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目的:分别克隆人细小病毒B19三个主要蛋白VP1、VP2、NS1全长基因,构建真核表达载体。方法:利用PCR和分子克隆技术,分别将B19病毒vp1、vp2、ns1基因全长片段扩增后,构建带荧光标签的真核表达载体;在人体细胞中表达并通过荧光、RT-PCR和Western Blot、测序等方法鉴定。结果:成功构建了包含B19病毒vp1、vp2、ns1全长基因,并在人体细胞中表达了VP1、VP2、NS1蛋白。结论:人微小病毒B19三个主要蛋白基因得到克隆和表达,为进行相关的研究奠定了基础。 相似文献
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人Lrp蛋白在细胞中的定位及LPS对其表达的影响 总被引：1，自引：0，他引：1
为了对脂多糖应答基因(lrp)的功能进行深入的研究,用镍离子螯合柱(Ni-NT)纯化后的 全长Lrp蛋白免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体并吸附去除非特异性反应成分.Western 印迹表明,吸附纯化后的抗体可以与Lrp蛋白特异结合,并有较高免疫印迹滴度,为Lrp功能研究提供了重要的工具.激光共聚焦扫描荧光显微镜检测显示Lrp主要位于细胞核膜周围.Western印迹、RT-PCR以及细胞免疫组化染色结果都表明,用LPS刺激后,lrp在人HEK293 和U937细胞内的表达均有明显的上升.结果提示,Lrp可能与对Lrp介导的反应有关. 相似文献
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