血清S1P、SFRP1、TIM4、SFRP5与成人支气管哮喘急性发作期患者肺功能、气道炎症和治疗后再次急性复发的关系

摘要 目的：观察血清分泌型卷曲相关蛋白1（SFRP1）、分泌型卷曲相关蛋白5（SFRP5）、1-磷酸鞘氨醇（S1P）、T细胞免疫球蛋白域及黏蛋白域蛋白4（TIM4）与成人支气管哮喘急性发作期患者肺功能、气道炎症和治疗后再次急性复发的关系。方法：选择火箭军特色医学中心2016年7月~2020年8月期间收治的120例成人支气管哮喘患者,其中47例缓解期患者纳为缓解组,73例急性发作期患者纳为发作组。对比发作组、缓解组血清S1P、SFRP1、TIM4、SFRP5水平、肺功能[第1秒用力呼气容积（FEV₁）、用力肺活量（FVC）、FEV₁/FVC]、气道炎症[血清总免疫球蛋白E（IgE）、痰嗜酸粒细胞、呼出气一氧化氮（FeNO）、血嗜酸粒细胞],治疗结束后以门诊复查或电话的形式进行随访1年,根据1年内是否再次急性复发分组,分为复发组和未复发组,对比复发组和未复发组的血清S1P、SFRP1、TIM4、SFRP5水平。结果：发作组的S1P、SFRP1、TIM4高于缓解组,SFRP5低于缓解组（P<0.05）。发作组的FEV₁、FVC、FEV₁/FVC低于缓解组（P<0.05）。发作组的血清总IgE、嗜酸粒细胞、FeNO、血嗜酸粒细胞高于缓解组（P<0.05）。Pearson相关性分析结果显示,S1P、SFRP1、TIM4与FEV₁、FVC、FEV₁/FVC呈负相关（P<0.05）,而与血清总IgE、嗜酸粒细胞、FeNO、血嗜酸粒细胞均呈正相关（P<0.05）。SFRP5与FEV₁、FVC、FEV₁/FVC呈正相关（P<0.05）,而与血清总IgE、嗜酸粒细胞、FeNO、血嗜酸粒细胞均呈负相关（P<0.05）。复发组的S1P、SFRP1、TIM4高于未复发组,SFRP5低于未复发组（P<0.05）。结论：成人支气管哮喘急性发作期患者S1P、SFRP1、TIM4水平异常升高,SFRP5异常降低,且与肺功能、气道炎症、再次急性复发均有一定关系。     

NANOGP8基因在肺癌细胞系中甲基化水平与表达研究

目的:研究NANOGP8基因在肺癌细胞系A549中启动子区域甲基化水平及其与基因表达的相关性。方法:利用MethPrimer甲基化岛预测和甲基化引物设计软件,预测NANOGP8启动子区甲基化位点。分别从人成纤维细胞系和肺癌细胞系中提取基因组DNA,经过亚硫酸氢钠处理后,用针对甲基化位点设计的引物进行PCR扩增,获得相应区段DNA后,连接到pGEM-T载体,转化大肠杆菌鉴定阳性克隆后,测序并与GenBank数据库中NANOGP8基因组DNA序列比对,获得其甲基化水平数据。分别提取两个细胞系的总RNA,RT-PCR获得相应cDNA进行PCR扩增,扩增产物经琼脂糖凝胶电泳后,经酶切和测序验证,获取其表达水平数据。结果:成功预测NANOGP8的两个区域有甲基化位点,并检测到人成纤维细胞系和肺癌A549细胞系中NANOGP8启动子甲基化水平分别为59.7%和12.5%,表达检测结果显示在A549细胞系中检测到NANOGP8的基因片段,而在人成纤维细胞系中没有扩增到相应产物。结论:在正常成体细胞中NANOGP8基因由于启动子的高度甲基化而沉默,而在肺癌细胞系中NANOGP8基因启动子去甲基化激活其表达。NANOGP8基因的表达与其启动子区域去甲基化密切相关,同时NANOGP8在肺癌细胞分化过程中发挥重要作用。