湿性关节炎、类风湿性关节炎、痛风、急性软组织挫伤、陈旧性挫伤、带状疱疹后遗症、中风后遗症等,经对2342例蛇伤患者及646例慢性疑难病症患者的临床观察,疗效显著,现报告如下。