血清腺苷脱氨酶、糖类抗原199、红细胞沉降率与活动性肺结核患者病情严重程度及预后的关系研究

摘要 目的：探讨血清腺苷脱氨酶（ADA）、糖类抗原199（CA199）、红细胞沉降率（ESR）与活动性肺结核（ATB）患者病情严重程度及预后的关系。方法：选取2021年1月～2022年10月湖南省胸科医院收治的75例ATB患者作为观察组，另外选取60例同期在我院体检健康的体检者作为对照组。比较两组血清ADA、CA199及ESR水平。根据病情严重程度将ATB患者分为轻度组、中度组和重度组。比较不同病情严重程度ATB患者的血清ADA、CA199及ESR水平。观察组接受抗结核治疗，根据疗效分为预后良好组和预后不良组，比较不同预后ATB患者的血清ADA、CA199及ESR水平。收集ATB患者的临床资料，多因素Logistic回归分析ATB患者预后的影响因素。受试者工作特征（ROC）曲线分析血清ADA、CA199、ESR对ATB患者预后的预测价值。结果：观察组血清ADA、CA199、ESR均高于对照组（P＜0.05）。将观察组患者分为轻度组26例、中度组34例和重度组15例。中度组和重度组血清ADA、CA199、ESR高于轻度组（P＜0.05），重度组血清ADA、CA199、ESR高于中度组（P＜0.05）。治疗后，根据疗效将观察组患者分为预后良好组50例和预后不良组25例，预后良好组和预后不良组在性别、年龄、BMI、吸烟史、饮酒史、糖尿病史、居住地、哮喘、支气管扩张、乙型肝炎、胸片改变等方面比较差异无统计学意义（P＞0.05），预后不良组患者血清PCT、白细胞计数、ADA、CA199、ESR高于预后良好组（P＜0.05）。经多因素Logistic回归分析结果显示，血清ADA、CA199、ESR升高是ATB患者预后不良的危险因素（P＜0.05）。绘制ROC曲线结果显示，血清ADA、CA199、ESR单独预测ATB患者预后不良的AUC分别为0.655、0.675、0.699，血清ADA、CA199、ESR联合预测ATB患者预后不良的AUC为0.828，大于各指标单独检测。结论：血清ADA、CA199、ESR升高可提示ATB患者的病情严重程度，血清ADA、CA199、ESR联合检测对预测ATB患者预后不良具有较高的价值。     

柑橘青霉菌CYP51B基因和上游调控区克隆及生物信息学分析

【目的】克隆柑橘青霉菌(意大利青霉菌,Penicillium italicum)CYP51的同源基因,并对基因序列进行生物信息学分析。【方法】通过PCR及染色体步移技术得到基因的完整序列及上下游调控序列。通过生物信息学手段对基因的结构进行分析:使用NNPP分析软件预测转录起始位点,并利用TFSEARCH1.3软件分析转录因子结合位点。利用SWISS-MODEL在线软件对蛋白进行同源模建。【结果】克隆得到了意大利青霉菌CYP51的同源基因,命名为Pi CYP51B。获得的Pi CYP51B及上下游调控区序列总长为3 496 bp,包括上游910 bp和下游834 bp的序列。Pi CYP51B基因的开放阅读框全长1 575 bp,编码524个氨基酸。该基因含有3个分别为74、51、52 bp的内含子,分别位于247 bp与320 bp之间,519 bp与569 bp之间,1 635 bp与1 686 bp之间。Pi CYP51B 5′上游调控区序列的总长为579 bp。生物信息学分析结果显示:转录起始位点位于上游458 bp处;上游调控区不仅包含启动子的核心结构序列TATA盒(位于-25 bp处),也包含多个转录因子结合位点,如Abd-B、ADR1、AP-4、GATA-1、Cdx A、Clox和Oct-1等。在上游调控序列中嘌呤含量高,而且从+387 bp处开始存在4个连续高嘌呤含量的热激转录因子特异性结合位点(HSF);在+106 bp处开始存在3个连续的Cdx A转录因子结合位点。选用人CYP51晶体结构(PDB ID:3LD6)为模板,利用SWISS-MODEL在线软件构建了意大利青霉菌CYP51B蛋白的结构模型。【结论】克隆了意大利青霉Pi CYP51B基因,其上游含有多个热激应答转录因子特异性结合位点(HSF)表明其参与逆境应答。该基因作为意大利青霉菌CYP51的同源基因,可能与青霉菌对真菌药物的抗药性密切相关。