皮肤成纤维细胞肌内注射表达外源基因的可行性

将分别带有报告基因lacZ和人凝血因子ⅨcDNA的兔原代皮肤成纤维细胞直接注射到兔肌肉组织后 ,皮肤成纤维细胞可以长期存活并持续表达外源基因 .其中β 半乳糖苷酶表达至少持续 3个月 ,人凝血因子Ⅸ蛋白表达持续 1个月 .研究结果将皮肤成纤维细胞的优点和肌肉组织途径的优势有机地结合起来 ,为血友病B及其他遗传病的体细胞基因治疗提供一条新的途径 .     

Injecting skin fibroblasts into muscles to express human clotting factor IX cDNA

Ｉｔｉｓｅａｓｙｔｏｄｅｒｉｖｅｐｒｉｍａｒｙｍｙｏｂｌａｓｔｓｆｒｏｍｈｕｍａｎｂｉｏｐｓｙ.Ｔｈｅｔｒａｎｓｆｏｒｍｅｄｍｙｏｂｌａｓｔｓｃｏｕｌｄｅｘｐｒｅｓｓｆｏｒｅｉｇｎｇｅｎｅａｔｈｉｇｈｌｅｖｅｌ.Ｂｕｔｌｅｓｓｍｙｏｂｌａｓｔｓｅｘｉｓｔｉｎａｄｕｌｔｓ[1],ａｎｄａｒｅｌｉａｂｌｅｔｏｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｅａｎｄｆａｉｌｔｏｄｉｖｉｄｅ,ｌｅａｄｉｎｇｔｏｌｏｗｅｆｆｉｃｉｅｎｃｙｏｆｔｒａｎｓｆｅｃｔｉｏｎａｎｄａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎｉｎｖｉｔｒｏ,ａｎｄｓｕｂｓｅｑｕｅｎ…     

水分胁迫对不同抗旱类型冬小麦幼苗叶绿素荧光参数的影响

在人工气候室水培条件下,选用3个不同抗旱类型的冬小麦品种,研究了水分胁迫对冬小麦幼苗叶绿素荧光参数的影响。结果表明：水分胁迫下,冬小麦幼苗可变荧光(Fv)、最大荧光(Fm)、可变荧光与最大荧光比(Fv／Fm)、可变荧光与初始荧光比(Fv／Fo)、光化学淬灭系数(qF)均降低;而初始荧光(Fo)与非光化学淬灭系数(qNP)则升高,说明光系统Ⅱ(PSⅡ)受到了伤害,使得PSⅡ原初光能转换效率(Fv／Fm)、PSⅡ潜在活性(Fv／Fo)降低;光合电子传递、光合原初反应过程受到抑制,起光保护作用的热耗散提高。但水分胁迫下品种间各参数变化幅度不同。除qNF外,其余各参数均为抗旱性越强降低幅度越小,而qNF则升高幅度越大。说明水分胁迫对冬小麦幼苗叶绿素荧光参数的影响与其抗旱性密切相关。     

氮磷亏缺对玉米根系水流导度的影响

在人工气候室水培条件下,从单根和整株根系两个层次研究了N、P营养与玉米(Zea mays L.)根系水流导度(root hydraulic conductivity,Lpr)间的关系。结果表明：表型抗旱的杂交种F1代户单4号和母本天四的单根水导和整株根系水导均高于不抗旱的父本478,其中天四的单根水导最高,而户单4号的整株根系水导最高。N、P亏缺均使玉米单根水导和整株根系水导降低,但与N亏块相比,P亏缺的植株具有较高的整株根系水导和较低的单根水导。整株根系的水导更能反映植物根系的输水性能。     

Constitutive expression of human coagulating factor IX in HeLa cells by homologous recombination of the promoter

Constitutive expression of hFIX protein in nonhepatocytes was studied. The gene targeting vector was constructed and transferred into HeLa cells. With the detection system of PCR, we demonstrated that the endogenous hFIX promoter was replaced with an hCMV promoter when targeted insertion of the constructor was directed by the sequence homology. The expression of hFIX in the modified HeLa cells, 11.2 ng/106 cell/24 h, strongly suggested that hFIX gene could be activated by a powerful promoter in nonhepatocytes. The results would make it possible to examine the feasibility of re-regulate gene expression by promoter replacement.     

通过启动子同源重组研究人凝血因子Ⅸ的组成型表达

为了探索定点整合基因治疗血友病B的可行性,开展了在HeLa细胞中的hFIX组成型表达研究.同源重组载体p921构建后,电穿孔转入细胞,经过GCV和G418克隆选择,通过特异性的PCR证实了同源重组的发生,hCMV启动子定点替换hFIX基因在非肝细胞中可以被启动子hCMV转录表达,显示人为进行基因表达调控的可行性.