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目的:构建hKCNQ1/hKCNQ2嵌合体,研究嵌合体通道的电生理学特征,为分析PIP2对hKcnq1通道的调节机制打下基础.方法:利甩over-lapPCR方法构建hKCNQ1/hKCNQ2嵌合体质粒(Q1ctQ2-pCI、Q1ctQ2-pcDNA3.1),转染HEK293细胞,采用全细胞膜片钳技术记录HEK293细胞上嵌合体电流.结果:在全细胞膜片钳记录模式下,转染了嵌合体Q1ctQ2-pCI的HEK293细胞电流密度160为5.2±0.87 pA/pf,其半数激活电压V0.5为23.3±8.9 mV(n=6);转染了嵌合体Q2ctQ1-pcDNA3.1的HEK293细胞电流密度160为21.7±4.2 pA/pf,其半数激活电压V0.5为-37.5±3.6 mV(n=9).结论:成功构建了hKCNQ1/hKCNQ2嵌合体并完成了嵌合体重组质粒的异源性表达和膜片钳记录. 相似文献
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