人巨细胞病毒抗体检测方法的应用研究

目的确定用于筛选人巨细胞病毒(HCMV)IgG阳性血浆的ELISA试剂和用于HCMV免疫球蛋白成品检定的中和试验方法。方法比较目前国内外现有的人巨细胞病毒IgG抗体检测方法(3家ELISA试剂和3种病毒中和试验)的相关性。结果德国赛润和意大利德塞的ELISA试剂与成都蓉生微量中和试验及台湾宝血的蚀斑减少中和试验的相关性很好(r299%)。结论从成本和使用便利性考虑,建议使用意大利德赛的ELISA试剂盒用于原料血浆的筛选,使用成都蓉生的微量中和试验作为成品效价检定的方法。     

动态浊度法定量检测静脉注射用人免疫球蛋白中细菌内毒素含量

用鲎试剂动态浊度法定量检测静脉注射用人免疫球蛋白中细菌内毒素含量并与家兔法检测热原的结果进行对比。根据《中华人民共和国》2005年版三部附录中的细菌内毒素动态浊度法制定内毒素限值,用ATi320-06型动态试管仪和该仪器配置的中文软件"生物探针-2002"分析检测结果。静脉注射用人免疫球蛋白经稀释消除了干扰因素,动态浊度法能定量检测出内毒素含量。实验满足2005年版中国药典要求:标准曲线相关系数的绝对值︱r︱≥0.980,回收率:50%≤R≤200%,变异系数符合鲎试剂厂家的建议值CV%10%。检测结果准确、灵敏、稳定、重现性好,与家兔法检测结果相一致。鲎试剂动态浊度法能定量检测静脉注射用人免疫球蛋白中细菌内毒素含量。     

人巨细胞病毒特异性免疫球蛋白原料血浆的筛选

用北京贝尔公司的人巨细胞病毒(HCMV)IgG检测试剂盒检测5~6月入库的武汉生物制品研究所(WIBP)下属四个浆站共7433份普通血浆,HCMV-IgG阳性率为36%~55%。建立内部参考品Pc1、Pc2、Pc3、Pc4,用德国赛润公司的HCMV-IgG定量检测试剂盒对内部参考品进行标定,效价分别为648、962、1757、2940PEI-U/ml。以A450值>Pc1为标准确定HCMV-IgG阳性的献血员名单,按照检疫期的要求,利用浆站管理系统软件查找献血员前3个月的血浆编号,统计建档。逐批检测符合检疫期的建档血浆,以A450值>Pc2为标准收集阳性血浆,以A450值>Pc3为标准投料,进行人巨细胞免疫球蛋白(HCMV-IG)的低温乙醇纯化。通过成品的中和试验结果决定收浆方案是否可行。