固氮螺菌的血清学研究——Ⅰ.固氮螺菌的血清学分类

本实验采用玉米、谷子、水稻、甘蔗和小麦的根表上分离获得具有较高固氮酶活的细菌61株,根据其形态特征及生理生化特性,将61株固氮螺菌归属于Azospirillum属Azospirillum brasilense种,同时根据它们还原硝酸盐和亚硝酸盐的明显差异分为两群:第一群(a)具有硝酸盐和亚硝酸盐还原酶,不累积亚硝酸盐产生     

固氮螺菌氢代谢与固氮作用的关系I.固氮螺菌放氢现象与吸氢能力的研究

本文研究了固氮螺菌(Azosptrillum brastlense)的放氢现象和吸氢酶活性以及与固氮作用的关系。测定了57株固氮螺菌的放氢现象及其固氮酶活性,其中不放氢41株,微放氢14株,其放氢量为2·63—31.00n mol C2H4／ml菌液·小时。放氢量较多的2株R38{和R256A都是从水稻根表上分离获得,其放氢量分别为185.75n mol H2／ml 菌液·小时和547．00 moIH2／ml 菌液·小时。测定了53株螺菌的吸氢酶活性,它们均具有吸氢能力,其吸氢量各异,0-63-27·38n mol H2／ml菌液。小时。生长在含有NH4CI培养基上的固氮螺菌既没有固氮能力,也不产氢。在无氮培养基上所产生的氢是固氮过程中放出的氢。实验结果指出,C2H2抑制氢酶的活性。当吸氢的菌株与放氢菌株混合培养时,其固氮酶活性比单株纯培养高,有氢存在时,固氮酶活性比不加氢时高。     

母亲、新生儿和收集相关因素对高质量脐血的影响

目的:探讨母亲、新生儿和收集相关因素对高质量脐血(high-quality cord blood units,HQCBUs)的影响。方法:用logistical回归模型回顾性分析广州脐血库(Guangzhou Cord Blood Bank,GZCBB)库存的4613例脐血的母亲、新生儿和收集相关因素,所有脐血均严格按照操作规程进行供者选择、采集、运送、处理、检测和冻存。结果:影响HQCBUs的因素包括分娩时顺产、孕周大于37周、新生儿为女性、较重的体重(3500 g)、脐血体积大(80 m L)、运送耗时短(12 hr)。α-地贫携带者对处理后细胞数(postprocessing total nucleated cell count,p-TNCC)1.25×109和CD34+细胞数6.01×106有影响,而羊水粪染和母亲分娩年龄小于25岁分别对p-TNCC1.25×109和细胞集落形成单位(colony forming units,CFUs)23.24×105有影响。结论:我们鉴定出影响HQCBUs的因素,为GZCBB更新脐血采集标准、优化处理程序提供参考依据,有助于提高HQCBUs的数量和比例及有效利用脐血库的资源。     

好氧颗粒污泥对不同底物组成的响应

在序批式间歇反应器（R1、R2和R3）中,采用乙酸钠（R1）、蔗糖（R2）和苯酚（R3）三种不同基质作为碳源,均成功地培养出了好氧颗粒污泥;考察了不同颗粒污泥的理化性质及其对污染物的转化能力。结果表明,R1中颗粒污泥外观呈黄色,其主要的微生物菌群为细菌;R2中颗粒污泥外观呈黑色,内部含有丝状菌;而R3中颗粒污泥表面被大量丝状菌包裹,颗粒污泥呈淡黄色。在进水COD1000mg／L时R1、R2和R3中颗粒污泥比有机物的利用速率大小顺序为R3〉R1〉R2,而COD的去除率顺序却为R2〉R1〉R3。在进水氨氮40mg／L时,R1、R2和R3中氨氮的去除率分别在91％、96％和80％以上。以不同的底物培养出不同的好氧颗粒污泥可以拓展其在有毒化学物质如酚类化合物和高浓度工业废水生物处理中的应用。     

