三羟廿碳四烯酸类的生物合成及生物学作用

1984年Serhan等在白细胞与15S,15氢过氧化5,8,11顺,13反花生四烯酸(15-HPTE)或15S,15羟基5,8,11顺,13反花生四烯酸(15-HETE)和离子载体A23187孵育实验中,发现了花生四烯酸的另一类包括四个共轭双键的复合物,这类物质对人的NK细胞及中性白细胞,豚鼠肺组织及纯化的蛋白激酶C(Ca~(2+),磷脂依赖型)的作用与前列腺素及白     

四种中草药对大鼠半乳糖性白内障氧化还原物质及糖类含量的影响

对正常和半乳糖性白内障及给中草药的大鼠晶状体中某些吡啶核苷酸成分、糖类、非蛋白质巯基的含量进行了比较。结果表明,在白内障晶状体中,NADPH及非蛋白质巯基的含量明显低于正常晶状体的,而NADP、半乳糖及半乳糖醇的含量明显高于正常晶状体的;当注射半乳糖的同时分别用黄岑、石斛、菟丝子及玉蝴蝶四种中草药水煎剂灌胃,上述变化为基本恢复至正常晶状体的水平。表明四种中草药对晶状体中的异常生化变化具有阻止及纠正作用。     

亚硒酸钠诱发大鼠白内障晶状体前列腺素生物合成的研究

 用亚硒酸钠诱发大鼠产生白内障后,将晶状体微粒体与外源性花生四烯酸共同孵育,用放射免疫方法测定白内障晶状体前列腺素E_2(PGE_2)及前列腺素F_2α(PG-F_2α)的生物合成情况,并与正常晶状体进行了比较,结果表明大鼠晶状体具有酶促合成PGs的能力。正常晶状体及白内障晶状体合成PGE_2的能力分别为687.75±113.97及1095.00±79.39pg/100mg晶状体湿重/15分钟,PGE_2α则分别为51.45±36.72及158.83±115.94pg/100mg晶状体湿重/15分钟(平均数±S.D.)。这说明大鼠白内障晶状体合成PGs的能力明显增高,与正常晶状体相比有显著性差异(PGE_2P<0.001,PGF_2αP<0.02)。在前2次注射亚硒酸钠后,大鼠白内障晶状体PGs的合成能力逐渐高于正常晶状体,并随注射亚硒酸钠的次数增加和白内障晶状体混浊程度加重,PGs在晶状体内的含量增加。     

三硝基甲苯致白内障机理及其在晶状体内代谢的研究

在建立TNT大鼠白内障的基础上,用HPLC分析了晶状体内TNT及其代谢产物,并用ESR及NBT方法检测了TNT在晶状体内的代谢过程所产生的自由基。结果表明,慢性染毒24个月的大鼠白内障晶状体内含有TNT原形和4氨基2,6二硝基甲苯代谢产物,以及在体外与正常晶状体微粒体孵育可产生TNT硝基阴离子自由基和超氧阴离子自由基。上述结果提示,TNT可进入晶状体内,在其还原代谢过程中产生硝基阴离子自由基中间产物,在有氧条件下进而产生超氧阴离子自由基,这可能是TNT导致白内障的启动因素。     

