基因芯片技术检测拉美夫定相关的HBV变异

In order to study the feasibility of gene chips technology in the detection of HBV mutation associated with lamivudine, we detected the mutation of HBV in peripheral blood of 30 patients treated with lamivudine for at least half a year by gene chips. The result was compared with that from direct sequencing. Both results are highly coincident. The rate reaches 100% while detecting single strain of virus infection, and 85% in multi-strains virus infection. Gene chip technology is quite valuable and practical in future clinic.     

具有蛋白酶及解旋酶活性的HCV-NS3重组蛋白的纯化及活性分析

为深入探讨HCV-NS3蛋白的酶动力学性质,制备了具有蛋白酶及解旋酶活性的HCV NS3重组蛋白.利用PCR扩增HCV非结构基因NS3,插入pPIC9,测序分析.携带NS3基因的重组质粒(pPIC9-NS3)转化毕氏酵母菌菌株GS115,甲醇诱导表达NS3蛋白.重组蛋白首先采用Hitrap chelating柱进行亲和分离,之后使用Mono S HR柱进一步纯化.对纯化后的NS3重组蛋白的酶活性进行分析,结果表明,获得的重组蛋白分别具有蛋白酶及解旋酶活性.本研究为深入探讨NS3编码酶的功能和开发抗病毒药物创造条件.     

血液透析患者输血传播肝相关病毒感染的调查

使用PCR结合微板杂交-ELISA及DNA序列分析技术,分别研究了维持性血液透析患者输血传播性HBV、HCV、HDV、HGV、TTV感染状况,并对HBV、TTV进行基因分型、TTV基因变异状况进行分析.除HDV外,发现血液透析患者中存在多重感染.HBV基因型以C型为主,B型次之.TTV分离株中,G1型为主,G2型次之.TTV基因变异可达39.7%.     

基因芯片技术检测拉美夫定相关的HBV变异

美夫定(Lamivudine)是新一代核苷类似物,能够迅速降低慢性乙型肝炎病人的血清HBV DNA水平,但是Lamivudine治疗12个月后,14%～39%的患者都会出现抗药性[1～3],病情会有反复,用药不再有效.已有的研究表明,通过检测患者血液中的病毒突变情况,轮流使用干扰素,Lamivedine,FamcicLovir丙种球蛋白等,可以得到很好的治疗效果[4].本研究中,我们采用拉美夫定耐药位点基因芯片,对44例慢性乙型肝炎病人进行了HBV突变检测,并应用传统的DNA测序的方法进行验证,结果报告如下.     

血液透析患者输血传播肝相关病毒感染的调查

使用PCR结合微板杂交-ELtSA及DNA序列分析技术,分别研究了维持性血液透析患者输血传播性HBV、HCV、HDV、HGV、TTV感染状况,并对HBV、TTV进行基因分型、TTV基因变异状况进行分析。除HDV外,发现血液透析患者中存在多重感染。HBV基因型以C型为主,B型次之。TTV分离株中,G1型为主,G2型次之。TTV基因变异可达39．7％。     

具有蛋白酶及解旋酶活性的HCV-NS3重组蛋白的纯化及活性分析

为深入探讨HCV-NS3蛋白的酶动力学性质,制备了具有蛋白酶及解旋酶活性的HCVNS3重组蛋白。利用PCR扩增HCV非结构基因NS3,插入pPIC9,测序分析。携带NS3基因的重组质粒(pPIC9-NS3)转化毕氏酵母菌菌株GS115,甲醇诱导表达NS3蛋白。重组蛋白首先采用Hitrap chelating柱进行亲和分离,之后使用Mono S HR柱进一步纯化。对纯化后的NS3重组蛋白的酶活性进行分析,结果表明,获得的重组蛋白分别具有蛋白酶及解旋酶活性。本研究为深入探讨NS3编码酶的功能和开发抗病毒药物创造条件。