冷暴露对大鼠若干内分泌活动的影响

冷暴露对大鼠若干内分泌活动的影响李士泽杨焕民杨玉英袁学军史光华１邵庆梅１（黑龙江八一农垦大学动物生理生化教研室,密山１５８３０８;１天津实验动物中心）动物在寒冷环境条件下,机体内分泌系统参与动物的冷应激调节过程,其中甲状腺激素、肾上腺素等起重要作用...     

急性冷暴露和冷习服对大鼠和雏鸡某些内分泌活动影响的比较生理学研究

目的：探讨冷应激对哺乳类和禽类某些内分泌活动影响的比较生理学机制。方法：Wistar大鼠和罗曼雄性雏鸡进行急性冷暴露和冷习服实验,探讨急性冷暴露和冷习服对大鼠和雏鸡某些内分泌活动的影响。结果：大鼠在急性冷暴露后血清T3水平在4-36 h有不同程度的升高,而雏鸡的T3浓度则在冷暴露后除12 h有所升高外,其他时间均低于冷暴露前的水平;大鼠血清T4在冷暴露后2 h时升高,而后逐渐降低,而雏鸡冷暴露后2~4 h升高,12 h降低,而后又升高;血清胰岛素（Insulin）的变化趋势大鼠和雏鸡基本一致,均在冷暴露2 h升高,而后渐降;皮质醇（Cortisol）的变化,大鼠为冷暴露后2 h明显升高,而后渐降,而雏鸡则一直保持较高水平;冷习服后大鼠和雏鸡血清的几种激素水平变化趋势基本一致,即冷习服后血清T3升高,T4下降,胰岛素降低,而皮质醇则呈升高趋势。结论：冷应激对哺乳动物和禽类的内分泌活动具有差异性。     

冷应激家兔血压与血清细胞因子的变化及其相互关系

应激在人类健康与疾病领域的研究中占据着重要的地位。有研究发现,约75％-90％的疾病与应激机制的激活有关。大量流行病学资料和试验表明,应激容易引起病毒感染、应激性溃疡、心血管病、精神病和肿瘤等疾病。动物试验也证实,寒冷环境能引起高血压的发生。目前,低温对机体免疫功能的影响已逐渐引起了人们的关注,其影响机制十分复杂。应激对机体免疫的影响已有报道,[第一段]     

α-烯醇化酶基因干扰表达对籽鹅卵泡颗粒细胞增殖及凋亡的影响*

目的: 研究α-烯醇化酶(ENO1)基因干扰表达对籽鹅卵泡颗粒细胞增殖、凋亡和细胞周期的影响。方法: 原代培养籽鹅F1级卵泡颗粒细胞(复合培养),将ENO1基因干扰表达重组质粒转染至籽鹅卵泡颗粒细胞。实验分为四组:ENO1干扰表达组(RNAi)、无关序列干扰组(NC)、培养液组(Control)、转染试剂组(Lip)。流式细胞术检测干扰组和对照各组的凋亡率、细胞周期时相性。结果: ENO1基因干扰表达使籽鹅卵泡颗粒细胞增殖速度变慢,凋亡率增加,G2/M期颗粒细胞比例增高。结论: ENO1基因干扰表达可使籽鹅卵泡颗粒细胞周期发生G2/M期阻滞,诱导细胞发生凋亡,抑制细胞增殖。     

三江白猪与其他5个品种猪的群体遗传关系的分析

应用100条RAPD引物对三江白猪及其杂交亲本长白猪和东北民猪,以及大约克夏、圣特西和法系大白猪进行亲缘关系的DNA多态分析。其中15条引物的扩增结果具有明显的多态,将其扩增结果进行聚类分析,发现三江白猪与长白猪(遗传距离d=0.090)、与东北民猪(d=0.175)的亲缘关系较近,与大约克夏(d=0.263)、法系大白(d=0.223)、圣特西猪(d=0.580)的亲缘关系较远。     

BALB/C鼠冷诱导RNA结合蛋白的原核表达、纯化及其单克隆抗体的制备

为了获得冷诱导RNA结合蛋白（CIRP）的单克隆抗体,本通过RT-PCR 方法从冷处理BALB/C小鼠睾丸的总RNA中扩增获得CIRP基因序列,克隆至pGEM-T载体,获得重组质粒pGEM-CIRP,并进行序列测定。将测序正确的CIRP序列插入质粒pQE-30-Xa,构建表达载体pQE-30-CIRP并转化E.coli M15,IPTG 诱导后SDS-PAGE分析表明CIRP基因在大肠杆菌中获得高效表达, 可溶性分析表明CIRP融合蛋白以包涵体形式表达。采用Ni-NTA亲和层析、电洗脱纯化融合蛋白CIRP,将纯化的蛋白免疫BALB/C小鼠,三次免疫后,间接ELISA测定小鼠效价,效价为1:105,采用杂交瘤技术融合,用间接ELISA法、有限稀释法筛选阳性杂交瘤细胞,通过Western blot对McAb特异性进行鉴定,利用间接ELISA方法对McAb的Ig亚类(型)、杂交瘤细胞上清、腹水效价进行测定。结果获得了1A6、2D3、3C5及4C4 4株稳定分泌CIRP McAb的杂交瘤细胞株,1A6、3C5、4C4产生的单克隆抗体亚类均为IgG2b,2D3产生的单抗亚类为IgG3,轻链均属κ链。4株单克隆细胞上清效价均在1:103以上,腹水效价均达1:107以上。Western-blot分析4株单抗均能与重组蛋白CIRP特异性结合,与空载体对照没有反应。以3C5细胞株的腹水为一抗,检测冷应激小鼠多种组织中天然CIRP蛋白表达,结果显示3C5细胞腹水能识别心、肝、脾、肺、肾、脑、睾丸等多种组织中天然CIRP,并与能之与结合。这证明该抗体具有良好特异性和结合活性,制备的单克隆抗体可以用于深入开展CIRP的功能性和应用性研究。     