抗白内障药物滴眼对亚硒酸钠性白内障的预防作用

 观察了三种化合物(抗氧化剂与自由基清除剂)对大鼠亚硒酸钠性白内障的滴眼预防作用。实验分为正常对照组、亚硒酸钠组及滴眼预防组。亚硒酸钠组及滴眼预防组系给12─13日龄的大鼠皮下注射亚硒酸钠,首次剂量为6μmol/kg体重,间日一次,逐次递增1μmol/kg体重,连续六次。预防组则为大鼠开眼后同时滴眼抗氧化剂与自由基清除剂。结果表明,三种化合物通过滴眼均能有效的防止亚硒酸钠性白内障的发生,白内障的发生率从95.8％降低至15％～43.5％。同时测定了各组晶状体中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、谷胱甘肽还原酶(GSSG-R)及谷胱甘肽硫转移酶(GSH-S)的活性,结果表明,凡注射硒的大鼠晶状体中GSH-Px及GSSG-R的活性均比正常晶状体的高,接受抗氧化剂与自由基清除剂预防的大鼠晶状体中这两种酶的活性比未接受预防的大鼠晶状体中的低。单独注射硒的大鼠晶状体中GSH-S的活性比正常晶状体的高。接受预防的大鼠晶状体中此酶的活性和正常晶状体无差异,但比单独注射硒的大鼠晶状体中的低。     

紫外线对大鼠晶状体抗氧化酶mRNA表达水平的影响

为探讨紫外线对晶状体的损伤机制,用ＲＴ－ＰＣＲ方法（ｒｅｖｅｒｓｅｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ－ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎ,反转录聚合酶链反应）,研究经紫外线照射后大鼠晶状体抗氧化相关酶,包括铜锌－超氧化物歧化酶（ｃｏｐｐｅｒ－ｚｉｎｃ－ｓｕｐｅｒｏｘｉｄｅｄｉｓｍｕｔａｓｅ,Ｃｕ－Ｚｎ－ＳＯＤ）,谷胱甘肽过氧化物酶（ｇｌｕ－ｔａｔｈｉｏｎｅｐｅｒｏｘｉｄａｓｅ,ＧＳＨ－Ｐｘ）和过氧化氢酶（ｃａｔａｌａｓｅ,ＣＡＴ）等ｍＲＮＡ的表达．结果显示,短时间的照射（２～５ｍｉｎ）,抗氧化相关酶的ｍＲＮＡ表达水平有增高表现,随后其ｍＲＮＡ表达水平开始下降,１５ｍｉｎ时抗氧化相关酶ｍＲＮＡ的表达下降更为明显,与对照组相比有非常显著性差异（Ｐ＜０．００１）．照射后２４ｈ,抗氧化相关酶的ｍＲＮＡ表达有不同程度的恢复;照射后４８ｈ,其ｍＲＮＡ表达水平基本恢复,与对照组相比没有显著性差异．从而从基因水平上初步探讨了紫外线的氧化损伤机制     

人血小板生成素重组载体的构建与体外表达

应用基因克隆技术,以人ＴＰＯｃＤＮＡ为目的基因,构建真核细胞表达重组体ＶＲＴＰＯ,藉脂质体将其转染于ＮＩＨ３Ｔ３细胞,应用ＰＣＲ、ＲＴ－ＰＣＲ及Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹等技术对其转染及表达情况进行鉴定．结果表明：ＶＲＴＰＯ构建成功,在ＮＩＨ３Ｔ３细胞可表达人ＴＰＯ,为应用人ＴＰＯｃＤＮＡ进行质粒ＤＮＡ骨骼肌直接注射于动物体内的基因治疗研究奠定了基础     

用蛋白质印迹转移技术分析正常及硒性白内障大鼠晶状体及房水中蛋白质的性质

本文用蛋白质印迹转移技术分析了正常及硒性白内障大鼠晶状体及房水中蛋白质的性质。结果表明,晶状体中的脲溶性蛋白质可被抗α及抗γ晶体蛋白血清识别,提示α及γ晶体蛋白均为脲溶性蛋白质的主要成份。患白内障时房水中的蛋白质含量明显增加,且主要被抗γ血清识别,而被抗α血清识别的成份很少,表明在大鼠硒性白内障形成过程中,有较多低分子量蛋白质漏出到房水中,且其主要成份为γ晶体蛋白。此外,我们还发现正常及硒性白内障大鼠晶状体膜蛋白质与抗α及抗γ血清起反应的程度及分布有所不同,提示晶状体细胞膜与晶体蛋白之间存在着相互作用。