小鼠肠道类器官三种不同条件培养基的比较研究

摘要 目的：比较三种不同条件培养基对小鼠类器官形态和增殖速度的影响。方法：取C57BL/6小鼠的小肠和结肠,EDTA法分离隐窝,以基质胶包埋,加入不同小鼠肠道类器官培养基培养7 天,使用光学显微镜记录和比较类器官形成率和出芽情况。随后进行二代类器官培养,使用TrypLE将类器官消化为单细胞,重新包埋和培养,使用光学显微镜记录和比较不同类器官培养基对二代类器官的培养效率。采用荧光定量PCR比较不同条件培养类器官中干细胞标志物Lgr5和分化标志物MUC2的表达。使用免疫荧光法检测类器官中ki-67的表达。结果：对于小肠类器官的培养,使用条件培养基1、IntestiCult条件培养基和L-WRN培养基培养结肠类器官的形成率分别为（18.2±4.5） %、（63.8±4.0） %和（82.1±8.4） %。其中使用IntestiCult条件培养基培养类器官的出芽率更高。对于结肠类器官的培养,使用条件培养基1、IntestiCult条件培养基和L-WRN培养基培养结肠类器官的形成率分别为（17.3±7.3） %、（58.0±6.1） %和（46.3±7.4） %。对于二代类器官的培养,IntestiCult条件培养基和L-WRN培养基都能够支持消化为单细胞后的二代类器官培养。干细胞标志物Lgr5和分化细胞（杯状细胞）标志物MUC2的表达无明显差异。使用L-WRN培养基的类器官ki-67阳性比例更高,增殖速度更快。结论：本研究比较了三种不同条件培养基对小鼠类器官形态和增殖速度的影响。经过对比,L-WRN培养基更有利于小鼠肠道类器官的形成和增殖速度。     

不同工艺制备银杏叶提取物的FTIR和热分析谱图特征分析

为建立银杏叶提取物的指纹图谱提供参考依据,分别对不同分离纯化方法制备的银杏叶提取物进行傅里叶变换红外光谱(FTIR)和热分析(TG-DTG)测定,并对相关的谱图进行了特征分析.通过对各谱图比较分析结果表明,不同制备工艺的银杏叶提取物的FTIR和TG-DTG谱图的都有其各自的物质特征,FTIR和TG-DTG给出的是样品的整体信息,提供的信息能很好地反映银杏叶提取物的整体性,比单一指标成分的测定所提供的信息要更多、更有特征.     

甘草细胞放大培养中搅拌式反应器操作策略优化

为获得甘草细胞在反应器中放大培养的最佳条件,在建立稳定的甘草细胞搅拌式生物反应器放大培养体系的基础上,分别以单因素和正交实验获得的数据为样本,以细胞净增长生物量为考察指标,运用BP神经网络耦合遗传算法对反应器操作策略进行优化。结果表明,接种量6.4%、摇床转速89r/min、通气速率0.1vvm是甘草细胞进行反应器培养的最优条件;与传统的正交实验方法相比,这种基于神经网络耦合遗传算法的优化方法使反应器中细胞生物量的积累提高了6.9%。