双向电泳法在家蚕蛋白质分离中的应用

家蚕Bombyxmori(L.)既是重要的经济昆虫,又是鳞翅目昆虫研究的典型模式生物。开展家蚕蛋白质组研究,将有助于阐明家蚕绢丝蛋白的分泌机理,也是研究鳞翅目昆虫及其他生物生命本质的需要。双向电泳是蛋白质分离的关键技术。为探讨适宜家蚕蛋白质组研究的双向电泳条件,以家蚕丝腺、丝腺内容物、蚕卵和血液为材料,在不同条件下进行双向电泳,并对分离的蛋白点进行质谱分析。结果表明:通过改进的蛋白质裂解液辅以超声破碎制备的蛋白质,双向电泳后能够得到较好的2-DE图,也能满足进行MALDI-TOFMS分析的需要。因此本研究方法适用于家蚕不同组织中蛋白质的提取和双向电泳。     

Study on fibroin heavy chain of the silkwormBombyx mori by fluorescencein situ hybridization (FISH)

The sericulture industry plays a very important role in our national economy. Silkworm (Bombyx mori) is always regarded as a model animal and biological reactor. There have been detailed studies on the structure, expression and control and molecular evolution of silk genes. However, few, if any, reports are available on the localization of structural genes in silkworm by molecular cytogenetics. The present experiment has tentatively localized theFib-H gene at the distal end of the 25th linkage group, namely at the 25-0.0 position, and verified thatFib-H has only one locus, thus providing a temporary solution to the problem about its localization.     

家蚕丝心蛋白H链基因的荧光原位杂交(FISH)

蚕丝业在国民经济中占有极为重要的地位. 家蚕作为重要的模式生物和生物反应器, 历来为人们所关注. 有关蚕丝基因的结构、表达调控和分子进化都已有较详细的研究和报道, 但关于蚕丝结构基因的分子细胞遗传学基因定位的研究, 几乎尚无报道. 经用荧光原位杂交技术(fluorescence in situ hybridization, FISH)对家蚕丝心蛋白H链基因(Fib-H)的分子细胞遗传学定位研究结果, 初步将家蚕丝心蛋白H链基因定位在了分子细胞遗传学第25连锁群染色体的端部, 即25~0.0的位置, 从而解决了该基因迄今尚未定位的问题, 并证实了丝心蛋白H链基因在染色体位置上为单一座位.     

蚯蚓体内超氧化物歧化酶分析

蚯蚓体内SOD含量甚高,35℃饲养的蚯蚓其SOD比活最高,因此,纯化前将蚯蚓在35℃养殖4周以上.采用硫酸铵分级沉淀和柱层析的方法,从蚯蚓体内分离得到纯的铜锌超氧化物歧化酶.每100g组织得到SOD制品总活力为17,190 U,比活7995 U/mg,回收率为35%.该酶呈淡蓝绿色,最大紫外吸收波长为270nm.该酶分子量为33,000,亚基分子量为16,500.该酶亚基含156个氨基酸残基,不含酪氨酸.N-末端为丙氨酸,等电聚焦为三条谱带,等电点分别为5.30 、5.59和6.22.     

家蚕丝胶基因1（Ser-1）和胰凝乳蛋白酶抑制因子13基因（CI-13）的FISH定位

应用荧光原位杂交技术对家蚕单拷贝的丝胶基因1（Ser-1）及胰凝乳蛋白酶抑制因子13基因（CI-13）进行了分子细胞遗传学的染色体定位．结果表明：Ser—1位于第11连锁群染色体的近端部位置,在粗线期染色体上的相对位置为12．5±1．4;CI-13位于第2连锁群染色体的近端部,在粗线期染色体上的相对位置为8．2±1．2,进而绘制了上述基因在家蚕染色体上的位置模式图——FISH图,并对家蚕染色体的荧光原位技术及其应用进行了探讨．     

分子语言学的形成和发展

分子语言学的形成和发展张平波刘堰高峰（西南师范大学生命科学系,重庆４００７１５）分子语言学（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒｌｉｎｇｕｉｓｔｉｃｓ）是研究基因核苷酸顺序和蛋白质氨基酸顺序中所含信息的一门学问。它是伴随“人类基因组计划”的提出和实施而形成和发展的,是...     

细胞周期的关卡调控途径研究进展

目前已从不同物种、不同种类细胞中筛选到很多关卡基因和蛋白质,如ATM、RAD53、CHK₁等.有关它们在具体关卡调控途径中的作用,以及和癌变发生的关系已有许多报道.     

Study on fibroin heavy chain of the silkworm Bombyx mori by fluorescence in situ hybridization (FISH)

The sericulture industry plays a very important role in our national economy. Silkworm (Bombyx mori) is always regarded as a model animal and biological reactor. There have been detailed studies on the structure, expression and control and molecular evolution of silk genes. However, few, if any, reports are available on the localization of structural genes in silkworm by molecular cytogenetics. The present experiment has tentatively localized the Fib-H gene at the distal end of the 25th linkage group, namely at the 25-0.0 position, and verified that Fib-H has only one locus, thus providing a temporary solution to the problem about its localization.