芸蔓属查尔酮异构酶基因家族RNA干扰载体的构建

作为类黄酮途径的第二步关键酶,查尔酮异构酶(chalcone isomerase,CHI)催化四轻基查尔酮成为抽皮素,用于合成各种类黄酮物质,影响多种性状.芸蔓属含有多种重要的油料、蔬菜和观赏植物.本研究从甘蓝型油菜克隆了芸蔓属CHI基因家族的干扰片段BCHII(761 bp),采用NcoI+AatII和BarnHI+XbaI双酶切方案分别将其反义片段和正义片段亚克隆到植物RNA干扰(RNAi)平台载体pFGC5941M的启动子与间隔区、间隔区与终止子之间,形成了11674by的RNAi载体pFGC5941M-BCHII(简称pBCHID,多种PCR检测表明2个片段的插入方向正确,重组载体完整,将其转化根癌农杆菌菌株LBA4404以后获得了工程菌株LBA4404-pBCHII-.本研究结果将促进研究CHI与芸蔓属异花授粉、植株色彩、黄籽和抗逆性等性状的关系和开展相关分子育种.     

甘蓝型油菜SAMDC3基因及其启动子的克隆与分析

S-腺苷甲硫氨酸脱羧酶(SAMDC)是植物体内亚精胺和精胺前体物质形成的关键酶。本研究克隆了甘蓝型油菜(Brassica napus)BnSAMDC3基因家族2个成员的全长cDNA和启动子序列,并对其诱导表达特性进行了鉴定。BnSAMDC3-1(GenBank accession No.HM013966)和BnSAMDC3-2(GenBank ac-cession No.HM013967)的全长cDNA分别为1746bp和1754bp,开放阅读框(ORF)长度分别为1101bp和1104bp,在大ORF上游132bp处均包含一个171bp的小ORF。BnSAMDC3基因在叶片中表达量较高,受高温和干旱抑制。6-BA、GA3和SA抑制BnSAMDC3-1的表达,而GA3和甘露醇诱导BnSAMDC3-2表达上调。BnSAMDC3基因启动子具有多个与胁迫和激素诱导相关的顺势调控元件,表明BnSAMDC3可能通过ABA、6-BA和SA信号途径介导植物对非生物胁迫的响应。本研究将有助于进一步探讨甘蓝型油菜抗逆的分子机理,为甘蓝型油菜的栽培和品质改良奠定基础。     

Cdk2蛋白和CyclinE在胆管细胞癌中的表达及临床意义

目的:探讨细胞周期蛋白依赖性激酶2(Cdk2)和细胞周期蛋白E(CyclinE)在胆管细胞癌中的表达及临床意义.方法:收集武汉大学人民医院病理科2002-2008年胆管细胞癌存档蜡块40例,其中男性20例,女性20例.另取胆管细胞癌周围正常组织5例作对照.采用免疫组织化学方法检测各组中Cdk2蛋白和CyclinE的表达,利用HPIAS-2000图像分析系统测定各组中Cdk2蛋白和CyclinE表达的平均光密度和平均阳性面积率.结果:胆管细胞癌中Cdk2蛋白和CyclinE呈高表达,对照组中Cdk2蛋白和CyclinE呈低表达,胆管细胞癌组与对照组之间Cdk2蛋白和CyclinE表达的平均光密度及阳性面积率有显著性差异(P＜0.05).结论:Cdk2与CyclinE在胆管细胞癌的发生发展中发挥正性调节因子的作用.     

贝加尔湖的昆虫之约——南京大学赴贝加尔湖考察团生物组纪实片段

2006年8月,当炎热的夏日在南京城疯狂肆虐的时候,我们南京大学野外科学考察团踏上了赴贝加尔湖科考之旅。