血管内皮生长因子及其受体在斑马鱼胚胎血管发育中的作用

血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)是一种多功能的细胞因子,其主要作用是促进血管内皮细胞增殖和增加血管通透性,是肿瘤及正常组织血管生成的中心调控因素。以VEGF为靶点的肿瘤血管靶向性治疗成为近几年肿瘤治疗的新途径。斑马鱼作为一种重要的模式生物,被广泛用于胚胎的分子发育机制、疾病模型的构建以及药物筛选等研究中。文章对斑马鱼作为心血管系统研究模型的优势及其血管研究方法做一阐述,重点对斑马鱼VEGF及其受体的最新研究进展做了介绍,并展望了其发展前景。     

角黄素及其在医学中的应用

角黄素是一种非维生素A源的酮式类胡萝卜素,具有抗氧化,免疫促进及增强细胞间隙连接通讯等多种生物学活性.大量的流行病学调查,组织培养,动物试验及人体干预试验表明,角黄素对多种癌症具有预防和治疗的功效.此外,角黄素还能够提高免疫力,保护皮肤和骨骼健康.目前市场上供应的角黄素产品主要通过有机化学合成制得.然而,天然角黄素容易吸收并且不涉及化学工艺而更受消费者欢迎.近年来,越来越多的产角黄素微生物菌株被分离和纯化,使得天然角黄素有进一步扩大应用的潜力和发展前景.从发酵培养的细菌中提取角黄素具有菌体繁殖速度快,生产周期短,发酵工艺较为成熟等优势,进行高细胞密度生产比较容易.因此,国外各国均把利用微生物发酵技术合成天然角黄素作为主攻方向,进行天然角黄素的研究与开发.在此,就角黄素的理化性质、医学应用、天然角黄素研究与开发的最新研究进展进行阐述和讨论,为我国角黄素的开发研究提供参考.     

不同时间段睡眠剥夺配合改良式水合氯醛保留灌肠法在婴幼儿肺功能检查中的效果分析

摘要 目的：探讨不同时间段睡眠剥夺配合改良式水合氯醛保留灌肠法在婴幼儿肺功能检查中的镇静效果。方法：前瞻性选取2018年2月~2020年8月本院收治并需行肺功能检查的婴幼儿临床资料,纳入194例婴幼儿作为研究对象,根据随机数字表法简单随机分为四组。对照组（n=48）不进行睡眠剥夺,短时段组（n=48）行短时段睡眠剥夺,中时段组（n=49）行中时段睡眠剥夺,长时段组（n=49）行长时段睡眠剥夺。对比四组婴幼儿的入睡时间、镇静效果及不良反应。结果：四组婴幼儿入睡时间的组间差异具有统计学意义（P＜0.05）。与对照组相比,联合睡眠剥夺干预的三组婴幼儿在10 min内进入睡眠的例数明显增多;随着睡眠剥夺时间增加,睡眠剥夺的三组婴幼儿超过30 min才进入睡眠的例数明显少于对照组。四组婴幼儿镇静效果的组间比较差异具有统计学意义（P＜0.05）;与对照组相比,联合睡眠剥夺干预的三组婴幼儿镇静效果明显升高,镇静总有效率均高于对照组（P＜0.05）。在实验期间,四组婴幼儿均出现不同类型的不良反应,各类型不良反应发生率及总发生率的组间比较,差异均无统计学意义（P>0.05）,但长时段组出现情绪烦躁的比例略高。结论：睡眠剥夺配合改良式水合氯醛灌肠法对婴幼儿具有良好的镇静效果,但长时段睡眠剥夺可能会使其情绪烦躁,需在检查完成后悉心安抚婴幼儿情绪。     

斑马鱼胸苷酸合成酶与自身mRNA的相互作用

斑马鱼(zebrafish,Danio rerio)是生物学领域中公认的研究脊椎类生物的模式生物.胸苷酸合成酶(thymidylate synthase,TS)是DNA从头合成的限速酶,多年来一直作为肿瘤化疗的重要靶酶.前期的研究表明,人和大肠杆菌中TS能与自身的mRNA结合,在翻译水平上具有反馈抑制自调控现象.斑马鱼作为药物模型的研究已成为热点研究领域,为了探讨斑马鱼的胸苷酸合成酶的调控规律,以及与人TS的相关性,利用原核表达,纯化获得高均一性斑马鱼TS蛋白,采用凝胶迁移研究了TS和其mRNA的体外结合,采用免疫共沉淀:RT-PCR技术研究了它们在体内的相互作用,实验结果表明,斑马鱼的TS在体内外均与自身的mRNA存在特异性的相互作用.研究说明,斑马鱼和人的TS具有高度生物学过程相关性,为构建斑马鱼抗肿瘤药理模型提供了理论基础.     

斑马鱼VEGF基因的siRNA表达载体构建、有效序列筛选及其对基因表达的干预性研究

为探索小干扰RNA（small interfering RNA,siRNA）表达质粒在研究斑马鱼血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）基因调控网络中的应用,构建了4个以斑马鱼VEGF基因为靶点的siRNA表达载体pSI—VEGF、pS2-VEGF、pS3-VEGF及pS4-VEGF。通过显微注射的方法将载体导入1-2细胞期斑马鱼体内,于胚胎发育的48h采用RT-PCR的方法检测VEGF基因的表达量,研究不同干扰序列对VEGF基因表达的干涉作用。结果显示,成功地构建了siRNA表达载体。针对不同位点的寡核苷酸序列抑制VEGF基因表达的效率有显著差异,其中注射了ps1-VEGF的胚胎出现了心包膜水肿、血流速度减慢、循环红细胞堆积等症状,同时肠下静脉、节间血管以及其它血管出现不同程度的发育缺陷。实验结果说明,pS1-VEGF可引起斑马鱼胚胎血管发育缺陷。