通过原生质体质粒转化提高Streptomyces actuosus诺西肽产量的研究

研究利用大肠杆菌-链霉菌穿梭质粒pSE34,构建vhb基因的重组质粒pSEVhb,采用原生质体质粒转化法,将携带vhb的重组质粒转入诺西肽产生菌Streptomyces actuosus中,获得重组菌S.actuams/pSEVhb.通过CO结合试验,证明VHb在重组菌中成功表达.限氧试验表明,重组菌S.ac-tuosus/pSEVhb诺西肽的的产量明显高于出发菌株.传代试验重组菌稳定,适合工业化大生产.     

重组人源过氧化氢酶表达优化和纯化研究

研究了重组表达人源过氧化氢酶酵母菌株G13的发酵工艺和纯化方法.对接种量、生长期培养基、生长时间、诱导时间等因素进行了优化,并确立了10 L发酵罐的发酵条件.结果表明,菌体最高密度达到了0.15 g/mL,比原重组菌株S4提高了1倍,人源过氧化氢酶表达量也由原来的平均600 U/mL提高到了1500 U/mL.同时建立...     

一株新的重组人源过氧化氢酶基因工程菌的构建和遗传稳定性研究

利用pPICZαA作为新的表达载体和表达宿主酵母GS115,成功地构建了新的人源过氧化氢酶表达工程菌G13,并考察了新的工程菌G13的遗传稳定性.通过对新的重组菌整合质粒的酶切,PCR鉴定,及SDS-PAGE电泳、单抗dot-blot证实了该重组菌质粒构建正确,可以有效表达重组的人源过氧化氢酶.新的重组酵母菌G13在连...     

基因工程菌表达D-氨基酸氧化酶研究进展

用分子克隆手段获得D-氨基酸氧化酶基因后,对其在不同表达系统如大肠杆菌系统、酿酒酵母和克鲁维乳酸酵母、博伊丁假丝酵母、巴斯德毕赤氏酵母系统及动物细胞内的表达作了介绍。