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基因芯片技术检测3种肠道病原微生物方法的建立 总被引:2,自引:0,他引:2
目的:建立一种运用多重PCR和基因芯片技术检测和鉴定伤寒沙门氏菌、痢疾杆菌和单核细胞增生利斯特菌的方法。方法:分别选取伤寒沙门氏菌染色体ViaB区域中编码调控Vi抗原表达的基因(vipR)、痢疾杆菌编码侵袭质粒抗原H基因(ipaH)和单核细胞增生利斯特菌溶血素基因(hlyA)设计引物和探针,探针3'端进行氨基修饰,下游引物标记荧光素Cy3。在优化的PCR和杂交反应条件下,进行三重PCR扩增,产物与包括3种致病菌特异性探针的基因芯片杂交。在评价基因芯片的特异性和灵敏度之后,对临床样本进行检测。结果:只有3种目的致病菌的PCR产物在相应探针位置出现特异性信号,其他阴性细菌均无信号出现;3种致病菌的检测灵敏度均可达到103CFU/mL;检测30例临床样本的结果与常规细菌学培养结果一致。结论:所建立的可同时检测伤寒沙门氏菌、痢疾杆菌和单核细胞增生利斯特菌的基因芯片方法快速、准确,特异性高,重复性好,为3种肠道致病菌的快速检测和鉴定提供了新方法和新思路。 相似文献
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目的:建立用复合探针荧光定量PCR快速检测布鲁氏菌的方法。方法:研究根据BSCP31基因编码31KDa的布鲁氏杆菌表面蛋白的核苷酸序列设计特异引物,通过PCR法的特异性、灵敏度和重复性研究,建立了复合探针荧光定量PCR检测布鲁氏菌的方法。用于布鲁氏菌病的筛选和诊断。结果:结果表明该检测方法的特异性为100%,最低可检出10个拷贝的质粒DNA分子,可对1×10^1-1×10^6拷贝范围内的模板进行定量,最低可检测至1×10^2CFU/ml细菌。该方法的精密度好,阳性质控品和阴性质控品不同时间测定三次及同一时间五次重复实验结果CV值均小于5%。结论:本研究建立的复合探针实时荧光定量PCR检测布鲁氏杆菌的方法,可对布鲁氏病原菌进行快速检测,对布病的筛选和确诊具有重要意义。 相似文献
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摘要 目的:探讨右美托咪定联合不同剂量咪达唑仑对非小细胞肺癌(NSCLC)手术患者血流动力学和术后炎症介质、认知功能的影响。方法:纳入2019年1月-2021年2月期间来郑州大学第一附属医院接受手术治疗的NSCLC患者(n=120),按照麻醉方案的不同分为低剂量组(n=60)和高剂量组(n=60),两组均予以右美托咪定,在此基础上,低剂量组予以0.05 mg/kg咪达唑仑,高剂量组予以0.10 mg/kg咪达唑仑。对比两组患者的血流动力学、炎症介质、认知功能、苏醒质量和不良反应发生率。结果:两组麻醉诱导后10 min(T1)~拔管后5 min(T3)时间点心率(HR)、平均动脉压(MAP)升高后下降,且拔管即刻(T2)、T3时间点高剂量组低于低剂量组(P<0.05)。高剂量组的苏醒后疼痛视觉模拟评分(VAS)评分低于低剂量组,睁眼时间、拔管时间、麻醉恢复室(PACU)停留时间均短于低剂量组(P<0.05)。两组术前、术后3 d、术后7 d白介素-1(IL-1)、C反应蛋白(CRP)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)升高后下降,且术后3 d、术后7 d高剂量组低于低剂量组(P<0.05)。两组术后1 d、术后3 d、术后7 d简易精神状态量表(MMSE)评分组间对比未见统计学差异(P>0.05)。两组不良反应发生率组间对比无统计学差异(P>0.05)。结论:与0.05 mg/kg咪达唑仑相比,右美托咪联合0.10 mg/kg咪达唑仑定用于NSCLC手术患者,维持血流动力学稳定、提高苏醒质量、减轻炎症应激的效果更为显著,且不增加认知功能损害和不良反应发生率。 相似文献
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