促甲状腺激素对大鼠心肌成纤维细胞影响的研究

目的:探讨促甲状腺激素(TSH)对SD乳鼠心肌成纤维细胞(CFs)的影响及机制。方法:新生1-3 d的SD乳鼠15只,处死后进行CFs的分离与培养,倒置显微镜对原代培养细胞形态进行鉴定,免疫组织化学染色法对CFs胞浆内波动蛋白进行染色并鉴定。后续实验过程中,按照使用b TSH工作液的稀释浓度分为A组(1μmol·L~(-1))、B组(2μmol·L~(-1))、C组(4μmol·L~(-1))。MTT法检测心肌成纤维细胞增殖率。酶联免疫吸附法(ELISA)检测培养细胞的上清液中Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白含量。荧光定量PCR反应测定培养细胞上清液中基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)m RNA的相对表达量。Western-blot法检测培养细胞上清液中MMP-2、MMP-9的蛋白表达水平。结果:CFs的形态学变化及纯度鉴定结果显示乳鼠CFs培养成功。MTT试验结果显示,24 h时后,A、B、C组CFs的增殖率分别为112.91±10.23、123.22±9.34、132.56±9.36;48 h时后,A、B、C组CFs的增殖率分别为124.4±8.34、133.5±9.02、139.6±11.36。随着b TSH浓度的增加,CFs增殖率呈逐渐增加趋势。ELISA检测结果显示,A、B、C组I型胶原蛋白表达水平分别为(2.61±0.31)μg·L~(-1)、(5.53±0.66)μg·L~(-1)、(7.91±0.74)μg·L~(-1);A、B、C组Ⅲ型胶原蛋白表达水平分别为(3.96±0.25)μg·L~(-1)、(6.72±0.52)μg·L~(-1)、(8.11±0.65)μg·L~(-1)。随着b TSH浓度的升高,I型和Ⅲ型胶原蛋白表达水平呈升高趋势。荧光定量PCR法检测结果显示,A、B、C组MMP-2的m RNA表达量分别为9.124±1.021、15.223±1.536、18.678±1.742;A、B、C组MMP-9的m RNA表达量分别为16.447±1.664、17.402±1.881、24.247±2.364。随着b TSH浓度的增加,MMP-2、MMP-9的m RNA相对表达量呈增加趋势。Western-blot法检测结果显示,A、B、C组MMP-2灰度值分别为165.41±16.57、198.25±21.34、223.41±19.08;A、B、C组MMP-9灰度值分别为140.30±15.09、190.47±20.06、230.14±21.45。随着b TSH浓度的增加,MMP-2、MMP-9的蛋白表达水平呈增加趋势。结论:TSH能够促进乳鼠CFs细胞增殖及I、Ⅲ型胶原蛋白表达增加,导致细胞外基质成分降解及合成过程失调。     

CEA、CA125、CA-50、β2-MG对腮腺粘液表皮样癌的诊断价值分析

目的:探讨CEA、CA125、CA-50、β_2-MG对腮腺粘液表皮样癌的诊断价值。方法:选择2015年6月至2017年5月本院收治的腮腺粘液表皮样癌患者30例为恶性肿瘤组及同期收治的良性腮腺肿瘤患者30例为良性肿瘤组,并选择30例健康体检者为健康对照组。采用酶促化学发光免疫分析法检测各组血清、混合唾液、健侧/患侧腮腺液中CEA、CA125含量;放射免疫分析法检测血清、混合唾液、健侧/患侧腮腺液中CA-50、β_2-MG水平。比较各组腮腺液、唾液、血清中CEA、CA125、CA-50、β_2-MG水平;分别对健侧及患侧腮腺液、混合唾液、血清中的CA-50、β_2-MG水平与CEA、CA125水平进行相关性分析。结果:肿瘤组腮腺液、唾液、血清CEA水平均明显高于健康对照组(P0.05),恶性肿瘤组患侧腮腺液、血清CEA水平明显高于良性肿瘤组(P0.05)。肿瘤组患侧腮腺液、混合唾液中CA125水平明显高于健康对照组,且恶性肿瘤组明显高于良性肿瘤组(P0.01)。肿瘤组各检测标本中CA-50水平均明显高于健康对照组(β_2-MG水平均明显低于健康对照组),恶性肿瘤组高于良性肿瘤组(P0.01)。健侧腮腺液及血清中CA-50水平与CEA水平呈显著正相关,β_2-MG水平与CEA水平呈显著负相关(P0.05)。患侧腮腺液及混合唾液中CA-50水平与CEA、CA125水平呈显著正相关,β_2-MG水平与CEA、CA125水平呈显著负相关(P0.05)。结论:患侧腮腺液、混合唾液中CEA、CA125、CA-50、β_2-MG水平检测对腮腺粘液表皮样癌的诊断有较高的参考价值。