从免疫及天然噬菌体抗体库中筛选抗rP27Kip1单链抗体的研究

用重组p27Kip1蛋白(rP27Kip1) 免疫小鼠,从免疫和未经免疫的小鼠脾脏抽提mRNA并扩增小鼠H链(H链)及L链(L链)基因,分别组装成单链可变区片段(ScFv)基因,构建噬菌体免疫抗体库及天然抗体库. 文库仅经一轮抗原-抗体亲和筛选后,用TaqⅠ/HinfⅠ酶切分析转化子. 获自免疫抗体库的64个克隆中,有11个克隆的酶切片段相同,而天然抗体库的64个克隆的片段则都彼此不同,但有1个克隆的酶切片段与免疫抗体库的11个克隆酶切片段相同. 将这些酶切图谱相同的重组片段分别克隆入原核表达载体pET28b(+),并在大肠杆菌(E. coli)中表达,表达产物经ELISA分析,证实可特异结合rP27Kip1抗原,一方面说明在抗体筛选过程中辅以酶切图谱分析,可以有效提高筛选效率,另一方面,也说明从噬菌体抗体库筛选特异性抗体是制备单克隆抗体(McAb)的理想途径之一.     

肿瘤转移抑制基因BRMS1的表达分析及机制研究进展

乳腺癌转移抑制基因1(BRMS1)是一个有活性的肿瘤转移抑制基因,参与抑制乳腺癌、黑素瘤、鼻咽癌、非小细胞肺癌、卵巢癌等恶性肿瘤的转移。BRMS1编码蛋白主要通过转录调控转移相关靶基因,参与调节细胞凋亡、细胞通讯、肿瘤血管新生等多种细胞事件。从BRMS1基因的分子结构、表达调控、生物学功能以及转移抑制机理等方面对BRMS1的研究进展做简要回顾。     

生物类实验教材改革的思考与展望

《生命世界》创刊以来,我一直是本刊的忠实读者。我喜欢这本杂志的内容定位,它有科普的特征,也有科学的严谨性。在很多引起读者关注的题目中以清新精练的文字描述了一个又一个生动有趣的生物科学故事。我虽然长年从事生物学领域的教学和研究工作,但也被本刊所涉猎的生物学科普故事吸引和感染。一时好动,本人也曾为本刊撰写过一篇有关美丽的宝螺的文章。     

细胞周期抑制蛋白Kip及Ink4研究进展

真核细胞的细胞周期由细胞周期素依次激活相应的Ｃｄｋ所推动,细胞能否通过限制点从Ｇ１期进入Ｓ期很大程度上取决于Ｇ１期细胞内ＣｙｅｌｉｎＤ１／ＣｙｃｌｉｎＥ／ＣｙｃｌｉｎＡ的积累,Ｃｄｋ４／Ｃｄｋ６／Ｃｄｋ２,Ｋｉｐ的化学剂量关系及Ｉｎｋ４的活ｉｐ和Ｉｎｋ４是目前已知的两类结构不同、作用方式也不尽相同的细胞周期抑制蛋白;Ｋｉｐ主要以化学剂量方式,一方面抑制与ＤＮＡ复制相关的蛋白质的ｍＲＮＡ的转录;另一     

喜树碱的生物合成途径和代谢调控

喜树碱是一种具有抗肿瘤活性的萜类吲哚生物碱,最早是从我国特有植物喜树中分离获得的。本文概述喜树碱的天然分布合成途径和代谢调控的研究进展,并对喜树碱未来的生产和发展研究作了展望。     

遗传学实验— 果蝇实验

实验原理和目的 本实验通过对果蝇二对相对性状的杂交试验，验 证孟德尔第二定律— 自由组合定律（独立分配定 律）。采用的材料是长翅黑檀体果绳和残翅灰体果蝇。 通过对杂交后代翅傍和体色这二个性状的观察，经过 数据处理，验证是否符合杂种第二代的分离比数9:3: 3:1比率。已经知道长翅和残翅是一对相对性状，由位 于第二染色体上的基因十／/vg决定，灰体和黑檀体是 另一对相对性状，由位于第三染色体上的基因十／e决 定，所以都属常染色体遗传。把长翅黑檀体雌蝇 （十＋ee）与残翅灰体（vgvg＋十）的雄蝇杂交，或它们 的反交，F．代全部是长翅灰体。F，代雌雄蝇互交，F, 代产生性状分离，出现了四种表型，图示如下：     

Isolation of ScFv antibodies of rP27~(Kip1) from phage display libraries constructed from immunized and non-immunized repertoires

Through mRNA extract, RT and a series of PCR, phage antibody libraries were constructed from rP27~(Kipl)immunized and non-immunized mice. After only one round of selection with rP27~(Kipl), clones from each library were chosen randomly and digested by Taq I and Hinf I. 11 of 64 clones from the immunized animal had consistent restriction pattern, while none of the 64 clones from the non-immunized animal had, except that one had the same fragments pattern as that of the 11 clones. The 12 fragments were expressed in E. coli BL21(DE3)/pET-28b( ) system. ELISA showed that some of the fragments could bind to rP27~(Kipl) specifically. All these results implied that specific antibody can be obtained by genetic engineering without hybridoma or many rounds of growth and panning selection.     

纪念刘祖洞教授

<正>1917年1月,刘祖洞生于浙江镇海。在抗战期间,祖国大片河山蹂躏于日寇铁蹄之下,江南已经无法容下一张平静的书桌,很多学校都南迁到了中     

大自然的奇迹—-贝壳

贝类常被一层碳酸钙的外壳所保护,形成了色彩缤纷、形态万千的贝壳。它们或圆润光洁,或棱角分明,千奇百怪的形态,斑斓艳丽的色彩,让人爱不释手。当你漫步海滩时随手拾起一枚小小的贝壳,也许把细沙吹干净带回家,也许玩赏一番后抛回海中,这是许多人会做的事。可是,对于