鸭肠炎病毒核衣壳蛋白基因的克隆与原核表达

目的：对DEV贵州分离株NP基因进行克隆与序列分析,构建NP基因的原核表达载体,分析NP基因原核表达产物的免疫反应性。方法：根据GeneBank登载的DENNP基因序列设计引物,对DEV贵州分离株进行PCR扩增、克隆和测序,采用生物信息学软件程序分析NP蛋白的氨基酸序列;将该基因插入到原核表达载体pET32a上进行原核表达和Western Blotting分析。结果：DEV贵州分离株NP基因全长759bp,核苷酸序列与参考株一致;NP基因编码蛋白相对分子量为27．1kDa,理论pI为5．89,肽链上第10．15、88．92和182．186区段及其附近区域可能是B细胞表位优势区;构建得到的重组质粒pET32-NP可表达出一条大小约为48kDa的蛋白,且能与兔抗DEN-IgG发生特异性结合。结论：NP基因在DEN基因组中高度保守,其原核表达产物具有良好的免疫反应性。     

人肺孢子菌肺炎治愈1例

1 资料与方法 1.1 临床资料 患者,男性,36岁,因间断发热伴活动后气短1月余就诊。患者1个月前“感冒”后出现胸闷、活动后喘憋,休息后缓解。伴间断发热。当地医院给予先锋必和阿齐霉素静滴20余天,效果不佳。10余天前咳嗽、咳痰加重,痰色白,量少,不黏,易咳出,无咳血。伴双肋部胸痛,与咳嗽有关。仍间断发热,体温最高39．7℃,伴膝关节、后背部游走性疼痛。既往史：1998年肾活检确诊为慢性肾小球肾炎,膜性增生性肾小球肾炎,IgA肾病（Ⅳ～Ⅴ级）,慢性肾功能不全（代偿期）。     

用低电荷微载体连续繁殖细胞

引言 微载体技术的发展,可经济地在一个单一容器内大量培养依赖附着细胞(Anchora ge-dependent cells)。已经证明,微载体培养的细胞能用来生产病毒疫苗和干扰素。然而,用蛋白质水解酶、螯合剂,或机械分散微载体上的细胞进行再培养,会增加细胞质量检定和操作程序。操作者明白,把新鲜微载体简单地加到正在培养的细胞培养物中做再培养是非常方便的方法。我们的同事Da     

正常和感染病毒的二倍细体胞在微载体上的繁殖

<正>近几年,我们实验室做了许多关于大量培养二倍体细胞的实验,目的是为了生产人用病毒疫苗。我们用带有聚碳酸盐的转瓶培养做了比较,没有发现高于常规技术的优     

续谈殷商上帝与外星文明(三)——揭开汉语“祖”字的形义之谜

４－且字考《金文编》说“卜辞以且为祖。”意思是说,最早的甲骨金文祖字就是且字。在甲骨金文中“且”读为“祖”。请看图９,这些都是甲骨金文“且”字。郭沫若等前辈以为古文且字象“男性生殖器”,以后学者多不苟同。其实,古文且字是从上古岩画中的“火箭状飞碟”图形发展来的。请看图１０,这三幅贺兰山岩画中都有火箭状飞碟图形,飞碟旁都画着外星人身影。请细看图１０Ａ,在火箭状飞碟旁有一个鱼形外星人,他正骑在一只野兽背上漫步原野。古文“戈”字的初文象鱼形外星人之形。在苏美尔人、多贡人等西方古老民族的传说中,这种鱼形…     

煤矿废弃地生态修复的土壤有机碳效应

采煤使得植被和土壤遭到损毁破坏,导致原生态系统碳汇功能的急剧退化甚至完全丧失。采煤堆积的煤矸石可发生氧化自燃,是巨大的CO_2排放源。生态修复对减少矿区碳排放及减缓大气温室效应具有重要意义。分析了国内外煤矿废弃地生态修复后的土壤有机碳动态特征,修复模式、修复时间和修复措施对土壤有机碳及其活性组分的影响,总结了土壤固碳的主要影响因子。研究结果表明,土壤有机碳在人工植被修复和有机物添加后增加显著,且与修复时间成正比。煤矿废弃地通过采取适宜的生态修复措施,有很大的土壤固碳潜力。未来应加强团聚体固碳等土壤固碳机理和土壤活性有机碳等科学问题的研究,以期为退化区生态修复进程中土壤固碳功能提升提供参考。     

狂犬病病毒Vero细胞适应株的建立及其应用于疫苗生产的可行性探讨

将狂犬病病毒７ａＧ固定毒适应于Ｖｅｒｏ细胞,建立了稳定的ＶＲＧ适应株。病毒滴度可达７．６９ｌｏｇＬＤ５０／ｍｌ,病毒最适增殖时间５—７天,最适种毒比例１：１０￣３。应用转瓶培养Ｖｅｒｏ细胞增殖病毒,收获病毒液经β—丙内脂灭活,超离浓缩制备疫苗,效力试验结果（ＮＩＨ法）较原制疫苗成倍增高,且都大于２．５ＩＵ／２ｍｌ,表明ＶＲＧ适应株可应用于制备Ｖｅｒｏ细胞狂犬病疫苗。     

病毒疫苗:现有制品的使用及未来发展

<正>引言 病毒疫苗的发展和应用,在现代生物医学中取得了一些重大成就。天花已在全世界消灭,小儿麻痹症在工业发达国家已成为罕见疾病。其它儿童疾病,像麻疹、风疹和流行性腮腺炎在许多国家正在减少。 病毒疫苗的发展史,表现在离体培养病毒和测定病毒生化性方法的建立。最古老的病毒疫苗如抗天花、狂犬病和黄热病疫苗,是在动物体内培养病毒建立起来的。本世纪     

表达人溶菌酶基因牛乳腺特异表达载体的构建

利用高保真PCR法,分别扩增了牛乳腺酪蛋白基因的1.8kb和1.1kb的5'和3'调控 序列,克隆入TA载体.经测序鉴定后,利用DNA重组技术依次亚克隆入改造过的真核表达载体 pcDNA3(切除CMV启动子),并插入人溶菌酶基因(hLYZ)的cDNA, 构建成牛乳腺特异表达 载体.获得的重组载体经限制性内切酶酶切鉴定、PCR验证等表明,成功克隆了酪蛋白基因5 '和3'的调控区,并成功构建了表达人溶菌酶基因的牛乳腺特异表达载体.