高糖诱导腹膜间皮细胞发生上皮问质转化中microRNA的异常变化

目的：定腹膜间皮细胞在高糖引起上皮间质转化（Epithelial—mesenchymnal transition,EMT）过程中microRNA的表达差异。方法：常规培养PMC细胞,利用高糖培养液刺激诱导腹膜间皮细胞发生EMT,倒置显微镜观察各组细胞形态学变化,实时定量PCR检测EMT标志基因变化,以此确定高糖诱导EMT的发生。利用特异茎环结构的引物合成microRNA的cDNA,实时定量PCR检测重要microRNA的表达变化。结果：高糖培养液培养腹膜间皮细胞48hr后,细胞形态呈梭形改变,同时EMT标记基因E—cadherin表达明显减低（P〈0．01）,Vimentin表达显著升高（P〈0．01）,说明高糖诱导腹膜间皮细胞发生了EMT。利用microRNA特异的茎环结构引物,实时定量PCR检测结果发现高糖刺激后miR-193a的表达明显上调（P〈0．01）;miR-15a和let-7e的表达明显降低（P〈0．01）;miR-16和miR-21的表达无明显变化（P〉0．05）,同时检测发现高糖刺激后miR-193a的表达水平随刺激时间表达升高。结论：异常变化的microRNA可能对高糖诱导的腹膜间皮细胞EMT具有重要调控作用。