利用微卫星标记分析不同鹅种的遗传变异

应用微卫星标记技术以6个品种鹅(东北白鹅、籽鹅、皖西白鹅、豁眼鹅、莱茵鹅、朗德鹅)为实验材料分析不同品种鹅的遗传多样性。利用等位基因频率计算出各群体的平均遗传杂合度(H)多态信息含量(PIC)和群体间的遗传距离D_S, 结果表明: 7个微卫星位在6种鹅群体中均表现为高度多态性, 可作为有效的遗传标记来分析各鹅群体的遗传多样性和系统发生关系。实验各群体的杂合度均较高, 平均杂合度在0.6617(莱茵鹅)~0.8814(籽鹅)之间。各品种的PIC值变动大小在0.6145(莱茵鹅)~0.7846(籽鹅)这与杂合度的高低一致。依据D_S遗传聚类进行UPGMA聚类分析结果6个品种被分为2类: 国内地方品种东北白鹅、籽鹅、豁眼鹅及皖西白鹅为一类; 外来鹅种莱茵鹅与朗德鹅为一类。表明微卫星标记可准确地反映6个品种的亲缘关系及其所在地域分布上的差异, 适宜于群体遗传结构及遗传关系的研究, 是畜禽遗传多样性研究与保护的有效分析手段。     

冷暴露对健康雏鸡某些血液生化指标及胃肠道粘膜充血的影响

应激是机体对外界或内部的各种非常刺激所产生的非特异性反应的总和。应激主要表现为交感神经 肾上腺髓质系统兴奋性增强 ,下丘脑 肾上腺皮质功能增强 ,以及由此引起的一系列代谢变化。应激过强易使机体产生许多异常反应 ,如胃肠溃疡、免疫功能改变等病理现象 ,严重者甚至引起死亡。关于禽类冷应激方面的研究报道很少 ,但在实际饲养管理中 ,冷应激却是北方高寒地区养殖现场常见的问题 ,新生动物对其尤为敏感 ,危害也更为严重。本研究旨在探索动物在冷应激和冷适应情况下机体生理机能的某些变化规律 ,为更好的指导育雏工作中的温控以及提高动…     

新生犊牛胰腺内分泌机能的某些特点

６头装有暂时性颈静脉血管瘘的黑白花品种新生犊牛,在从出生至１５日龄的围产期内每天测定血浆葡萄糖（Ｇ）、胰岛素（Ｉｎｓ）和胰高血糖素（Ｇｃ）的基本浓度,可见１日龄喂初乳前Ｇ、Ｉｎｓ和Ｇｃ的浓度分别是１１９６．０±１５２．２ｍｇ／Ｌ、（７．３３±１．４３）×１Ｏ３Ｕ／Ｌ和６８５．３９±９５．４２ｎｇ／Ｌ。Ｇ于第２天明显下降,第３天回升,以后相对稳定;Ｉｎｓ第２天升高,以后下降,５日龄后相对稳定;Ｇｃ４日龄内逐日下降,５日龄后达到相对稳定水平。第１天喂初乳引起Ｉｎｓ显著升高,Ｇｃ下降,Ｇ无变化或者降低;以后喂初乳或常乳均引起Ｉｎｓ和Ｇ一致性升高,进食引起的Ｉｎｓ释放反应随日龄增长明显增加,Ｇｃ下降。不同日龄时灌注精氨酸均引起Ｉｎｓ显著增加,Ｇｃ早期无显著变化,７日龄后显著增加,同时Ｇ并无明显变化。灌注Ｇ引起Ｇ和Ｉｎｓ两者都增加,Ｇｃ下降。随日龄增长胰岛Ｂ细胞对精氨酸和Ｇ的反应明显加强。     

人层粘连蛋白α4链LG3组件的克隆、测序及在原核细胞中的表达

用Trizol法提取胎盘组织总RNA,通过RTPCR方法获得人层粘连蛋白α4链LG3组件的特异扩增产物。将PCR产物克隆入PMD18T载体中,PCR与酶切鉴定正确后进行序列测定。用测序正确的克隆片段与原核表达载体PET28a进行体外重组,构建了LG3的原核表达载体,并在BL21(DE3)菌株中得到了表达。