核酸去甲基酶AlkB在毕赤酵母中的表达纯化及在tRNA相关研究中的应用

[目的]核酸的甲基化修饰是一种常见的化学修饰形式,具有重要的生物学功能,却也在一定程度上给一些核酸研究过程带来了技术难度。tRNA上具有的大量甲基化修饰会阻碍逆转录进程,从而降低荧光定量PCR (real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)和高通量测序对其的检测效率。来自大肠杆菌(Escherichia coli)的AlkB蛋白是一种多功能的脱烷基化酶,可以去除DNA和RNA上多种甲基化为代表的修饰,有望解决以上问题。[方法]针对大肠杆菌来源的AlkB,分别尝试在大肠杆菌和毕赤酵母(Pichia pastoris)表达系统中进行诱导表达和纯化,对纯化获得的AlkB进行酶学性质测定。最后以tRNA_UAU^Ile等两种tRNA为代表,研究AlkB的处理对于荧光定量PCR法检测tRNA表达水平的影响。[结果]AlkB在大肠杆菌中表达时多以包涵体形式存在,但是在毕赤酵母中可以成功分泌表达。使用镍柱分离纯化后获得了纯度高于95%的AlkB蛋白,其酶学性质参数如...     

耐热真菌的分类鉴定及rDNA-ITS系统发育分析

分别从山东、山西、河北、陕西、河南、云南、江西、海南、新疆、内蒙古、甘肃、广州等地实地采集堆肥、培养料、草堆等标本600多份,分离鉴定出耐热真菌28种,其中包括2个中国新记录种,沙生梭孢壳Thielavia arenaria和丰孢木霉Trichoderma saturnisporum,其余26个为中国已知种。在形态分类的基础上,对所分离鉴定的28株耐热真菌及购买的3株耐热真菌,进行rDNA-ITS序列测定,所测序列片段长度为554－895bp。将所测的31个和从GenBank下载的15个耐热真菌的rDNA-ITS序列构建NJ系统发育树,该树较好地显示了耐热真菌的系统进化关系,有力地支持了形态学的观点。     

急性心肌梗死患者PCI治疗后抑郁对心率变异性、内皮功能及不良心血管事件发生率的影响

目的:探讨急性心肌梗死(AMI)患者经皮冠状动脉介入(PCI)治疗后抑郁对心率变异性(HRV)、内皮功能及不良心血管事件(MACE)发生率的影响。方法:选择2017年1月-2018年12月期间在本院接受PCI治疗的AMI患者117例作为研究对象,根据PCI术后出院当日的抑郁自评量表(SDS)评分值将其分为抑郁组(评分值≥53分)41例、非抑郁组(评分值<53分)76例。对比两组患者HRV相关指标[正常RR间期标准差(SDNN)、5 min内正常RR间期平均值标准差(SDANN)、相邻正常RR间期差值均方的平方根(RMSSD)、总功率(TP)、低频功率(LF)、高频功率(HF)、低频功率与高频功率比值(LF/HF)]、内皮功能指标[内皮依赖性血管舒张功能(FMD)、非内皮依赖性血管舒张功能(NMD)]水平差异,记录两组随访期内MACE发生情况。结果:PCI术后出院当日,抑郁组患者的HRV时域指标SDNN、SDANN、RMSSD水平低于非抑郁组患者;频域指标中LF、LF/HF的水平高于非抑郁组,HF的水平低于非抑郁组(P<0.05),两组患者TP水平的差异无统计学意义(P>0.05)。抑郁组患者的FMD、NMD水平均低于非抑郁组患者,差异有统计学意义(P<0.05)。随访期内,抑郁组患者的MACE总发生率、再发心肌梗死发生率高于非抑郁组,差异有统计学意义(P<0.05)。两组患者顽固性心绞痛、新发心肌梗死、心力衰竭、心源性死亡发生率的差异无统计学意义(P>0.05)。结论:AMI患者PCI后合并抑郁可能对心血管系统造成负面影响并最终增加MACE的发生风险。     

十二烷基硫酸钠对斑马鱼抗氧化能力的影响

以斑马鱼Brachyclanio rerio为实验对象,用不同浓度(0.5、3.0、18.0mg/L)的阴离子表面活性剂十二烷基硫酸钠(SDS)进行3、14、28、42、63d的暴露实验,通过测定肌肉组织中的总抗氧化能力(TAC)、超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量三项指标研究SDS对斑马鱼抗氧化能力的影响。结果表明:0.5mg/L和3.0mg/L实验组SOD活性受到显著抑制(P<0.05),TAC水平和MDA含量与对照组无显著差异;18.0mg/L实验组在TAC水平和SOD活性上均表现为显著降低(P<0.05或P<0.01),MDA含量较对照和低剂量组亦有较大幅度增加,显示该组受试个体的抗氧化能力受到了显著抑制。研究结果对评价水环境中SDS毒性生物效应具有参考意义。     

中国常见食物ω-3脂肪酸含量

目的：查阅国内外食物成分数据，建立中国常见食物ω 3脂肪酸的含量数据表，为ω-3脂肪酸膳食营养研究提供参考。方法：查找国内外食物数据库中ω 3脂肪酸含量的数据，根据中国居民饮食习惯，整理出中文ω 3脂肪酸食物成分表。结果：经筛选比较，最终收集日本文部科学省于2015年修订的日本食品标准成分表中368种、美国农业部发布于2014年更新于官网的食物成分表中56种和《中国食物成分表2004》中6种食物ω 3脂肪酸的含量。将中国居民常吃的食物按照粮谷类、豆类、蔬菜类、菌藻类、水果类、坚果类、畜肉类、禽肉类、软体类水产、甲壳类水产、鱼类、蛋奶类、油脂类、其他类分列出食物的ALA、EPA和DHA的含量。