褐飞虱磷脂酰肌醇3激酶p85α亚基基因NlPIK3R1的克隆与功能分析

【目的】PI3K信号通路在生物体中发挥重要功能,涉及糖和脂质的代谢、细胞和组织生长以及生物个体寿命等。本研究旨在探明该通路中磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)在褐飞虱Nilaparvata lugens中的功能。【方法】根据转录组提供的PI3K p85α核心序列信息,应用c DNA末端快速克隆的技术(RACE)获得了编码PI3K p85α的基因Nl PIK3R1的全长c DNA(Gen Bank登录号为KP635379),并应用荧光定量PCR和通过给成虫喂食ds Nl PIK3R1对Nl PIK3R1进行RNA干扰(RNAi)分别对该基因的表达规律和功能进行了研究。【结果】荧光定量PCR测定结果表明,Nl PIK3R1在褐飞虱若虫和雄成虫中表达量均较低,但在怀卵雌成虫中大量表达。RNAi结果表明,给褐飞虱成虫喂食0.1和0.5μg/μL ds Nl PIK3R1均导致Nl PIK3R1的表达明显受到抑制,高浓度组的抑制效果尤为明显。喂食ds Nl PIK3R1对褐飞虱成虫具有极显著致死效果,高浓度组的褐飞虱成虫在饲喂第7天时存活率仅为37.5%,相比于空白对照组(87.00%)和ds GFP对照组(76.67%)均达到了极显著差异(P0.01)。对Nl PIK3R1的RNAi导致褐飞虱成虫羽化率下降和体重变轻。【结论】本研究结果显示,Nl PIK3R1基因对褐飞虱的生存、生长和发育具有重要作用,可以作为防治褐飞虱的潜在靶标。     

云南松小孢子发生及雄配子体形成

本文详述了云南松花粉母细胞的减数分裂、小孢子发生及雄配子体形成过程。在研究中发现:花粉母细胞在减数分裂中有明显的不同步现象;有少数发育畸形的小孢子;在减数分裂后期Ⅰ有染色单体桥及染色体片断出现;雄配子体发育过程中核分裂的方向异常;染色体数目2n=24与其它报道一致。     

凤尾丝兰子房离体培养的器官发生及植株再生

用凤尾丝兰(Yucca gloriosa L.)离体子房为外植体接种材料,在附加KT、2,4-D及LH的MS培养基上诱导子房膨胀及愈伤组织发生;在附加6-BA、NAA及LH的MS培养基上诱导大量丛生芽;转至MS附加IBA的培养基上则能诱导根系形成;在间歇性高温灭菌及药物拌土的基质上,移植成活率达72%以上,得到了批量成苗。经镜检,试管苗与原株根蘖苗染色体数目一致。并对培养中各分化阶段进行了过氧化物酶活性测定,发现过氧化物酶活性随分化进展逐渐提高,呈正相关。     

褐飞虱核糖体小亚基蛋白S8基因NlRPS8的克隆及其表达分析

【目的】核糖体蛋白在生物体内具有重要作用,本研究旨在探明核糖体蛋白S8在褐飞虱Nilaparvata lugens生长发育过程中的表达规律和功能。【方法】本文根据褐飞虱基因表达谱提供的差异表达基因信息及转录组提供的基因核心序列,结合褐飞虱基因组比对分析,对褐飞虱核糖体S8基因进行了预测,并通过RT-PCR获得了褐飞虱核糖体小亚基蛋白S8的全长c DNA序列,命名为NlRPS8(Gen Bank登录号:KU341337)。【结果】NlRPS8基因全长627 bp,编码208个氨基酸。进化分析表明,褐飞虱与桑粉介壳虫Maconellicoccus hirsutus亲缘关系最为接近。应用荧光定量PCR分析了基因NlRPS8的表达规律,结果表明,NlRPS8基因在褐飞虱怀卵雌虫中表达量最高,而在雄成虫、初羽化雌成虫与1~5龄若虫表达量相对较低;在褐飞虱体内,NlRPS8基因在卵巢中表达量最高,中肠次之,在其他部位表达量较低。在抗性品种ASD7和RHT上,NlRPS8基因表达量分别为感性品种TN1上的1.99倍和2.14倍。NlRPS8基因在经过饥饿处理1 d的褐飞虱组中表达量为正常组的1.6倍。【结论】研究结果显示NlRPS8基因在褐飞虱生长、繁殖中发挥作用,为进一步研究NlRPS8基因在褐飞虱生长发育和对抗性品种适应中的功能提供了线索。     

银木组织培养试验

1.植物名称银木(Cinnamomum albosericeum),俗称大叶香樟。 2.材料类别幼苗嫩茎、茎端等。 3.培养条件利用H、MS和Q_3培养基。Q_3是参考了H.C.M.Whitehead等和李春启等的基本培养基加以改良。其配方是(毫克/升):NH_4NO_32000;KNO_31800;MgSO_400;KH_2PO_4200;CaCl_2500;MnSO_4·H_2O25;     

凤尾丝兰的组织培养

植物名称:凤尾丝兰(Yucca gloriosa)。材料类别:幼嫩子房。培养条件:切取不同发育时期的花蕾(花蕾长