采用双荧光素酶报告法验证乳腺癌中miR-155靶标

MiR-155与乳腺癌发生发展密切相关. 本研究以乳腺癌组织和血清中均显著高表达的miR 155为研究对象,利用TargetScan和PicTar预测miR 155的靶基因. 根据miR 155与靶基因结合的保守性、动力学及靶基因功能,筛选出miR 155的靶基因ACTA1（actin alpha 1, skeletal muscle）和CEBPB（CCAAT/enhancer binding protein beta）,并用双荧光素酶报告法验证. 将ACTA1和CEBPB的3′-UTR（3′-untranslated region）全长序列载入海肾荧光素酶基因的下游,并构建结合位点的突变序列,得到pRL-TK-Aw、pRL-TK-Am、pRL-TK-Cw、pRL-TK-Cm载体.不同海肾荧光素酶载体转染Bcap37乳腺癌细胞,同时转染miR-155及内参对照萤火虫荧光素酶载体pGL3-control. 根据不同转染的海肾荧光素酶表达活性,运用SPSS软件分析,结果显示,CEBPB是miR-155在乳腺癌中的直接靶基因（P< 0.05）. miR-155通过下调CEBPB影响乳腺癌的发生.     

耐辐射动球菌耐辐射及相关特性研究进展

核能的利用对于缓解能源紧张、减少温室气体排放具有重要意义,然而核能利用产生的放射性废料对环境的影响成为核能发展的掣肘。耐辐射动球菌(Kineococcus radiotolerans)是一种从核污染环境中分离出来的,可在辐射、强碱、高盐、干旱、高金属离子浓度、高渗透压及强化学毒性等严酷环境中存活的革兰氏阳性耐辐射菌,有望应用于环境生物修复、医学等领域。本文就K.radiotolerans的生理生化特性、抗辐射性、抗氧化性、抗毒性有机物等特性的研究现状进行综述。     

miRNA-155对氟虫腈作用下斑马鱼ZF4细胞存活的影响

microRNA（miRNA）是一类长约20～24 nt的非编码单链小分子RNA. 环境毒理学研究表明,当生物暴露于环境化学物质时,会引起相关miRNA表达发生变化,进而调节基因的表达. 农药氟虫腈是一种苯基吡唑类杀虫剂,能影响斑马鱼中miR-155的正常表达,但尚未见异位表达的miR-155对斑马鱼细胞影响的研究. 本研究明确了异位表达的miR-155对氟虫腈作用下斑马鱼胚胎细胞ZF4存活的影响. 结果显示,氟虫腈处理ZF4细胞72 h的IC50值为39.05 μmol/L,瞬时转染miR-155 mimic,显著降低了ZF4细胞氟虫腈暴露的存活率.同时real-time PCR结果显示,其潜在靶基因cyb561d2表达显著降低;而转染miR-155 inhibitor,抑制细胞内源性的miR-155则可显著增强ZF4细胞抵抗氟虫腈细胞毒性的能力,同时cyb561d2表达则显著增高.以上结果表明,miR-155参与氟虫腈毒理学效应,其表达量的高低可以影响氟虫腈作用下ZF4细胞的存活率,而其可能的途径之一是通过潜在靶基因cyb561d2的表达调控来实现. 因此,miR-155可作为氟虫腈环境毒性的潜在的生物标志物,有望成为致癌环境化学物质对生物体作用机制研究的新途径.