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为了建立特异、灵敏、快速的荧光定量RT-PCR方法用于检测埃可病毒9型病毒核酸,并初步应用于埃可病毒9型的临床标本检测。根据GenBank登录的埃可病毒9型毒株VP1基因序列,应用生物学软件进行序列比对,在保守区设计特异性引物和TaqMan探针。对反应条件进行优化,验证方法的特异性、灵敏度和重复性,同时对疑似埃可病毒9型病例标本进行检测。该方法对埃可病毒9型的检出有高度特异性,与EV71、CA16、CA24v、CA6、CA10、埃可病毒30型等均无交叉反应,检测灵敏度均达0.1TCID50/mL,可从疑似埃可病例粪便标本中直接检测病毒核酸,检测仅需3~4h。本研究建立的埃可病毒9型TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法特异、灵敏,适用于临床早期诊断。 相似文献
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本文对我国外来入侵物种西部喙缘蝽Leptoglossus occidentalis Heidemann, 1910进行了溯源分析,依据对国内种群的观察和标本简要描述了其形态特征和生活习性。通过野外采集国内种群标本,提取扩增COI基因序列,结合原产地和国外其他入侵种群的公共序列,构建西部喙缘蝽COI基因数据集,以中国入境口岸对木材的检疫情况为参考,分析西部喙缘蝽的入侵来源。全世界目前已知10种单倍型,中国存在4种。山东青岛种群有H_8、H_9和H_10三种单倍型,其中H_8与韩国共享,H_9和H_10为中国特有单倍型,青岛种群可能部分来自韩国;山东烟台两个采集点的种群都属于H_2,可能来自北美东部,与青岛种群的入侵来源不同。以上分析表明,我国西部喙缘蝽种群可能来源于多次独立入侵事件,同时在国内发生了小范围的扩散迁移。本研究首次对我国入侵害虫西部喙缘蝽做了溯源分析,为更好地制定规制措施,开展检疫防治工作提供了科学依据。 相似文献
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