金黄滴虫细胞核微丝系统的初步观察

金黄滴虫细胞核内经常存在着许多直径约为7nm的微丝。这些徽丝大多组合成走向不定的徽丝束,微丝束交织而成遍布核内的网架。核被下面微丝束较多,它们的存在常使核被外凸而成隆脊。核内微丝与核内结构如核仁、染色质等似乎都是相连的。有些微丝横跨核被,一端位于核内,另一端位于核周腔中,并靠近叶绿体。核周腔和内质网腔中也存在着微丝和另一种纤维,印管状纤维。用细胞松弛素B处理后,细胞核、核周腔和内质网腔中的微丝均消失,细胞核的形态也发生变化,似乎微丝网架有支持细胞核的作用。核内微丝可能是在内质网中组装,然后经核周腔进入核内的。     

硒对金黄滴虫生长谷胱甘肽过氧化物酶及超微结构的影响

金黄滴虫在含硒1ppm的培养液中的生长情况和超微结构与对照组的细胞基本相同。在含硒6ppm的培养液中,前48小时细胞生长正常,以后容器中出现类似硫化氢的气味,细胞数量急剧下降,细胞变圆,运动缓慢,叶绿体变小并且绿色减退,金藻糖泡增大,在干涉显微镜下可见核仁中央下陷,成一小凹。在电镜下,核仁的中央区电子密度很低,这一区域可能相当于干涉镜下所见的小凹。在另一切面上可以看出这一区域是有开口与核基质相通的。电镜照片还揭示叶绿体结构松散,类囊体减少,在稀薄的基质中出现一些直径约为0.4—0.5μ的核仁样小体。部分细胞的线粒体形态异常,内质网及管状纤维增多。此外,作者测定了细胞谷胱甘肽过氧化物酶的活性的变化,并对硒的作用、核仁和叶绿体的变化以及核仁样小体的性质进行了讨论。     

金黄滴虫粘液泡的研究

用酸性粘多糖特异性染料(阿利新蓝或阿利新蓝 甲基绿)和脂肪特异性染料(如苏丹Ⅲ等)同时染活细胞,粘液泡染成蓝色,脂肪滴染成红色。活细胞的粘液泡有自发的蓝色荧光。脂肪滴无荧光。用含有阿利新蓝的戊二醛固定样品,再用O_s真O_4后固定,进行电镜观察,粘液泡呈电子致密的深黑色小泡,而脂肪滴呈灰色小泡,粘液泡的表面常盖有毛状的附属物,其形态反映了粘液泡的液体性质。在同泽的固定材料中,细胞表膜也常存在一厚层与粘液泡表面相似的毛状物质。二者应含有相同的成分,即都含有酸性粘多糖。表膜的粘多糖外被可能主要是由粘液泡向外释放的物质所形成的。电镜细胞化学的检定还表明粘液泡的表面有酸性磷酸酶的活性。粘液泡和盘状泡是同源的细胞器。     

金黄滴虫叶绿体拟核的荧光镜检及电镜观察

金黄滴虫细胞在用DNA特异的荧光染料DAPI处理后,在荧光显微镜下细胞核和叶绿体拟核均散发蓝色荧光,穗晰可见。每一叶绿体有一拟核,拟核沿叶绿体的周缘排列,形状相当于叶绿体的轮廓,成不规则的两叶形环。环的全长约在20—30υm之间。 拟核环大多是单线的,有些拟核环出现或短或长的双线部分,有时甚至几乎整个拟核环都可变为双线。这表明拟核环通过“纵裂”而形成双环,在叶绿体分裂时,分别进入两个子叶绿体。这一情况在电镜照片上得到了证实。 叶绿体分裂和细胞分裂之间似乎不存在严格的相关性,这是导致细胞中叶绿体数目多于1个的原因。     

兰花——异彩纷呈百花之灵

“人为万物之灵,兰为百花之英”。历来养兰、赏兰、品兰都是中国文人的雅趣和内敛高洁的精神折射;而在众多的文学艺术作品中,为兰挥毫作赋者不计其数,也正是“寸心原不大,容得许多香”。     

