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通过接合转移,把F1、F11、P、W、X、Ⅰ型的14种质粒分别引入大肠杆菌复制发动突变型dnaP 18,发现只有Ⅰ型质粒R144对于dnaP18具有抑制作用,消阻遏质粒R144 drd3的抑制能力高于质粒R144约一万倍而达到完全的抑制。以下事实说明R144 drd3并不通过整合到dnaP18细菌的染色体上而带来对于dnaP18的抑制:(1)dnaP18(R144drd3)细菌的染色体标记的转移频率在10~(-7)以下,而其质粒标记Km~R的转移频率约10~(-1);(2)这些菌株的DNA抽提物的电泳图谱和电子显微镜照相都说明质粒DNA的存在。 用带有质粒R144 drd3的E.coli作为供体,用E.coli dnaP18菌株作为受体,通过噬菌体P1转导得到的两种Km~R转导子中一种能在42℃形成菌落,而另一种则不能;将转座子Tn10转座到R144drd3上以后,同样使受体成为能在42℃形成菌落或不能形成菌落两类。这些结果表明,质粒R144drd3上存在着与dnaP18抑制有关的特定区域或基因。 相似文献
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以pPL703的衍生质粒pPGV5为载体,从嗜热脂肪芽孢杆菌CU21总DNA的Sau 3A酶切产物中得到1个0.54kb的启动子片段,它能促进载体上的无启动子的cat-86基因在嗜热脂肪芽孢杆菌及枯草芽孢杆菌中表达。这一片段以正、反向插入pPGV5载体,都能使重组质粒转化CU21原生质体的效率提高10~(?)至10(?)倍。Southern杂交实验表明,这一启动子片段与Imanaka等报道的来自CU21中的隐蔽性质粒pBS02的能提高转化效率的1.6kb Eco RI片段是同源的。利用所得到的0.54kb Sau 3A片段构建了新的启动子克隆载体pFDC4和表达型载体pFDC11,二者都能以很高的效率转化CU21原生质体。 相似文献
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pFDX1是带有外源基因xyIE的重组质粒。从嗜热脂肪芽孢杆菌CU21(pFDX1)出发,提高培养温度后选择卡那霉素抗性突变菌落,得到一个变异株CU21-163。该菌株含有突变质粒pFDX163,它由一个来自宿主基因组的2.0kb的H片段插入pFDX1而构成。pFDX163可通过H片段的同源重组而整合到染色体上。CU21-163包含y、w两类细胞,二者的xyIE基因表达量有明显差异。这两类细胞在分裂过程中呈现一种新的相转变现象,即y细胞的后代中经常出现少数w细胞,w细胞的后代中经常出现少数y细胞。对CU21-163的不同细胞群体的总DNA样品中游离质粒与整合质粒的含量进行了测定,由此推断y细胞含有游离质粒和整合质粒,w细胞只含整合质粒。 相似文献
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枯草杆菌和大肠杆菌间通过原生质体融合的质粒pHV33的转移 总被引:2,自引:0,他引:2
用带有质粒pHV 33(Ap~R Tc~R Cm~R,由大肠杆菌质粒pBR 322片段和金黄色葡萄球菌质粒pC194片段联接成的嵌合质粒)的大肠杆菌SK1592和枯草杆菌FD1980(trp~- Sm~R Rif~R)作为亲本,在DNase1始终存在的条件下制备原生质体,并经PEG诱导融合,在含Sm、Rif、Cm的高渗培养基上获得融合子。融合子在菌落形态、产芽孢、染色标记等十几项特征上都和枯草杆菌亲本相同,唯一相同于大肠杆菌亲本的便是质粒pHV33的Cm~R特征。用融合子的DNA抽提物转化大肠杆菌,获得Ap~R、Tc~R、Cm~R转化子。相反方向的转移没有成功。质粒pHV33在融合子和枯草杆菌中都较不稳定。和有关文献报道一致,质粒有关的抗性Ap~R、Tc~R和Cm~R在大肠杆菌中都能表达,但是在枯草杆菌中则只有Cm~R得以表达。 相似文献
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嗜热脂肪芽孢杆菌FDTP-3编码邻苯二酚2,3-双加氧酶基因的核苷酸全序列分析何知庆,毛裕民,盛祖嘉,沈仁权(复旦大学遗传所,上海200433)嗜热细菌与嗜温细菌相比,在用于分解工业废水的酚菜化合物方面可望处于有利的地位.我们在前文中[1]报道了对一... 相似文献
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