黄盖蝶抗冻蛋白的分离与cDNA克隆

五十年代末,六十年代初,国外学者从极地鱼类中 发现并分离出能使血液冰点降低的抗冻物质。这种物 质分为塘蛋白及抗冻肤两类。人们以美洲拟蝶(Pseudopleuronecscs americanus）等为材料,对抗冻肚的性 质、一级结构、mRNA,基因表达等都进行了研究。 有关抗冻肤的作用机理以及基因的表达调节都是学者 注意的中心。对抗冻蛋白基因的研究,在理论上可以 使人们了解鱼类血清冰点降低的遗传基础,研究基因 表达的调节等基础问题,另一方面也可为用遗传工程 手段改良经济鱼类品种,提高鱼类抗冻能力作一些贡 献。但国内这方面的工作起步较晚,目前尚少有类似 的工作报道。     

黄盖鲽抗冻蛋白的分离与cDNA克隆

五十年代末,六十年代初,国外学者从极地鱼类中发现并分离出能使血液冰点降低的抗冻物质。这种物质分为糖蛋白及抗冻肽两类。人们以美洲拟鲽(Pseudopleuronecics americanus)等为材料,对抗冻肽的性质、一级结构、mRNA,基因表达等都进行了研究。有关抗冻肽的作用机理以及基因的表达调节都是学者注意的中心。对抗冻蛋白基因的研究,在理论上可以使人们了解鱼类血清冰点降低的遗传基础,研究基因     

鲤鱼基因文库的构建

建造基因文库是开展真核生物基因工程工 作的第一步,又是保存濒危物种的基因及分离 克隆特定基因的必要手段。目前国内外有关这 方面的报道很多,在基因的操作技术上,也有许 多新的方法产生,使之日趋完善。鱼类是有特 殊经济意义的物种,基因工程应用于鱼类虽尚 属起步阶段,但有良好的前景,应予以重现。     

鲫鱼雌性有关蛋白的研究

本文利用聚丙烯酰胺、SDS、超薄平板等电聚焦等多种电泳方法,对不同性别鲫鱼的血清分析后,发现了两种与雌性有关的特异血清蛋白,FSSP-Ⅰ及FSSP-Ⅱ。分离提纯了含量较多的FSSP-Ⅱ,其分子量、等电点、氨基酸组成分析的结果证明,它是一类与已报道过的鱼类雌性蛋白极不相同的、与性别有关的蛋白。为性别问题的研究提供了有意义的资料。     

鱼类抗冻蛋白的研究——Ⅱ.黄盖鲽抗冻蛋白基因cDNA的克隆及其在大肠杆菌中的表达

产于我国黄海的黄盖鲽(Pseudopleuronectes yokohamae)体内含有能阻止血液冰冻的抗冻肽(Antifreeze peptide AFP)。在对该蛋白进行纯化及对其特性的一系列研究的基础上,我们合成了一段抗冻肽基因的寡核苷酸片段。以此为引物,与黄盖鲽的mRNA进行杂交,从而特异性地反转录出抗冻肽基因cDNA片段。该片段经EcoRI Linker连接法克隆至大肠杆菌(E.coli)质粒载体pUC19上。抗冻肽cDNA插入片段经杂交证实后,对其进行了酶谱分析,核酸序列测定。重组克隆还在大肠杆菌JM83中得到了表达。     

中国微生物资源数据库(MRDC)

中国微生物资源数据库MRDC是以中国的微生物资源为数据源的大型综合数据库,包括目前已建成的微生物性状库、微生物产品市场信息库、微生物名称库、微生物名词库、国际交流用RKC代码库及一个微生物学数值分类软件包MINTS。