《生物工程讲座》(Ⅱ)——基因工程的理论及应用(一)基因的结构与分离

自从40年代证实生物的遗传物质就是核酸以来,对于核酸如何实现遗传功能的研究,一直广泛地吸引着科学家浓厚的兴趣。50年代提出的“一个基因,一个多肽”的概念,由基因型和表型统一的角度明确了基因的定义,将基因视为携带一定生命功能信息的单元。全套基因活动的总合,可以导致生物个体由出生至死亡一系列的生物化学反应,表现出生命的种种活     

1984年上海市第一人民医院新生儿病房急性胃肠炎流行

用ELISA和RNA PAGE银染法检测了上海市第一人民医院新生儿病房及隔壁婴儿病房8份急性腹泻粪便标本;3份粪标本呈轮状病毒特异抗原阳性,3份粪标本能提供RNA进行电泳分析。6份病人恢复期血清抗体效价均>1:1280,较正常配对组的抗体水平高4倍以上,说明新生儿病房及隔壁婴儿病房急性腹泻流行为轮状病毒感染所引起。分析其RNA迁移图谱,均为电泳型2L,第3电泳亚型。经混合电泳显示3例RNA无差异,提示病人感染来自同一传染源;并探讨了轮状病毒传播的可能途径,为今后改进医疗质量提供了资料。     

珠蛋白mRNA的分离和cDNA的合成

本文报道从人工贫血的兔与鸡的网织红细胞中提取珠蛋白mRNA,在麦胚无细胞体系中测定其蛋白翻译活力,与对照相比,兔、鸡珠蛋白mRNA促进~(14)C-亮氨酸参入新生蛋白质的活力分别达到32倍和10倍,所翻译的蛋白产物在聚丙烯酰胺凝胶上的行为与天然珠蛋白一致。上述mRNA在AMV反转录酶和DNA聚合酶的作用下,分别合成了单链和双链的cDNA及mRNA-cDNA杂交链,凝胶电泳分析其长度分别为500～700,550～800及500～800碱基对,550～800碱基对大小的双链cDNA约占总合成量的30%。     

珠蛋白mRNA的分离和cDNA的合成

本文报道从人工贫血的兔与鸡的网织红细胞中提取珠蛋白mRNA,在麦胚无细胞体系中测定其蛋白翻译活力,与对照相比,兔、鸡珠蛋白mRNA促进~(14)C-亮氨酸参入新生蛋白质的活力分别达到32倍和10倍,所翻译的蛋白产物在聚丙烯酰胺凝胶上的行为与天然珠蛋白一致。上述mRNA在AMV反转录酶和DNA聚合酶的作用下,分别合成了单链和双链的cDNA及mRNA-cDNA杂交链,凝胶电泳分析其长度分别为500～700,550～800及500～800碱基对,550～800碱基对大小的双链cDNA约占总合成量的30%。     

1982—1984年上海市秋冬季婴幼儿急性胃肠炎病例中人轮状病毒分子流行病学的研究

1982—1984年上海市二个医院收集的小儿腹泻标本150份,用RNAPAGE银染法分析轮状病毒RNA迁移图谱;在阳性标本74例中72例为2L电泳型,2例不能分为2L或2S电泳型。RNA电泳带迁移差别较明显的为2、3和7、8、9RNA片段。根据7、8、9三条带迁移率之不同,将RNA迁移图谱分成3种电泳亚型。统计学检验说明82年以第2电泳亚型为主,83年以第1电泳亚型为主,84年均为第1电泳亚型(P<0.05)。提示82—84年RNA迁移图谱有明显的变迁。二个医院相距甚远,但每年的RNAPACE图谱分布趋势基本一致。