甘肃濒危植物秦艽的龙胆苦苷含量和遗传多样性的研究北大核心CSCD

通过对不同产地秦艽的含量和遗传多样性进行研究,为甘肃秦艽的就地保护提供理论依据。龙胆苦苷含量测定采用高效液相色谱法,遗传多样性和遗传结构进行研究采用等位酶分析技术。不同产地秦艽的有效成分龙胆苦苷的含量存在一定的差异,对秦艽的6个居群152株通过12个酶位点的分析表明,秦艽具有较低的遗传多样性。每位点平均等位基因数（A）为0．7694,多态位点百分率（P）为16．16,秦艽居群间的遗传分化系数（白t）为0．1247,说明其87．63％的遗传变异存在于居群问。通过对不同地区秦艽药材的有效成分含量和等位酶的分析,为保护野生品种、确保引种栽培秦艽药材的质量提供了科学依据。     

基于PI3K/Akt/GSK-3β通路探讨蒲公英多糖对三阴性乳腺癌细胞迁移和侵袭的影响CSCD

本研究通过观察蒲公英多糖(dandelion polysaccharide,DP)对人三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞的增殖、迁移和侵袭的影响,探讨DP抑制乳腺癌细胞的分子机制。用DP处理人乳腺癌MDA-MB-231细胞及正常乳腺上皮细胞MCF-10A后,采用CCK-8方法检测不同浓度的DP(0、100、200、400、800μg/mL)对细胞活力的影响;采用平板克隆实验检测DP对乳腺癌细胞克隆形成能力的影响;采用划痕实验和Transwell实验分别检测DP对乳腺癌迁移和侵袭能力的影响;蛋白免疫印迹法(Western blotting)检测DP作用MDA-MB-231细胞48 h后,该细胞中磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、磷酸化磷脂酰肌醇3激酶(p-PI3K)、蛋白激酶B(Akt)、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)、糖原合成激酶-3β(GSK-3β)、磷酸化糖原合成激酶-3β(p-GSK-3β)蛋白表达情况,上皮间质转化(EMT)相关标志蛋白E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)表达情况。结果显示,与空白组相比,DP组(100、200、400、800μg/mL)能够显著抑制MDA-MB-231细胞存活率(P<0.05或P<0.01),而对MCF-10A细胞的存活率无显著影响;与空白组相比,DP组(200、400μg/mL)细胞克隆形成能力显著减弱(P<0.01);与空白组相比,DP组(200、400μg/mL)迁移能力显著降低;与空白组相比,DP组(200、400μg/mL)侵袭能力显著减弱(P<0.01);与空白组相比,DP组(200、400μg/mL)p-PI3K、p-Akt及p-GSK-3β蛋白表达水平降低(P<0.01),而PI3K、Akt及GSK-3β总蛋白无明显变化;与空白组相比,DP组(200、400μg/mL)E-cadherin表达水平上调,N-cadherin和Vimentin表达水平下调,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。综上,DP能够有效抑制人乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖、迁移、侵袭和EMT进程,其机制可能与抑制PI3K/Akt/GSK-3β信号通路活性有关。     

汞离子对木瓜蛋白酶结构的影响及抑制机理的研究

通过荧光光谱、紫外光谱、傅里叶红外光谱(FTIR)和远紫外圆二色光谱(Far-UV CD)对重金属Hg²⁺作用下木瓜蛋白酶的结构变化进行了定性定量的表征,探索Hg²⁺对木瓜蛋白酶变性的抑制机理。结果表明:Hg²⁺是木瓜蛋白酶的强抑制剂,10^－4mol/L的HgCl₂可使木瓜蛋白酶丧失90%的活性;随着金属Hg²⁺浓度的增加,蛋白质所处的微环境和二级结构发生了明显的改变,(α螺旋＋β折叠)结构总量减少,无规则卷曲含量增多,酶的二级结构由规则有序转向无序。