TaNHX2基因植物表达载体的构建及在拟南芥中的功能分析

将TaNHX2基因重组于质粒pBIN438的CaMV 35S启动子下游,构建含TaNHX2基因的植物双元表达载体pBIN438-TaNHX2。采用根癌农杆菌介导的真空渗透法转化拟南芥,得到T0代转基因拟南芥种子。经含Kan的平板筛选及PCR鉴定,获得54株阳性植株,选取生长一致的转基因阳性植株进行耐盐、耐旱分析,结果表明TaNHX2能够提高转基因植株的耐盐性和耐旱性。     

反相高效液相色谱法测定不同采收期柿叶芦丁、齐墩果酸的含量

研究柿叶中芦丁、齐墩果酸随月份动态变化规律。用回流提取法制备同一来源、不同月份柿叶样品,采用RP-HPLC法,以芦丁为对照品,测定同一年中5月到11月7份样品中芦丁的含量。用索氏提取法制备不同月份柿叶齐墩果酸样品,采用RP-HPLC,以齐墩果酸为对照品,测定同一年中5月到11月7份样品中齐墩果酸的含量。结果显示:7月和10月采收的柿叶中芦丁和齐墩果酸的含量较高。10月(采收柿子果实后)采收的柿叶有可能作为制备芦丁、齐墩果酸的原料使用。     

川芎多糖的提取、纯化及抗氧化活性的研究

首次从川芎水提物中分离、纯化得到川芎总多糖LCP,经DEAE-纤维素柱色谱分级得到4个均一多糖组分LCP-1,LCP-2,LCP-3和LCP-4。它们均有.OH和O2-.的抑制生成活性,且LCP-2在低浓度对O2-.具有强的清除作用,而在高浓度时对.OH具有强的清除作用。     

河南和山西连翘叶中总木脂素、连翘酯苷A、连翘酯苷B和连翘苷的含量比较北大核心CSCD

测定河南和山西连翘叶中总木脂素、连翘酯苷A、连翘酯苷B和连翘苷含量。采用分光光度法测定连翘叶中总木脂素含量,结果显示山西连翘叶高于河南连翘叶总木脂素含量。采用高效液相色谱法(HPLC)测定连翘叶中连翘酯苷A、连翘酯苷B和连翘苷的含量。连翘酯苷A平均回收率为99.6%,RSD为1.23%;连翘酯苷B平均回收率为101.3%,RSD为1.74%;连翘苷平均回收率为102.3%,RSD为2.58%;连翘叶中连翘酯苷A和连翘苷的含量较高,并且不同产地连翘叶中连翘苷含量差异较大;另外对于富含连翘酯苷和连翘苷的连翘叶能否代替果实或者与果实合并用药有待于进一步研究。     

利用RNAi技术抑制拟南芥NHX1基因家族的表达

采用RNAi抑制NHX1基因家族的表达,并观察其对拟南芥耐盐性和耐旱性的影响.根据从拟南芥(Ara-bidopsis thaliana)cDNA中扩增出编码Na /H 反向转运蛋白基因AtNHX1长度为210 bp高度保守序列作为RNAi的靶标区,并正反2个方向插入载体pHANNIBAL中,2个片段用intron连接;将RNAi表达框连入具有NPTⅡ筛选标记基因的表达载体pART27中,构建以拟南芥NHX1基因家族为靶标的RNAi载体.采用农杆菌介导的真空渗透法转化拟南芥,得到T0代转基因拟南芥种子.对转基因阳性植株进行RT-PCR检测以及耐盐性和耐旱性分析.结果表明,利用本实验构建的NHX1基因家族RNAi载体,拟南芥NHX1基因家族表达被成功地抑制;耐盐和耐旱分析表明RNAi技术对基因表达沉默是有效的.     

朱砂七粗多糖的提取及生物活性的研究

首次从朱砂七中提取粗多糖(PCCP),研究了PCCP对.OH自由基、O2-.自由基和DPPH.自由基的清除能力以及抗脂质过氧化能力,选用人肝癌细胞HepG2,经MTT染色法研究其体外抗肿瘤活性。结果显示,PC-CP的浓度在8.48 mg/mL时,对.OH、O2-.和DPPH.的清除率分别达到了52.3%、54.7%和38.3%;PCCP的浓度在8.48 mg/mL时,对脂质过氧化的抑制率达到了62.0%;PCCP的浓度在277.78μg/mL时,对人肝癌细胞HepG2的抑制率达到了42.6%,表明PCCP具有一定的体外抗氧化能力和体外抗肿瘤活性。