寡肽转运蛋白PepT2原核表达质粒的构建及其表达初探

寡肤转运蛋白(PepT2,peptide transporter,SLC15A2)是哺乳动物体内能够转运二肤、三肽的蛋白.研究表明,一些类肽的小分子药物也是PepT2的底物,但PepT2的结构与生物学功能尚待研究.建立稳定表达PepT2的表达体系是研究PepT2的重要环节.根据GenBank中人PepT2基因序列,借助Primer5.0设计了1对寡核苷酸引物,经PCR合成长达2 190bp的目的序列,通过重组构建pET30a(+)/PepT2表达质柱,测序分析确认目的基因中的3个碱基发生突变.初步研究了pET30a(+)/PepT2在大肠杆菌BL21(DE3)pLysS中的表达,为PepT2原核表达的进一步科研和实际应用奠定了基础.     

天然杀虫剂β—水芹烯的合成

本文报导用环已烯经卤化反应、烷基化反应和Wittig反应合成天然杀虫剂β-水芹烯的方法。该合成方法原料易得,操作简便,反应条件温和,易于控制,适合于大量生产。中间体和产物经IR谱、~1HNMR谱、~(13)CNMR谱和MS分析证实了结构,产物总分离收率达38.37％。生物活性实验表明,产物对杂拟谷盗成虫具有较强的毒杀作用,LD_(50)=0.263μ1/头。     

寡肽转运蛋白PepT2及其药物转运

PepT2（peptide transporter 2）是一种高亲和力、低容量的转运载体.它在人体中分布广泛,不仅能转运二、三肽,也可以识别和转运许多仿肽类药物,如β-内酰胺抗生素、血管紧张素转换酶抑制剂、贝他定等.研究表明,PepT2的转运机制不同于氨基酸的吸收机制,其底物的仿肽结构特征影响其转运速率. 本文综述了PepT2与药物相互作用的研究以及PepT2转运药物底物结构特征的研究进展.     

神经调节素对大鼠脑缺血再灌注损伤后炎症反应的抑制作用和机制研究

目的：研究神经调节素及基质金属蛋白酶-9对于小鼠大脑缺血再灌注损伤后炎症反应的抑制作用和机制。方法：选取100只成年雄性大鼠,随机分成对照和治疗组。采用线栓方法由颈内到颈外进行插线处理,造成大脑中动脉处于闭塞状态的再灌注动物模型。治疗组颈动脉进行注射少量NRG-1β干预性治疗,通过氯化三苯基四氮唑（TTC）检查脑梗塞范围,细胞凋亡采用原住脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导缺口末端进行标记,采用免疫组织化学、免疫荧光双标记法及免疫印迹法观察脑组织基质金属蛋白酶-9（MMP-9）表达。结果：脑缺血再灌注损伤后,随时间延长及缺氧,对照组大鼠大脑皮质和纹状体区脑组织细胞凋亡,并且胶质细胞MMP-9蛋白表达逐渐增加。治疗组大鼠经注射NRG-1β干预性治疗后,缺血脑组织梗死范围及其细胞凋亡数量相对呈明显下降趋势。胶质细胞MMP-9表达呈降低趋势。结论：大鼠脑缺血再灌注损伤后体内NRG-1β抑制胶质细胞MMP-9的表达,控制缺血脑组织梗死的范围并抑制正常细胞的凋亡,发挥了重要的抗炎作用,可作为对于大脑缺血再灌注损伤的研究新靶点。     

BRCA2的BRC4基元与RAD51相互作用位点的研究进展

乳腺癌易感基因2(breast cancer susceptibility gene 2,BRCA2),是人体内一种与乳腺、卵巢、胰腺等部位的肿瘤有关的抑癌基因。人的RAD51(h RAD51)是参与DNA同源重组修复过程的关键蛋白。BRCA2蛋白通过其结构中8个高度保守的BRC重复基元来调控h RAD51通过同源重组对DNA损伤进行的修复,从而阻止细胞癌变。在BRCA2的8个BRC重复基元中,BRC4与同源重组酶h RAD51的相互作用较为明显。综述了BRCA2的BRC4基元与h RAD51相互作用位点的研究进展,为了解BRCA2与RAD51相互作用的分子机理提供基础。     

由有机硼烷合成桃小食心虫性信息素 Z-7-二十烯-11-酮和 Z-7-十九烯-11-酮

研究了用有机硼烷的转化反应立体选择合成 Z-4-十一烯-1-醛(7)以及将其应用于桃小食心虫性信息素 Z-7-11-二十烯-11-酮(1)和 Z-7-十九烯-11-酮(2)的简便合成方法。用前文报告的经由有机硼烷一锅反应制备法获得的 Z-4-十一烯-1-醇(6),经氯铬酸吡啶(PCC)氧化生成 Z-4-十一烯-1-醛(7),后者与 Grignard 试剂作用,得中间物仲醇 Z-7-链烯-11-醇(8),然后使之氧化,即得预期的 Z-7-链烯-11-酮(1)和(2)。从起始原料1-已烯出发,总产率分别为36.9％和35.0％.     

类ACE抑制肽的合成及其活性分析

血管紧张素转换酶(angiotensin converting enzyme,ACE)通过作用于维持血压正常的肾素-血管紧张系统(rennin-angiotensin system, RAS)和激肽释放酶 激肽系统(kallikrein-kinin system, KKS),使其失衡导致血压升高．而ACE活性抑制肽可以竞争性地与ACE的活性中心结合,从而抑制ACE的活性,使血压降低．天然来源的ACE抑制肽与传统的降压药物相比效果较好,无毒副作用,对正常血压没有影响,对于高血压的治疗和人类健康具有重要意义. 本文以酪蛋白中提取的ACE活性抑制肽KVLPVP为先导肽,根据ACE抑制肽的结构特点,设计合成一系列的类ACE肽(similar ACE-like peptides). 利用反相高效液相色谱法(RP-HPLC)直接测定其体外ACE抑制活性. 结果表明,当芳香性的氨基酸残基Phe、Tyr、His和疏水性Val残基位于C-端时会提高多肽的ACE抑制活性,尤其是His位于C 端时,ACE抑制活性更强. 通过对比先导肽与所合成的类ACE肽的ACE活性抑制率,可以发现,类ACE肽的ACE活性抑制率均高于先导肽．基于不同氨基酸残基位于C-端时对多肽的ACE抑制活性的研究,可以为降血压药物分子设计和筛选提供基础.