厄贝沙坦对慢性心力衰竭患者血清骨桥蛋白水平的影响

目的:探讨厄贝沙坦对心力衰竭(心衰)患者血清骨桥蛋白(OPN)水平及心功能的影响.方法:选择心衰患者106例,随机分为两组,并随机接受厄贝沙坦治疗,每组均为53例,常规治疗组,予以利尿剂、洋地黄制剂和β受体阻滞剂常规治疗,厄贝沙坦组,在常规治疗下加用厄贝沙坦150 mg/d,治疗12周,比较治疗前后各组患者血清OPN、B型利钠肽(BNP)水平、左室射血分数(LVEF)及左室舒张末内径(LVEDd).结果:心衰患者随着心衰程度的加重,血清OPN、BNP水平及LVEDd逐渐升高,而LVEF逐渐降低(P＜0.0l);与治疗前相比,治疗后两组患者血清OPN及BNP水平均明显降低(P＜0.01),而LVEF升高,LVEDd降低(P＜0.05),但厄贝沙坦组OPN、BNP水平及LVEF、LVEDd较常规治疗组变化更显著(P＜0.05).结论:OPN可反映心衰严重程度及判断患者的预后,在常规心衰治疗的基础上加服厄贝沙坦能进一步降低血清OPN水平,改善心功能及心衰患者的预后.     

Egr-1的诱骗性寡脱氧核苷酸抑制大鼠颈总动脉损伤后MMP-2的表达

目的观察局部转染早期生长反应因子-1(early growth response factor-1,Egr-1)的特异诱骗寡脱氧核苷酸(decoy oligodeoxynucleotides,decoy ODNs)对球囊损伤颈总动脉后基质金属蛋白酶-2(MMP-2)蛋白表达的影响及内膜增生的情况,初步探讨Egr-1,decoy ODNs抑制球囊损伤后内膜增生的机制。方法 96只健康雄性Wistar大鼠,随机分为4组,分别为假手术组、对照组、杂码组和诱骗组,每组24只。除假手术组外均应用2F球囊导管行颈总动脉球囊损伤术,术中采用转染试剂FuGENE6介导的Egr-1decoy ODNs转染至损伤后大鼠血管中,与假手术组、对照组、杂码组相比较。术后3、7、14、21d每组处死6只动物。应用HE染色和免疫组织化学方法观察大鼠颈总动脉球囊损伤后内膜增生情况和MMP-2蛋白的表达及转染Egr-1decoy ODNs后对它们的影响。结果 (1)、内膜损伤后3d内膜增厚不明显,7d内膜开始增厚,14、21d时内膜明显增厚。(2)、在假手术组近腔面中膜可见MMP-2有少量散在阳性表达;在对照组及杂码组动脉损伤后3d,在近腔面中膜,有少量阳性表达,与假手术组相比,阳性表达指数上升。7d时在新生内膜和靠近新生内膜处中膜表达明显,14d后表达逐渐下降。(3)转染decoy ODNs治疗后,在各个时间点内膜增厚程度减轻,MMP-2蛋白表达减少,与对照组比较差异有显著性(P<0.01)。结论血管球囊损伤后,内膜7d开始增生,14d、21d增生更明显,而MMP-2在7d时表达明显,之后逐渐下降,Egr-1decoy ODNs能抑制MMP-2的表达,从而减轻血管损伤后内膜的增生。     

Egr-1的特异性脱氧核酶对大鼠颈总动脉损伤后内膜增生的影响

目的 探讨早期生长反应因子-1(Egr-1)的特异性脱氧核酶对大鼠颈总动脉损伤后新生内膜形成的影响。方法 对Wistar大鼠行颈总动脉损伤后,在转染试剂Fugene6介导下经血管腔内转染Egr-1的特异性脱氧核酶(ED5),以假手术组、单纯损伤组及空白转染试剂组(Fu gene 6组)作为对照,于术后3、7、14和21d4个时间点取材,检测内膜增生程度及增殖细胞核抗原(PCNA)、转化生长因子-β(TGF-β)和Egr-1的表达变化。结果单纯损伤组及Fugene6组7d时可见内膜增生,14d、21d时内膜增厚更明显,PCNA及TGF-β于损伤后3天明显表达,7d时在新生内膜及中膜中表达达到高峰,14d后逐渐下降,而Egr-1呈持续高表达。经ED6作用后,内膜增生减轻,动脉中PCNA、TGF-β及Egr-1表达明显降低,与单纯损伤组和Fu Gnene 6组比较差异有显性。结论结果提示ED5可能是通过特异性抑制其相应基因的表达来阻遏动脉损伤后的内膜增生。     

