人类巨细胞病毒、EB病毒和单纯疱疹病毒1型与慢性牙周炎的相关性研究

目的　研究人类巨细胞病毒( HCMV)、Epstein- Barr病毒( EBV)和单纯疱疹病毒1型( HSV- 1)与慢性牙周炎的相关性。方法　收集6 2例慢性牙周炎患者(男性2 7例,女性35例;平均年龄5 3岁)的牙周炎部位,轻度龈炎部位的龈下菌斑,提取DNA后使用巢式PCR检测HCMV、EBV和HSV- 1,比较分析它们在同一患者不同部位的检出率。结果　牙周炎部位的HCMV检出率为38.7% ,EBV的检出率为5 8.0 % ,HSV- 1的检出率为30 .6 % ,2种以上病毒合并感染的检出率为4 0 .3% ;轻度龈炎部位的HCMV检出率为12 .9% ,EBV为19.4 % ,HSV- 1为9.7% ,2种以上病毒合并感染的检出率为8.0 %。这3种病毒及其合并感染在牙周炎部位的检出率均高于轻度龈炎部位,差异有统计学意义( P<0 .0 5 )。结论　提示HCMV、EBV、HSV- 1与慢性牙周炎有相关性。     

血链球菌在不同牙周状态下的分布及相关研究

目的：探讨口腔主要过氧化氢产生菌血链球菌和口腔链球菌在不同牙周健康状态下龈下菌群中的分布,及与牙周健康状态和牙龈卟啉单胞菌群中分布的相互关系。方法：纳入符合标准的受试者30人,受试位点86个,其中健康组11人,位点30个,龈炎组9人,位点29个,慢性牙周炎组10人,位点27个,检查记录牙周健康状态[包括牙龈指数（GI）和牙周袋深度（PD）],采集龈下菌斑标本,经厌氧菌培养基和AP-PCR及PCR鉴定后,将各受试组进行比较分析。结果：共获得草绿色链球菌523株,产黑色素菌241株。经AP-PCR及PCR鉴定后,得到血链球菌112株,口腔链球菌56株,牙龈卟啉单胞菌84株,健康组龈下菌斑中血链球菌,口腔链球菌和牙龈卟啉单胞菌构成比与牙周炎组相比有差异显著性;血链球菌和口腔链球菌与GI、PD呈负相关,牙龈卟啉菌与GI、PD呈正相关;血链球菌的构成与牙龈卟啉单胞菌的构成比呈负相关。结论：血链球菌等过氧化氢产生菌在龈下菌斑中比例的下降。可能是微生态失衡,致病菌过度增殖的重要机制。     

厌氧条件下微量琼脂糖弥散法抑菌试验的建立及应用

作者建立了在厌氧条件下两种微量而敏感的抑菌试验,可用于鉴定蛋白质或多肽类抑菌物质。（１）琼脂糖弥散法：可检测抗菌蛋白抑菌活性,（２）电泳凝胶弥散法：可直接确定存在于ＰＡＧＥ凝胶中抗菌蛋白条带。应用这两种方法,作者首次鉴定出血链球菌培养上清液中存在抑制牙周可疑致病菌的抗菌蛋白。     

血链球菌拮抗可疑牙周病原菌机理探讨Ⅱ细菌素的产生及影响因素

血链球菌产生细菌素（血链素）至培养上清液中，无论是需氧或厌氧环境，血链球菌均可产生血链素。采用无水乙醇沉淀法提取血链球菌培养上清液中的蛋白质，运用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析其蛋白成份，发现有１３０ｋｄ、１２０ｋｄ、７４ｋｄ、和５６ｋｄ四条蛋白区带，通过电泳凝胶弥散法抑菌试验显示，５６ｋｄ蛋白带具很强的抑菌活性，提示此蛋白质可能为血链素的所在位置。     

血链球菌拮抗可疑牙周病原菌机理探讨I．血链球菌培养上清液抑菌活性研究

本研究建立一种敏感的抑菌试验,微量琼脂糖弥散法,分析血链球菌培养上清液的抑菌作用。结果发现,牙周病原菌在血链球菌培养上清液中孵育３０ｍｉｎ,菌落形成数低于对照组,微量琼糖弥散法测定血链球菌培养上清液的抑菌活性,显示血链球茵培养１２ｈ后,培养上清液出现抑菌活性,７２ｈ达高峰。在有蔗糖及ｐＨ８．５ＴＰＹ培养基中培养的血链球菌上清液可形成较大抑菌环,厌氧环境培养的血链球菌上清掖抑菌活性略高于需氧环境。     

牙龈卟啉菌特异性克隆探针的筛选

目的 从牙龈卟啉菌47A－1的基因文库中筛选出特异性片段,制备成特异性克隆探针,方法 将牙龈卟啉菌47A－1基因文库中的重组质粒大量扩增和纯化,采用地高辛标记法制备成探针,与口腔中14种常见细菌DNA进行杂交鉴定,检测其特异性,从中筛选出对牙龈叶卟啉菌具有特异性的克隆探针。结果 重组质粒pZJ1与牙龈卟啉菌47A－1杂交,而与其它细菌DNA均不杂交,包括牙龈卟啉菌ATCC33277和W83。结论 重组质粒pZJI可制备成高特异笥克隆探针。     

氧对口腔链球菌产生过氧化氢的影响

目的观察环境中氧含量对口腔链球菌过氧化氢产生速率的影响。方法采用ABTS-HRP微量板法测定在不同氧含量条件下口腔链球菌过氧化氢产生的速率。结果口腔链球菌在严格厌氧条件下过氧化氢产生速率为9.29nmol/(min×109细胞);当氧含量增高,口腔链球菌过氧化氢合成速率加快;在不同氧含量的环境中口腔链球菌产生过氧化氢的速率差异存在显著性:有氧振荡培养>有氧静置培养>厌氧(P<0.05)。结论环境中氧含量是影响口腔链球菌过氧化氢产生速率的重要因素。     

血链球菌产生过氧化氢机理研究

作者在国内首次建立两种确定细菌产生过氧化氦的方法,可以定性和定量分析。本文探讨了血链球菌产生过氧化氢的条件,研究其在牙周微生态环境中的作用。     

产黑色素类杆菌蛋白抗原的化学分析

产黑色素类杆菌是牙周可疑致病菌之一,对这些细菌的抗原分析是防治牙周病的重要课题。本文对其中5种标准菌株或模式菌株的可溶性蛋白抗原进行了较细致的分子水平及化学性质分析。结果表明:SDS-PAGE凝胶系统分析5种细菌的主要蛋白区带是一致的,但付带可见明显差异。通过糖蛋白及脂蛋白染色分析细菌可溶性蛋白抗原化学成份,证明部分蛋白是糖脂蛋白。     

牙龈卟啉菌基因文库的建立

目的 通过构建牙龈卟啉菌47A－1的基因文库,为进一步深入研究牙龈卟菌的基因结构鉴定基础。方法 选择Sau3AI对牙龈卟啉菌47A－1染色体DNA作酶切,获得的DNA片段与BamBI酶解的质粒pUC18作体外连续并转化大肠杆菌JM109,在含有IPTG、X-gal和氨苄青霉素的LB琼脂平板上,用蓝、白筛选出选出含重组质粒的大肠杆菌扩增并分析。结果 得到的重组质粒经酶切、电泳分析,证实包含牙龈卟啉菌47A－1的插入片段。结论 牙龈卟啉菌47A－1的基因文库构建成功。