用皂土法制造型特异性肉毒诊断血清

用皂土为载体与类毒素结合方法及破伤风类毒素抗原抗体絮状反应方法去除A、B、C、D、E、F型肉毒抗血清原料中的异型和异种抗毒素(破伤风抗毒素)。制备的A、B、C、D、E、F型肉毒诊断血清每1m l均能中和相应型的肉毒毒素10000LD50以上,而中和异型肉毒毒素或破伤风毒素均低于5 LD50;A、B、C、D、E、F各型混合后的混合型血清每1m l能中和各型肉毒毒素亦大于10000 LD50,中和破伤风毒素低于5 LD50,即效价和特异性符合规程要求。     

A型肉毒神经毒素理化及生物学特性研究

目的探究A型肉毒神经毒素的理化及生物学特性,为A型肉毒神经毒素制品的研制提供依据。方法采用SDS-PAGE、HPLC测定A型肉毒神经毒素的纯度;采用毛细管凝胶电泳分析其在非还原条件及还原条件下各组分的相对分子质量;采用等电点聚焦电泳测定其等电点;对其N-末端氨基酸序列进行测序,并将测序结果与NCBI blast数据库中A型肉毒梭菌Hall株的氨基酸序列作比对,确证其各组分的成分;对A型肉毒毒素复合物及A型肉毒神经毒素进行口服毒性分析,并对3批A型肉毒神经毒素原液和其半成品进行生物学稳定性研究。结果 A型肉毒神经毒素纯度99.00%;非还原条件下其相对分子质量约为152 000,N-末端氨基酸序列ALNDLQINVN,为完整的A型肉毒神经毒素;还原条件下,由相对分子质量约为101 000、N-末端氨基酸序列为ALNDLQINVN的重链和相对分子质量约为101 000、N-末端氨基酸序列为PFVNKQFNYK的轻链组成;等电点为4.91;口服A型肉毒神经毒素的小鼠LD50为1.50×107U/kg,是其复合物的7.9倍;3批A型肉毒神经毒素原液在2~8℃放置28 d生物学活性无下降,平均比活性为2.13×108U/mg,是其复合物的7.1倍;3批半成品在18~26℃放置28 d生物学活性无下降。结论 A型肉毒神经毒素纯度较高,非还原条件下为单链,还原条件下裂解为轻链和重链,其原液及其半成品的生物学稳定性较好。     

罗汉果化学成分的研究

用硅胶柱层析、制备薄层层析和Sephadex LH-20柱层析等方法对罗汉果[Siraitia grosvenorii(Swingle)C.Jeffrey]75%乙醇提取物化学成分进行分析,共分离得到8个化合物,通过质谱法和核磁共振波谱法及理化性质鉴定为:罗汉果醇苯甲酸酯(1)、厚朴酚(2)、双[5-甲酰基糠基]醚(3)、5-羟甲基糠酸(4)、山柰酚-7-O-α-L-鼠李糖苷(5)、山柰酚-3,7-O-α-L-二鼠李糖苷(6)、山柰酚(7)、琥珀酸(8).除化合物1、6和7外,其余均为首次从该植物中分离得到.     

明胶中细菌内毒素的检测

作者通过鲎试验法检测多种来源、多个批号的药用明胶中细菌内毒素含量并进行合格批号的干扰试验,证明明胶对鲎试剂有干扰作用,其作用表现为浓度越高干扰越大。抗增液无助于消除明胶对鲎试剂的干扰,而有效的稀释可克服这种干扰。并对明胶及含明胶成份的生物制品在细菌内毒素检测中的限值确定及其试验影响进行了讨论。     

外源性蛋白酶对肉毒毒素的作用初探

将B型肉毒毒素在毒素粗提阶段用胰蛋白酶处理,再经浓缩、柱层析和结晶得到纯化的B型肉毒毒素复合物。结果表明:B型肉毒神经毒素经胰蛋白酶处理后单链裂解为双链,在非还原条件下SDS-PAGE显示神经毒素条带,在还原条件下SDS-PAGE只显示轻(L)、重(H)二链条带,而不显示神经毒素条带;纯化后毒素复合物的比活性提高了5.9倍,达到1.60×108LD50/mgPr;HPLC显示活性成分峰面积所占比例增加了9.83%。     

应用双抗原ELISA夹心法检测破伤风抗毒素效力的试验

作者建立了一套适用于破伤风抗毒素效力检测的双抗原夹心ELISA法,对破伤风类毒素免疫后的豚鼠和马匹分别进行了血清效价测定,并和传统的小鼠攻毒法的效力检测进行了比较,结果表明：该检测方法与小鼠攻毒法对不同水平的破伤风抗毒素效力检测,结果是一致的,有很好的相关性;此法省时、特异、灵敏,可成为另一种检测破伤风抗毒素的有效方法。     

微生态制剂联合四联方案在抗幽门螺杆菌感染治疗中的作用

目的探讨微生态制剂联合四联方案在抗幽门螺杆菌感染中的临床疗效,为根除幽门螺杆菌感染提供参考。方法选取2017年7月至2019年6月于我院完成治疗的480例H.pylori感染患者为研究对象,将其随机分为A组、B组、C组、D组,各120例。A组患者采用标准四联方案(雷贝拉唑+胶体果胶铋+阿莫西林+呋喃唑酮)进行治疗。B组患者采用标准四联方案+酪酸梭菌活菌片进行治疗。C组患者采用标准四联方案+复方嗜酸乳杆菌片进行治疗。D组患者采用标准四联方案+复合乳酸菌胶囊进行治疗。分别记录各组患者疗效以及治疗第10天、14天、21天、28天的不良反应发生情况,并于治疗后停药3个月时用碳14呼气试验复查幽门螺杆菌根除情况,分析两组患者治疗前后临床症状改善情况、临床症状评分情况、H.pylori根除率、不良反应及成本—效果情况差异。结果治疗后,4组患者H.pylori总根除率为92.5%(444/480),临床有效率为87.92%(422/480),上腹胀、上腹痛、嗳气、纳差评分均较治疗前显著降低,差异有统计学意义(F=130.38,P0.001)。治疗第21天和第28天时,微生态制剂联合四联方案的患者无不良反应率高于同期标准四联方案治疗的患者(χ~2=9.47,11.56,P=0.024、0.009)。4组患者不同阶段成本—效果(无不良反应发生率)分析显示治疗21 d时△C/△E值均为最低。结论微生态制剂联合四联方案根除幽门螺杆菌感染的疗效与标准四联方案相当,患者临床症状改善率高,不良反应少,但与具体益生菌菌株无明显相关性。治疗21 d时各方案性价比最高,值得推广。