板书与多媒体相结合在“蒸馏”教学中的应用与探索

本文以"蒸馏"的教学为例,阐述传统板书与多媒体相结合在化工原理中教学过程中的应用。采用多媒体和板书相结合的教学方法,使二者优势互补,以达到学生兴趣、提高教学效果的目的。     

重组超耐热酸性α-淀粉酶的分离纯化及其性质研究

基因工程菌所产生的重组超耐热酸性α-淀粉酶,通过超滤浓缩、脱盐和聚丙烯酰胺垂直板凝胶电泳进行纯化,得到电泳纯的超耐热酸性α-淀粉酶,纯化倍数为11.7,活力回收率为29.8%。用SDSPAGE测得该酶的分子量为55kD,酶的等电点pI(室温)为5.0,以可溶性淀粉为底物的Km值为1.12gL,用硫酸酚法测得其含糖量为15.4%。该酶的最适反应温度为95℃,最适反应pH值为4.5。在pH4.0～7.0室温放置48h酶活没有变化,110℃保温1h残留60%活力。Cr3 、Fe2 、Cu2 抑制酶的活性,Ca2 对酶活无影响。EDTA和DTT对酶的活性无影响。     

超耐热酸性α-淀粉酶基因在多型汉逊酵母中表达及与在毕赤酵母中表达的比较研究

利用毕赤酵母的质粒载体pPIC9K将极端耐热古菌Pyrococcusfuriosus的超耐热酸性α-淀粉酶(Amy)基因转化到多型汉逊酵母HP-6中,获得重组汉逊酵母。经过甲醇进行诱导,表达产物的酶活性检测和SDS-PAGE电泳,证明α-淀粉酶(Amy)在多型汉逊酵母中利用AOX1启动子和α-因子信号肽有效表达并分泌到胞外。该酶的最适反应温度为90～100℃,最适作用pH为4.0～5.0,较之重组毕赤酵母的最适作用pH还低0.5。此外与毕赤酵母的重组蛋白相比,重组汉逊酵母α-淀粉酶不仅菌株筛选简便、周期短,而且具有更容易筛选到高拷贝转化子以及适用于大规模工业发酵等优点。     

高温α-淀粉酶基因突变体在大肠杆菌、毕赤酵母中的表达

对地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)高温α-淀粉酶(amyE)基因进行改造获得的基因突变体(amyEM),通过PCR扩增,将此基因分别克隆至大肠杆菌表达载体pBV220和毕赤酵母表达载体pPIC9K上,并分别转化大肠杆菌DH5α和毕赤酵母GS115感受态细胞,获得重组大肠杆菌和重组毕赤酵母。通过表达产物的酶活性检测和SDS-PAGE分析,证明突变α-淀粉酶(AmyEM)在大肠杆菌、毕赤酵母中获得有效表达。对重组大肠杆菌产生的α-淀粉酶的粗酶性质分析表明,此酶分子量约为55kDa。其最适反应温度为80℃~90℃,与野生型基因相比,其最适pH均为6.0,但不同的是突变体在pH 5.0~5.5时表现出较高的酶活力;在毕赤酵母细胞的表达产物可分泌至胞外。由于酵母可对蛋白进行糖基化,酶分子量增加到60kDa,最适pH也改变为5.5。此高温α-淀粉酶突变体所具有的在微酸性环境具有较高酶活力的性质,具有重要的潜在工业应用价值。     

仿真实验在《制药工程原理与设备》实验教学中的应用

本文讨论了仿真实验在《制药工程原理与设备》实验教学中的优点和应用。教学效果表明,仿真实验弥补了《制药工程原理与设备》传统实验的不足,是提高教学质量的重要手段。     

血清胱抑素C、同型半胱氨酸及β2-微球蛋白在急性肾损伤患者中的动态变化及诊断价值分析

目的:研究血清胱抑素C(Cys C)、同型半胱氨酸(Hcy)及β2-微球蛋白(β2-MG)在急性肾损伤(AKI)患者中的动态变化及诊断价值。方法:选取2016年3月～2018年12月于南京市第一医院接受诊治的123例AKI患者作为研究对象。将其按照AKI分期分为AKI 1期组60例、AKI 2期组33例、AKI 3期组30例,另选取同期于南京市第一医院体检的健康人员40例作为对照组。分别比较四组人员的血清Cys C、Hcy、β2-MG水平以及APACHEⅡ评分,并作相关性分析。比较AKI患者血清Cys C、Hcy、β2-MG水平单独检测以及联合检测的检出率。此外,将AKI患者按照预后的差异分为存活组93例以及死亡组30例。比较两组患者的血清Cys C、Hcy、β2-MG水平以及APACHEⅡ评分。结果:对照组、AKI 1期组、AKI 2期组、AKI 3期组血清Cys C、Hcy、β2-MG水平呈逐渐升高趋势,随着AKI分期的增加,APACHEⅡ评分亦升高(均P0.05)。经Pearson相关性分析可得:AKI患者APACHEⅡ评分与血清Cys C、Hcy、β2-MG水平均呈正相关关系(均P0.05)。AKI患者血清Cys C、Hcy、β2-MG联合检测的检出率明显高于单独检测。AKI患者存活组的血清Cys C、Hcy、β2-MG水平以及APACHEⅡ评分均低于死亡组(均P0.05)。结论:血清Cys C、Hcy、β2-MG水平在AKI患者中明显高表达,且随着患者病情的不断加重,上述三项血清学指标水平以及APACHEⅡ评分随之增加。临床工作中通过联合检测血清Cys C、Hcy、β2-MG水平,将有助于AKI患者的诊断以及预后评估。     

超耐热酸性α-淀粉酶基因的克隆及其在酵母细胞中的表达

用PCR方法扩增来源于极端嗜热厌氧古菌Pyrococcus furiosus中的超耐热酸性α-淀粉酶的结构基因,将该结构基因引入载体pPIC9K中,将重组质粒pPIC9K-Amy转化大肠杆菌DH5α细胞,测序结果表明,克隆到的α-淀粉酶结构基因为1305bp,其编码的成熟肽为435个氨基酸。将正确构建的重组质粒转化毕赤酵母GS115细胞,得到酵母工程菌株。在酵母α-Factor及AOX1基因启动子和终止信号的调控下,超耐热酸性α-淀粉酶在甲醇酵母中大量表达并分泌到胞外,该酶的表达受甲醇的严格调控和诱导,随着诱导培养时间的增加,在培养基上清液中的单位体积酶活力相应上升,在诱导培养7d后酶活力达到最大值。该酶最适反应温度为90~100℃,最适反应pH值为4.5~5.5。该酶具有非常好的温度稳定性,在100℃条件下热处理5h,仍具有60%以上的酶活力。该酶的这些优点使其非常适于在工业生产上应用。     

《中药制药工程学》绪论课教学的一点教学体会

绪论课是高校每一门课程教学时教师面对学生的第一次课,上好绪论课具有非常重要的意义。本文以《中药制药工程学》课程为例,论述了绪论课的重要性并介绍了绪论课的内容设计、教学方法、学习要求等。