伸缩泡

淡水原生动物的伸缩泡能排出不断渗入细胞的水份,以保持细胞内的水盐平衡。海洋的和寄生的原生动物,由于它们和生活的环境是等渗的,一般都没有伸缩泡。某些淡水藻类的游动孢子也有伸缩泡。在多细胞动物中,只有某些淡水海绵的领细胞和变形细胞有伸缩泡(图8),这可能反映了海绵的原始性。一般形态伸缩泡的直径一般都在数至数十微米之间,可以在普通光学显微镜下看到。大变形虫(Amoeba proteus)、草履虫(Paramecium)和四膜虫(Tetrahymena)等都是观察伸缩泡的好材料。衣藻(Chlamydomonas)和眼虫(Euglena)的伸缩泡也容易观察。但是衣藻伸缩泡较小,必须用高倍镜才能看清。用相差显微镜观察伸缩泡,或在介质中加入少许墨汁,都能看得很清楚。悬滴法也是观察活细胞伸缩泡     

应用苔藓植物监测水体污染——研究、应用与展望

苔藓植物是环境污染的重要指示生物,目前,国内开展的主要是应用苔藓植物进行大气污染的监测,事实上国外已有较多应用苔藓植物进行水体质量监测的工作。该文首先统计分析了国际上应用苔藓植物进行水环境质量监测研究文献,然后从苔藓植物监测的水体污染物类型、监测用苔藓植物种类、苔藓植物材料存活状态对监测效果的影响、影响苔藓植物富集水体重金属元素的环境因素、应用苔藓植物进行水体污染监测的主动与被动方法、样品预处理方法和水体质量监测的应用案例等方面,系统介绍了国际上应用苔藓植物进行水体污染监测的研究和应用概况,提出了今后应用苔藓植物监测水体污染研究值得关注的领域。     

靶向HIV-1 vif的高效siRNA的筛选及慢病毒介导的体外抗病毒研究

RNAi技术在艾滋病治疗研究中已展现出巨大的潜力,兼具高效抑制特性和保守性的siRNA靶位是其获得成功应用的重要基础.本研究选择以HIV-1 vif基因为靶区筛选高效保守的RNAi序列,共选择设计了30个识别不同位点的siRNA序列,以pSUPER为载体构建了相应的shRNA表达质粒.通过与pNL4-3质粒在293FT细胞中进行共转染抑制实验,以及对初筛获得的高效序列进行保守性分析显示siRNA-vif37序列具有高效抑制效率和较好的保守性特征.通过与pGL3-vif报告质粒的共转染实验证明siRNA-vif37具有vif基因抑制特异性.带有shRNA-vif37表达元件的重组慢病毒转导后的MT-4细胞在HIV-1NL4-3体外攻毒实验中可显示出较有效的抑制病毒复制的能力,本研究进一步对转导后细胞进行克隆化筛选,获得稳定整合shRNA-vif37表达元件的MT-4-vif37细胞克隆,该细胞具有显著的抑制病毒复制的能力,在高攻毒剂量下仍可获得良好的抑制效果.本研究为进一步应用RNAi技术进行新型艾滋病治疗方法研究提供了重要基础.     

水痘-带状疱疹病毒糖蛋白N的单克隆抗体制备及初步研究

水痘-带状疱疹病毒(VZV)是水痘和带状疱疹的共同致病原,其糖蛋白N(gN)在子代病毒的组装、成熟和出胞过程中发挥重要作用。但是目前关于VZV gN的研究还很少,其蛋白性质和具体分子功能仍不清楚。本研究目的是制备抗VZV gN的单克隆抗体,对该蛋白在VZV感染细胞和人皮肤组织内的表达和分布情况进行初步探究。本研究选择抗原性和亲水性较强的gN区段基因,构建rGST-gN融合蛋白的原核表达质粒,将鉴定正确的重组质粒转化大肠杆菌后用IPTG诱导融合蛋白表达,经亲和层析柱纯化rGST-gN融合蛋白后使用PSP酶切除GST标签,将获得的重组蛋白rgN免疫BALB/c小鼠,使用杂交瘤技术制备其单克隆抗体;共获得24株稳定分泌抗VZV gN单克隆抗体的杂交瘤细胞株,选取其中一株性能最优的12E10进行单克隆抗体生产纯化和抗体鉴定;单克隆抗体12E10为IgG2a亚型,其ELISA效价达到1∶10 000;通过Western blot、免疫荧光及免疫组织化学染色方法鉴定,该抗体能够特异性识别细胞和组织中表达的VZV gN;本研究应用该抗体首次确定了gN在VZV感染细胞中的反式高尔基体定位,并且确定了gN在VZV感染人皮肤组织中的表达。以上工作为今后深入研究VZV gN功能奠定了基础。