GST/ AEP 融合蛋白原核表达载体的构建、表达及鉴定

目的：为进一步研究抗癫痫肽（And—epilepsy peptide,AEP）的抗痫机制及筛选其相关作用蛋白,进行GST／AEP融合蛋白原核表达载体的构建及融合蛋白的表达。方法：通过PCR基因扩增对AEP基因进行扩增,并将其克隆于谷胱甘肽-S-转移酶（GST）融合蛋白表达质粒pGEX-4T-1中,经酶切、序列鉴定分析后,用该重组质粒转化大肠杆菌B121（DE3）,经IPTG诱导获得表达,并采用Western Blot进行检测。结果：成功构建了AEP原核表达载体,并在大肠杆菌B121中获得表达。结论：成功构建了GST／AEP原核表达载体,并表达了GST／AEP融合蛋白。     

人基质金属蛋白酶2催化区的克隆与表达

为从随机肽库中寻找具有基质金属蛋白酶 2 (MMP 2 )抑制活性的新型小肽抑制剂 ,应用PCR法从含有人MMP 2基因的质粒中扩增了人MMP 2的催化区 .序列分析结果表明无氨基酸突变 .然后构建人MMP 2催化区的表达载体pET MCD ,转化大肠杆菌BL2 1(DE3 ) ,经IPTG诱导表达人MMP 2催化区 .经包涵体分离、变性、金属螯合层析纯化和复性等过程 ,复性后的人MMP 2催化区具有较好的明胶水解活性 .     

重组抗癫痫肽二串体的表达、纯化与鉴定

目的：利用基因工程方法表达抗癫痫肽（AEP）串联体蛋白,并进行纯化、鉴定。方法：PCR扩增AEP及AEP—His基因片段,并分别克隆至测序载体中;测序正确后,利用基因重组技术获得二串体基因,构建毕赤酵母表达载体pPIC9K-AEP2-His,甲醇诱导AEP2-His在毕赤酵母中表达,用Ni—chelating SepharoseFF柱纯化表达的融合蛋白,并用抗His单克隆抗体进行Westernblot鉴定。结果：构建了AEP二串体酵母表达载体,获得了纯化的AEP2-His蛋白,其相对分子质量约20000。结论：用基因串联思路表达小分子多肽是一种可行的方法;AEP2-His蛋白的成功表达为其功能研究奠定了基础。     

Watson-Crick模型的修饰

一、引言 26年前,Watson-Crick提出了DNA的双螺旋结构模型。他们指出,DNA通常是双股的,并以糖-磷酸酯骨架反平行走向。碱基是按着腺嘌呤与胸腺嘧啶、鸟嘌呤与胞嘧啶的方式配对。这是由大量实验支持的。鸟嘌呤与胞嘧啶以三个氢键牢固地配对,腺嘌呤与胸腺嘧啶配对则有所变动。现在似乎这种配对时的构象     

化学修饰对胰激肽释放酶稳定性及其性质的影响

以自制高活性ＰＰＫ为材料,在氰基硼氢化钠存在下经水溶性乙醛酸修饰其表面氨基,使其抗不可逆热失活稳定性有显著提高。结果表明,修饰ＰＰＫ在等电点等基本性质方面都有变化。修饰ＰＰＫ的ＢＡＥＥ活性为天然酶的８２％,氨基修饰度为５８％,抗蛋白酶水解,贮藏和冻干稳定性都有加强。     

试论空间编码

60年代阐明的遗传密码,即通用的、三联体的、简并性的密码,弄清楚了核酸的核苷酸排列顺序与其编码的蛋白质的氨基酸排列顺序之间的线性关系,故可称之谓“线性编码”。然而,仅就基因的表达而言,尽管基因载有其编码的     

栎链蚧寄生菌座壳孢菌生物学特性的研究

对栎链蚧Asterodiaspis variabile Russell的座壳孢菌Aschersonta sp.进行了菌落形态持征观察、菌落生长速度、产孢特性观察以及孢子萌发等试验,结果表明,菌落生长及产孢最佳条件为:PDA培养基和玉米粉琼胶培养基,25℃,pH6～7,12L:12D;孢子萌发最佳条件为:25℃,pH6～7,1%蔗糖、葡萄糖溶液,为24h光照.