甲基转移酶set9缺失的斑马鱼低氧耐受能力增强

为了研究鱼类的甲基转移酶set9 [SET domain containing (lysine methyltransferase) 9, 也称作set7/setd7]在低氧耐受中的功能, 以斑马鱼(Danio rerio)作为模式生物, 利用CRISPR/Cas9 (Clustered regularly interspaced short palindromic repeats/CRISPR associated protein 9)基因编辑技术, 在斑马鱼set9基因的第一个外显子上设计了Cas9的靶位点, 对其进行基因敲除, 获得了缺失8个碱基的set9基因敲除的斑马鱼品系。对受精后3d的斑马鱼幼鱼和3月龄的斑马鱼成鱼进行低氧胁迫处理, 比较了野生型及set9基因敲除的斑马鱼的低氧耐受能力; 并对低氧胁迫处理后的3月龄的野生型及set9基因敲除的斑马鱼成鱼的脑组织取材、固定并进行TUNEL染色。结果显示: set9基因敲除的斑马鱼与野生型相比, 其低氧耐受能力显著增强, 脑组织中的细胞凋亡水平显著减少。研究为进一步揭示鱼类甲基转移酶set9在低氧耐受中的功能和分子机制提供了线索, 并为培育耐低氧鱼类新品种提供了候选靶标。     

YAP1基因调控新西兰白兔肌肉生长发育

Yes相关蛋白1(Yes-associated protein 1,YAP1)在哺乳动物组织中对于调节器官大小、肿瘤发生和细胞的增殖、分化、凋亡等具有重要作用。为探究YAP1基因在新西兰白兔肌肉组织生长发育中的生物学功能，本研究通过RT-PCR从新西兰白兔腿肌中克隆到YAP1基因，并对其生物信息学功能、表达模式及亚细胞定位、启动下游基因表达的转录活性，以及参与调控肌肉组织生长发育的功能进行分析。结果表明，YAP1的CDS区序列长度为1 302 bp,编码433个氨基酸，等电点为5.10的亲水性蛋白质，YAP1蛋白不存在信号肽和跨膜区域，其结构主要由无规则卷曲构成。系统进化树分析表明，与绵羊的亲缘关系较近，与小鼠的亲缘关系较远。亚细胞定位显示，该蛋白质在细胞核和细胞质中均有表达。RT-qPCR结果显示，YAP1基因在新西兰白兔的心、肝、脾、肺、肾、卵巢、子宫和肌肉中均有表达，但在肌肉中的表达量最高，且在腿肌组织中表达水平较高。双荧光素酶报告基因检测结果表明，YAP1基因第127位的丝氨酸突变为丙氨酸(YAP1-S127A),8xGTIIC的启动子活性明显增强。在肌肉细胞中过表达YAP1基...