螺旋槽圆盘柱高速逆流色谱及其在多肽和蛋白分离中的应用

本研究重点考察了实验室自行设计研制的J型螺旋槽圆盘柱逆流色谱系统对正丁醇-醋酸-水体系和聚乙二醇(PEG1000)-磷酸盐-水双水相体系的固定相保留能力,并研究了流动相流速(F)、柱转速(w)和温度(T)等因素对固定相保留率(Sf)的影响。结果表明,该新型分离柱可使两种溶剂体系在L-I-T、U-O-H和L-I-H三种洗脱模式下都可获得较高的Sf,即以下相为流动相,采用由螺旋槽内端(I)向外端(O)的流通方式,或以上相为流动相,采用由螺旋槽外端(O)向内端(I)的流通方式可以获得较高的固定相保留。其保留能力较传统的螺旋管逆流色谱柱有显著提高。Sf随着w的增加而升高,随着F的增加而降低,且Sf与F1/2/w线性相关。20oC～45oC之间温度对Sf影响不明显,但低于20oC不利于双水相体系的保留。应用研究表明,采用正丁醇-醋酸-水(4:1:5,V/V/V)和PEG1000-磷酸钾盐-水(12.5:12.5:75,W/W/W)(pH9.0)体系可以在较高的流动相流速和较高的固定相保留下分别实现对亮氨酸-酪氨酸(Leu-Tyr)和缬氨酸-酪氨酸(Val-Tyr)二肽混合物、细胞色素C与肌红蛋白混合物、肌红蛋白与溶菌酶...     

双水相体系逆流色谱技术在蛋白质分离中的应用

双水相体系逆流色谱技术结合了逆流色谱的高效率、高制备量以及双水相体系适于蛋白质分离的特点,因此在蛋白质的分离方面具有独特的应用价值。本文综述了近年来基于正交轴逆流色谱仪器的双水相体系逆流色谱技术在多种蛋白质分离中的应用。并对一些新兴的蛋白质逆流色谱分离技术及新型逆流色谱柱分离系统进行了介绍。     

微生物发酵产辅酶Q10的高速逆流色谱法分离纯化

本文首次将高速逆流色谱法应用于微生物发酵液提取物中辅酶Q10的分离纯化,建立了一套可用于其制备分离的逆流色谱溶剂体系正庚烷－乙睛－二氯甲烷(12：7：3.5, v/v/v)。500mg发酵液粗提物经一步制备分离,可得到绝对纯度在98％以上辅酶Q10130mg。比较表明,该方法较传统的硅胶柱层析和结晶相结合的纯化方法在产物纯度、回收率及产率等方面都有一定的优势。