細菌無細胞酶劑的研究 Ⅰ.一種簡便高效的細菌磨及其在製備大腸桿菌無細胞酶劑上的应用

本文報告了一種簡便高效的細菌磨,其主要構成部分包括一段横置的磨沙硬質滾筒和凹面瓷座。用5,000×g轉速,20分鐘離心收集的大腸桿菌漿作試驗。這種菌漿含水量約為乾菌重的5倍。加入1.3—1.5倍重的玻璃粉(顆粒小於3μ),混合均匀,研磨20—30秒,細菌裂碎率保證在99.99％以上。 將研磨所得混合物懸浮於磷酸鹽緩衝劑中,離心分離得到全提取液。全提取液再以20,000×g轉速,2小時離心分離,將酶劑分為澄清提取液和從碎菌沉澱製成的碎菌懸浮液兩部分。後者所殘留的活菌的氮約佔全氮的10~(-3)—10~(-4)％。利用同一批培養出來的細菌各次研磨製得的酶劑,其酶活力的可重複性程度很高,以琥珀酸氧化酶系的活力來說,各次平均離差範圍僅±10％。不需要加任何輔酶輔基,這兩部分酶劑都能够直接利用空氣中的氧來氧化琥珀酸、L-蘋果酸、L-乳酸、甲酸。澄清提取液部分還可以氧化L-谷氨酸、L-門冬氨酸、延胡索酸和乙醇,並且當它和碎菌部分酶劑混合時,除琥珀酸、甲酸和L-乳酸外對其他底質的氧化活力都大為提高。     

核酸类化合物对C~(14)—甘氨酸参入大腸杆菌原生质体制剂的影响

用Lissapol处理的大腸杆菌原生貭体的制剂具有C~(14)-甘氨酸的参入活性,RNA有提高参入的能力,但不稳定;碱水解的RNA則有更显著的作用。四种2′,3′-核苷酸对甘氨酸参入都有刺激,一般以尿嘧啶核苷酸的效应为高,核苷的刺激作用較核苷酸为差,核糖无影响,碱基稍有抑制,用羧肽酶水解及2,4-二硝基氟苯处理标記的蛋白貭,証明C~(14)-甘氨酸参入到蛋白貭的肽鏈中。     

橘黴素抗生作用之機構 Ⅱ.對於幾種酶系的影響

前文曾報道橘黴素能抑制動物組織和細菌的細胞呼吸。這些結果易使人猜想到此種抗生素可能作用於細胞中存在的酶或酶系。事實上已有人實驗證明橘黴素能抑制金色葡萄球菌的乳酸脫氫酶和微生物的異咯嗪色素酶(flavine enzymes)。現在存在的問題是:橘黴素是否對於其他的酶類,特別是其他呼吸酶類也有顯著作用?是否對於酶都有毒性     

我所认识的王德宝先生

接到王德宝先生仙逝的消息时 ,我感到深深的悲痛。我和他共事多年 ,195 9年我从有机所回到生化所时 ,分配到了王先生的组里。有一段时间 ,我和他共处一室 ,王先生给我讲他在美国的生活和他回国时的困难。他是一位很和蔼可亲的人 ,我生气的时候 ,他常常对我说“别着急嘛” ,使我平静下来。他也是一位很耐心的人 ,如果他对我们的实验结果有不同看法 ,他会平静地与我们讨论。我至今仍能快乐和感激地回忆起我和王先生共事的那段时光 ,我从他那里学到很多。196 6年我回柏林后 ,我被洪堡大学医学系微生物研究所录取 ,开始攻读博士学位。根据当时的…     

橘黴素抗生作用之机构 Ⅰ.對於離體的動物組織和細菌呼吸的影響

在近廿年來各方面抗生素的研究都突飛猛進,但關於抗生素抗生作用機構的知識還是貧乏。一般講來,抗生素是有害於細胞的毒素。最重要的幾種抗生素如青黴素,鏈黴素,氯黴素及金黴素等我們約略知道都能直接影響微生物細胞的酵素。關於橘黴素也曾有Michaelis等證明它能抑制金色葡萄球菌的葡萄糖氧化     

金黴菌發酵過程中的代謝變化

在兩種培養基中觀察了金黴菌培養過程中pH的變化、葡萄糖的消耗,氮的同化、金黴素的產生、氨和有機酸濃度的變化、菌絲的呼吸等代謝變化,這兩種培養基的區別,即在一種培養基中另加入肉湯粉和玉蜀黍漿。 兩種培養基發酵過程中,葡萄糖的消耗,氮的同化,氨和金黴素的產生等變化的一般趨勢,大致相似。加肉湯粉和玉蜀黍漿的培養基中,產生的金黴素量均為不加的5倍。 兩種培養基發酵過程中,有機酸的產生和菌絲的呼吸變化的趨勢有顯著不同。含肉湯粉和玉蜀黍漿的培養基中,培養出的菌絲有兩種類型:一種淺色的氧化代謝特強,另一種菌絲深褐色的呼吸低,代謝變化屬於發酵型,但兩種類型的金黴素的產生量是一樣的。在搖瓶內金黴菌的發酵過程,按代謝可以分為三個階段,第二天到第三天以前為“旺盛生長期”,接着到第四天止菌絲開始自溶為“開始自溶期”最後為“迅速自溶期”。培養基中,金黴素的濃度,在第二期最高。     

2-硫尿嘧啶对大腸杆菌酶合成的影响——具有性质差异的碱性磷酸酯酶的产生

大腸杆菌PB-8,在含无机磷和2-硫尿嘧啶的培养液中合成的碱性磷酸酯酶,对热、酸的稳定程度以及酶的比活力等,均显著地低于正常条件下合成的酶;二者在免疫滴定沉淀反应方面也显著地不同。尿嘧啶能够部分消除2-硫尿嘧啶的这些影响。核糖核酸結构受2-硫尿嘧啶参入的影响,可能是上述这些性质差別的直接原因。     

金黴素抗生作用的機構——Ⅰ.對大腸桿菌呼吸的影響

實驗結果表明最低制菌濃度的金黴素可以顯著抑制大腸桿菌在含有葡萄糖和某些合氮物如酪朊水解物、丙氨酸、門冬氨酸、谷氨酸、甘氨酸或硫酸銨的培養基中的呼吸,也抑制了氨氮的同化。在以丙酮酸和谷氨酸作底質時有同樣的現象。以上述含氮物中的任何一種加於大腸桿菌的葡萄糖磷酸鹽緩衝劑的懸浮液中,可以有力地提高其呼吸率,比在單獨葡萄糖中的要高得多。2.5微克/毫升的金黴素可以強烈地抑制這種提高作用。這種觀察到的抑制並不是由於個別底質分别受到抑制的結果。本文討論了金黴素抑制大腸桿菌呼吸的作用機構和可能的幾種解釋,並指出這種作用可能是由於金黴素抑制了包括碳水化物和含氮物在内的某個或某些聯合代謝過程。