具有NGF活性通过二硫键连接的 2个小分子多肽的制备及鉴定(英文)

神经生长因子 (NGF)作用广泛 ,β NGF是神经生长因子的活性部分 .由于 3对二硫键的影响 ,体外表达NGF很难形成正确折叠的肽链 .由于神经系统血脑屏障的存在 ,大分子肽链的给药途径是一个不可忽视的难题 .根据NGF的氨基酸序列及其晶体构象资料 ,选择CNBr在 9位Met处 ,胰蛋白酶在Arg或Lys处裂解 β NGF .经过SephadexG 5 0层析、DE 5 2纤维素离子交换层析和反相高压液相层析分离纯化后获得NGF活性片段 .氨基酸组成分析及氨基酸序列分析结果表明 ,此片段由 16肽GEFSVCDSVSVWVGDK与 14肽HWNSYCTTTHTFVK通过 1对二硫键连接而成 .8日龄鸡胚背根神经节生物活性分析表明 ,其最佳作用浓度为 0 0 0 1～ 0 1μg L .它的成功分离和鉴定为合成或表达高活性小分子神经营养物质奠定了关键而重要的基础 .     

急性给锂小鼠大脑皮层NOS活性与蛋白表达的时程变化

目的探讨急性给锂小鼠大脑皮层一氧化氮合酶(NOS)活性与蛋白表达的时程变化及其意义.方法选用昆明小鼠40只,分为对照组和腹腔注射1.5mmol/Kg氯化锂(LiCl)即刻、0.5h、1h、3h、6h、12h、24h组,每组5只.采用NADPH-d黄递酶组织化学和ABC免疫组化法,观察急性给锂后不同时程小鼠大脑皮层NOS和nNOS阳性神经元数目的变化.结果急性给锂即刻小鼠大脑皮层NOS和nNOS阳性神经元数目明显增加(P＜0.01),1h后达到高峰(P＜0.01),6h和12h恢复到正常水平(P＞0.05),24hNOS阳性神经元又明显增高(P＜0.01),nNOS阳性神经元处于正常水平(P＞0.05).结论本实验提示急性给锂对小鼠大脑皮层NOS和nNOS阳性神经元数目有一定影响,这种变化可能是锂影响脑发育及锂的神经毒性的机理之一.     

铅对大鼠齿状回神经元型一氧化氮合酶(nNOS)阳性神经元的影响

目的　通过研究铅对大鼠齿状回nNOS阳性神经元的影响 ,分析铅对学习记忆影响的机制。方法　Wistar大鼠采用饮水加 2 0 0 0 μg/ml醋酸铅 (PbAc)方法染毒 3个月后 ,用Y迷宫测试大鼠神经行为的改变 ;用原子吸收分光光度法测定血液中铅的含量 ,用免疫组化法检测齿状回中nNOS的阳性神经元数目。结果　染铅组大鼠学习记忆能力比对照组明显下降 ;染铅组大鼠血液铅含量较对照组的明显增高 ,差异有显著性 (P <0 0 5 ) ;染铅组大鼠齿状回nNOS阳性神经元数目比对照组明显减少 ,差异有显著性 (P <0 0 5 )。结论　铅暴露导致齿状回nNOS阳性神经元数目明显减少可能是铅损害齿状回LTP形成的分子机制之一     

青藏苔草的组织培养和快速繁殖

1植物名称 青藏苔草（Carex moorcroftii Falc ex Boott）。 2材料类别 种子。 3培养条件 （1）诱导培养基：MS＋NAA0．5mg&#183;L^-1（单位下同）＋6-BA1＋2,4-D0．5;（2）继代培养基：MS＋NAA0．5＋6-BA0．5＋2,4-D2;（3）芽分化培养基：MS＋6-BAI＋NAA1;（4）生根培养基：1／2MS＋IAA3。