柑桔胚的人工培养

为了提高柑桔杂交育种效率和探讨胚培养在柑桔生产上应用的可能性,我们研究了锦橙(Citrus sinensis Osbeck)×枳(Poncirus trifoliata Raf.)的杂交种子胚培养技术。证明:怀特(White)培养基 IAA(1ppm) CH(600ppm)和 MT 培养基 GA(1ppm)能使第五个小胚(E 胚)萌发成苗;在 MT 培养基 2,4-D(0.7ppm) BA(0.23ppm)上,有些胚先形成愈伤组织,然后从原有的胚中生根出苗。将此愈伤组织切下,移入含 BA(5ppm)和 IAA(1ppm)的MT 培养基中,则能出芽成茎,但不能形成根。再移入只含 NAA(1ppm)的 MT 培养基中,则能分化出根,形成完整的小植株。为研究合子胚分布和克服珠心胚干扰杂交育种工作提供了合适的技术。     

华盛顿脐橙胚珠愈伤组织的诱导及耐盐性研究

(1)在MT+2,4-D2mg/L+BA1mg/L的培养基上,可获得生长旺盛的华盛顿脐橙胚珠愈伤组织;(2)随着培养基中NaCl浓度的升高,愈伤组织的生长量逐渐减少。耐盐界限大约为0.10mol/L;(3)愈伤组织中的钠、铜和铁的含量随NaCl浓度的升高而发生积累,但钾、钙和镁的含量则随之减少。     

锦橙汁囊的超微结构

用常规电镜方法观察了锦橙［Ｃｉｔｒｕｓｓｉｎｅｎｓｉｓ （Ｌ．） Ｏｓｂ．］汁囊从原始细胞到发育为一个具柄的成熟汁囊的过程中,汁囊构成细胞超微结构的变化。锦橙汁囊原始细胞及发育为球状体时的构成细胞以及柱状结构顶端的细胞都是一种典型的分生组织细胞。在细胞质中有包括线粒体、质体、内质网、核糖体等丰富的细胞器,但没有观察到高尔基体。这些分生细胞分裂一段时期后就停止活动,逐渐分化为适应贮藏功能的液泡化薄壁细胞。分生细胞开始分化时,在细胞中出现许多小液泡和高尔基体。这些小液泡逐渐地融合,同时细胞质变少,最后形成一个有中央大液泡的薄壁细胞,在紧贴细胞膜的薄薄的一层细胞质中有线粒体、质体、高尔基体以及含有许多脂滴的杂色体。但成熟果实中汁囊的薄壁细胞中几乎没有任何细胞器。     

枳多芽苗的诱导

枳幼苗茎段的腋芽在含BA(0.5毫克/升)和NAA(2毫克/升)的MS培养基上能诱导出大量丛生芽,丛生芽苗茎段的腋芽在含BA(0.5-2毫克/升)的MS继代培养基上又可增殖,将无根幼苗分别转至含IAA、IBA和NAA(均为1毫克/升)的MS培养基上则生根形成完整植株。     

用组织培养法繁殖柑桔

继代培养了两年半的锦橙(Citrus sinensis Osbeck)×枳(Poncirus trifoliata Raf.)无性胚的愈伤组织通过下列三个阶段恢复了分化植株的能力:(1)在N_6培养基+BA(0.25ppm)+NAA(0.1ppm)+ME(1,000 ppm)上形成芽原基;(2)在1/2 MT培养基+BA(5ppm)+IAA(0.5ppm)+CH(500ppm)上芽原基分化为茎芽,进而形成茎;(3)将带叶的小茎扦插于MT培养基+NAA(1ppm)上,诱导生根,形成完整的小植株。根尖染色体检查,初步证明这些小植株是2n=18的二倍体。     

华盛顿脐橙胚珠的离体胚培养及植株再生

植物名称:华盛顿脐橙(Citrus sinensis var.brasiliensis)材料类别:未受精的胚珠。花蕾即将开放前1～2天套袋隔离。开花后取8周龄的幼果,用自来水洗净果皮,70％乙醇溶液表面消毒。在无菌条件下取胎座周围的白色胚珠(约1×0.5mm)进行培养。培养条件:基本培养基为MT培养基。(1)诱导培养基附加BA1mg/l(单位下同)和IAA0.5,暗培养。(2)成苗培养基附加IBA1,光照度2000lx,每日光照14小时。蔗糖为5％,琼脂0.8％,培养基pH5.8,培养温度28±2℃。     

糖类对柳橙胚愈伤组织生长的影响

糖类是植物组织和细胞培养中培养基的必要成分之一,它不仅是植物细胞生长所需的碳源,也是维持细胞生长所要求的渗透压的渗透稳定剂。由于不同植物、同一植物不同组织的细胞生长所要求的渗透压不同,对各种糖的降解利用能力也不同。糖的种类和浓度势必影响到植物组织和细胞培养中愈伤组织的形成、生长和分化。糖类对柑桔愈伤组织形成和分化的影响已有一些研究,但对其生长的影响尚未见较系统的报道。本文以柳橙胚愈伤组织作材料,从生长状况、过氧化物酶同工酶谱和酶活性等方面对这个问题进行探讨,以找出糖的最佳种类和浓度,为柑桔组织和细胞培养提供合适的碳源。     

锦橙汁囊的形态发生

本文以锦橙为材料观察了汁囊的起源和整个发育过程．结果表明锦橙的汁囊起源于心皮内表皮的单个细胞．汁囊的原始细胞经过数次垂周和平周分裂形成由多细胞构成的球状体;球状体逐渐发育为伸长的柱状结构。在柱状结构的顶端中轴部分分化出一团分生组织细胞．这群分生细胞活跃地分裂和生长,使柱状结构上端膨大、加粗,最后发育成一个带有一条细长柄的囊状结构即汁囊．     

甜橙成熟果实未发育胚珠的离体培养

路比血橙和锦橙成熟果实的未发育胚珠在含ME(1000mg/l)的MT培养基上培养,胚状体诱导率和每个胚珠平均产生胚状体数均较高。带胚状休的愈伤组织转入该培养基上继代培养,仍可保持其胚性特点。将子叶形胚状体转至含GA(1mg/l)和CH(500mg/l)的MT培养基上,成苗率较高。这为扩大柑桔组织培养的外植体来源和克服外植体的季节限制提供了新途径。