内皮细胞靶向的可溶性人源Delta-like 4抑制生理性与病理性眼部血管新生

Notch信号通路在血管新生过程中具有重要作用,是治疗病理性血管新生的关键靶标.Notch信号通路的激活与抑制均可阻抑血管新生,但由于体内长期抑制Notch信号通路会导致血管瘤等严重毒副反应,通过激活Notch信号抑制新生血管形成可能更具临床应用价值.然而,目前缺乏可在体内高效活化Notch信号通路的Notch配体.在众多的Notch配体中,Delta-like4(Dll4)特异性表达于血管内皮组织,对血管新生具有关键调控作用.本研究表达并纯化了新型可溶性人源Notch配体h D4R,其由人源Delta-Serrate-Lag-2片段和内皮细胞靶向的精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(RGD)基序组成.实验证实,h D4R可通过其RGD基序与内皮细胞结合,并可有效激活内皮细胞中的Notch信号.平面管腔形成实验和微球萌出实验显示,h D4R能在体外显著抑制血管新生.更为重要的是,h D4R能在体内有效抑制新生鼠视网膜血管新生和激光诱导的脉络膜新生血管形成.综上所述,本研究发明了一种能显著抑制体内外血管生成的可溶性Notch配体h D4R,为治疗过度血管新生性相关疾病提供了新的手段.     

高脂培养抑制LPS诱导的HSC-T6细胞活化

目的：鉴定高脂培养对肝星形细胞活化的影响。方法：培养HSC-T6细胞系,加入含有游离脂肪酸的高脂培养基处理,利用LPS处理活化,通过检测α-SMA的表达分析星形细胞的活化程度,通过Q—PCR分析HSCs细胞胶原的表达,通过Q-PeR实验分析LPS相关通路靶基因表达情况情况。结果：高脂培养能够抑制LPS诱导的HSC-T6细胞增殖,降低HSC-T6细胞α-SMA和胶原I和TIMP-1表达的水平,Q．PCR的分析表明,高脂培养能够抑制HSCs活化后的NF．KB通路下游靶基因MCP-I和IL-6的表达。结论：在体外培养实验中,高脂培养能够抑制LPS诱导的HSC—T6细胞活化。     

γ分泌酶抑制剂对肝血窦内皮细胞的影响

目的:在建立高纯度小鼠肝血窦内皮细胞的体外培养的基础上研究γ分泌酶抑制剂(DAPT)对肝血窦内皮细胞活性的影响.方法:首先通过胶原酶灌注消化、percoll梯度离心和选择性贴壁分离得到高纯度、可在体外条件下培养的肝血窦内皮细胞,其次用不同浓度的DAPT(15 μmol/L、45 μmol/L、75 μmol/L)处理细胞,然后通过MTT检测细胞增殖情况、Real time PCR检测相关分子改变.结果:在体外条件下DAPT对肝血窦内皮细胞的增殖起到促进作用,这种促进作用随着DAPT浓度的增加相应的增加;DAPT能够导致肝血窦内皮细胞Notch信号下游分子Hes1表达下调,VEGF信号中VEGFR1表达下调,VEGFR2表达上调.结论:γ分泌酶抑制剂(DAPT)通过抑制肝血窦内皮细胞Notch信号,引起肝血窦内皮细胞表面VEGFR1表达下调,VEGFR2 表达上调显著增加肝血窦内皮细胞的活性.     

高脂培养抑制LPS诱导的HSC-T6 细胞活化*

摘要目的：鉴定高脂培养对肝星形细胞活化的影响。方法：培养HSC-T6 细胞系,加入含有游离脂肪酸的高脂培养基处理,利用 LPS 处理活化,通过检测α-SMA 的表达分析星形细胞的活化程度,通过Q-PCR分析HSCs 细胞胶原的表达,通过Q-PCR实验分 析LPS相关通路靶基因表达情况情况。结果：高脂培养能够抑制LPS 诱导的HSC-T6 细胞增殖,降低HSC-T6 细胞α-SMA 和胶 原I和TIMP-1 表达的水平,Q-PCR 的分析表明,高脂培养能够抑制HSCs活化后的NF-κB 通路下游靶基因MCP-1 和IL-6 的表 达。结论：在体外培养实验中,高脂培养能够抑制LPS诱导的HSC-T6 细胞活化。