早期生长反应因子-1的特异脱氧核酶对球囊损伤大鼠颈动脉后转化生长因子-β1表达的影响

目的观察局部转染早期生长反应因子-1(Egr-1)的特异脱氧核酶(ED5)对球囊损伤颈总动脉后内膜增生及转化生长因子-β1(TGF-β1)表达的影响,并初步探讨ED5抑制球囊损伤后内膜增生的机制。方法96只健康雄性Wistar大鼠,随机分为4组,每组24只。除假手术组外均应用2F球囊导管行颈总动脉内膜球囊损伤术,术中采用转染试剂FuGENE6介导ED5转染至损伤后大鼠血管中,以假手术组、单纯损伤组,FuGENE6组作为对照。术后3、7、14、21d处死动物每组6只。应用HE染色,RT-PCR,Western-blot和免疫组织化学方法观察大鼠颈动脉球囊损伤后内膜增生情况和TGF-β1的表达及ED5对它们的影响。结果(1)内皮损伤后3d内膜增厚不明显,7d内膜开始增厚,14、21d时内膜明显增厚。(2)TGF-β1mRNA于术后3d开始升高,7d达高峰,14d时下降。TGF-β1蛋白表达于术后3d开始升高,14d达高峰。(3)转染ED5治疗后,在各个时间点内膜增厚程度减轻,TGF-β1表达减少,与对照组比较差异有显著性(P<0·01)。结论血管内皮损伤后内膜增生过程中TGF-β1表达增加,ED5能抑制TGF-β1的表达,从而减轻血管损伤后内膜的增生。     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌PBP2a转肽酶区的克隆表达及纯化鉴定

目的:对编码耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)青霉素结合蛋白2a(PBP2a)转肽酶区的mecA基因片段进行克隆、表达、纯化及鉴定。方法:根据基因文库登录的mecA基因的编码序列,设计合成了一对寡核苷酸引物,应用PCR技术从MRSA基因组DNA中扩增获得编码PBP2a转肽酶区的DNA片段,将此目的基因片段克隆至pET-His载体,经酶切鉴定、测序正确后,转化E.coliBL21(DE3)plysS;用IPTG进行诱导表达后,利用Ni2 亲和层析技术从表达蛋白中纯化目的蛋白;对表达的蛋白以MRSA胶乳凝集试剂盒进行鉴定。结果:成功构建了PBP2a转肽酶区原核表达载体,并获得了高效表达,制备了高纯度的目的蛋白。结论:获得了高纯度的PBP2a转肽酶区蛋白,为其进一步研究奠定了基础。     

羧甲基茯苓多糖的制备及体内抗肿瘤作用的实验研究

目的 :探讨羧甲基茯苓多糖的制备方法及体内抗肿瘤作用。方法 :选择性氧化茯苓菌发酵液得羧甲基茯苓多糖 ,检测三个剂量的羧甲基茯苓多糖 (2 mg/ ml、4mg/ ml、6mg/ ml)对 H2 2 荷瘤小鼠淋巴细胞转化率和 NK细胞杀伤活性以及血清中 TNF-α含量的影响。结果 :羧甲基茯苓多糖三个剂量组均可提高荷瘤小鼠的淋巴细胞转化率和 NK细胞杀伤活性 ,与生理盐水组相比差异有显著性 (P<0 .0 5) ,中剂量组抗肿瘤的效果显著 ,与其他两组相比差异有显著性 (P<0 .0 5) ;羧甲基茯苓多糖三个剂量组均可提高荷瘤小鼠血清中 TNF-α的含量 ,与生理盐水组相比差异有显著性 (P<0 .0 5) ,但三个剂量组之间比较差异无显著性 (P<0 .0 5)。结论 :羧甲基茯苓多糖可改善荷瘤小鼠的免疫功能 ,具有抗肿瘤作用 ,且功效与作用剂量间有一定的关系 ,在最佳剂量时活性最高