PNPLA3基因rs738409多态性与代谢综合症在中国人群中的研究

目的:研究中国人群中PNPLA3基因rs738409位点多态性与代谢综合征之间的相关性.方法:收集了381例二型糖尿病患者和380例正常人的血液样本,使用全血提取试剂盒从781份样本中提取全基因组DNA,并利用飞行质谱技术进行目标位点的SNP分型,将分型结果与各临床指标进行统计学分析.结果:①经SNP分型结果与二型糖尿病病例-对照的关联性分析,rs738409位点多态性与二型糖尿病无显著相关性(P=0.74).②经SNP分型结果与其他临床指标的统计分析,rs738409位点多态性与高密度脂蛋白水平(P=0.029),甘油三酯水平(P=0.021),总胆固醇水平(P=0.038)及谷丙转氨酶水平(P=0.004)显著相关.结论:rs738409位点多态性与二型糖尿病的发病无显著相关性,但它通过氨基酸替换影响了与其关系紧密的基因表达,进而影响机体内各因素代谢水平的改变.     

标记蛋白HPT的表达、纯化及免疫活性鉴定

构建含有HPT的原核表达质粒,经诱导表达纯化后获得HPT抗体。从含有hpt的质粒pCambia1301上扩增目的基因,经SalⅠ和NotⅠ双酶切后与原核表达载体pET-28b（+）进行粘性末端连接,成功构建了pET-28b-hpt质粒,并转化到宿主细菌大肠杆菌Rosset(DE3)中进行蛋白表达。在异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导下,pET-28b-hpt原核表达载体在E.coli Rosset菌株中以包涵体的形式高效表达了HPT蛋白,并以纯化的目的蛋白为抗原免疫兔制备了多克隆抗体。利用本方法可以获得特异性强、灵敏度高的多克隆抗体。     

利拉鲁肽下调游离脂肪酸作用下βTC3 细胞PERK 的表达

目的:探讨游离脂肪酸(FFA)作用下胰岛βTC3细胞双链RNA依赖性蛋白样内质网激酶(PERK)的表达以及利拉鲁肽(Lira)对其表达的干预作用。方法:以βTC3细胞为研究对象,分为对照组和FFA组(0.125,0.25,0.5及1 mmol/L)孵育24 h,Westernblot方法检测PERK的表达。然后,分为对照组,FFA组,和FFA+Lira组(0.5 mg/L和1 mg/L),Lira预孵育6 h后,1 mmol/L FFA继续孵育24 h,Western blot检测PERK的表达。结果:①不同浓度FFA孵育24 h后,与对照组相比,1 mmol/L FFA组PERK表达增加(P<0.05)。②与1 mmol/L FFA组相比,0.5mg/L Lira+1 mmol/L FFA和1 mg/L Lira+1 mmol/L FFA组PERK表达减少(P<0.05),两组之间有统计学差异(P<0.05)。结论:FFA作用能够上调βTC3细胞PERK的表达,而Lira在一定程度上逆转FFA水平异常导致的βTC3细胞PERK表达上调,减轻内质网应激反应。     

GnRH受体与TRAIL在前列腺肿瘤中表达的研究

目的研究促性腺激素释放激素受体(GnRH-R)和凋亡相关蛋白(TRAIL)在前列腺肿瘤中的表达及临床意义.方法采用SABC免疫组化法及原位定量法,对前列腺肿瘤和前列腺增生患者中GnRH-R和TRAIL的表达进行检测及半定量分析.结果在前列腺癌组织高分化的11例,中分化的4例以及低分化的5例中,各种不同分化的癌组织均显示不同程度的GnRH-R和TRAIL阳性免疫反应,原位定量显示GnRH-R与TRAIL的表达均分别随着组织分化程度增高而增高(P<0.05),并且TRAIL较GnRH-R阳性免疫反应强.结论 GnRH-R和TRAIL表达量可能与前列腺恶性肿瘤的发生与发展有关.     

糖耐量减低患者血清瘦素与内皮素-1的测定及其临床意义

目的：探讨糖耐量减低（IGT）患者血清瘦素（Leptin）和血浆内皮素-1（ET-1）含量变化及其意义。方法：采用放射免疫法检测65例IGT患者、50名正常健康体检者和50例2型糖尿病患者血清中Leptin和ET-1的含量,同时分别测定体重指数、腰臀比、空腹血糖（FBG）、餐后2小时血糖（2h PBG）及空腹胰岛素（FINS）,并用HOMA稳态模型计算胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）。结果：糖尿病组、IGT组血清Leptin、ET-1、FBG、2hPBG、FINS、TC含量及HOMA-IR指数显著高于正常对照组（P〈0.05）,糖尿病组血清Leptin、ET-1、FBG、2hPBG、FINS、TC含量及HOMA-IR指数明显高于IGT组（P〈0.05）。IGT组血清Leptin水平与BMI、血清ET-1、FBG、2hPBG、FINS、TC含量及HOMA-IR指数呈显著正相关（P〈0.01）,IGT组血清ET-1水平与收缩压、舒张压、BMI、血清FBG、2hPBG、FINS含量及HOMA-IR指数呈显著正相关（P〈0.01）。结论：瘦素与内皮素-1均可能在IGT发展成2型糖尿病过程中起一定的作用。     

C反应蛋白、D-二聚体及Wells评分与脊柱骨折患者术后深静脉血栓的关系及其诊断价值分析

摘要 目的：探讨C反应蛋白（CRP）、D-二聚体（D-D）及Wells评分与脊柱骨折患者术后深静脉血栓（DVT）的关系,分析三者对脊柱骨折患者术后DVT的诊断价值。方法：选择2017年2月至2019年9月期间我院骨科收治的351例脊柱骨折患者,根据术后是否发生DVT将患者分为DVT组（59例）和非DVT组（292例）。比较DVT组和非DVT组术后1d、术后3d、术后7d、术后14d的CRP、D-D水平及Wells评分。采用Spearman秩相关分析CRP、D-D水平与Wells评分相关性。采用受试者工作特征（ROC）曲线分析CRP、D-D、Wells评分单项及联合三项指标对脊柱骨折患者术后DVT的诊断价值。结果：两组术后1d、术后3d、术后7d、术后14d的CRP、D-D水平以及Wells评分均呈先升高后降低变化趋势（P＜0.05）,DVT组术后3d、术后7d、术后14d的CRP、D-D水平以及Wells评分高于非DVT组（P＜0.05）。Spearman秩相关分析结果显示DVT组CRP、D-D水平与Wells评分均呈正相关（P＜0.05）。ROC曲线分析结果显示术后7d的D-D、CRP、Wells评分诊断脊柱骨折患者术后DVT的曲线下面积（AUC）分别为0.823、0.785、0.769,高于术后3d和术后14d;术后7d的CRP、D-D和Wells评分联合诊断脊柱骨折患者术后DVT的AUC为0.928,高于各指标单独诊断。结论：CRP、D-D水平及Wells评分均与脊柱骨折患者术后DVT有关,术后7d CRP、D-D和Wells评分联合诊断术后DVT的价值较高。     

高表达胰岛素反应性天然自身抗体转基因小鼠糖耐量分析

目的:初步探讨高表达胰岛素反应性天然自身抗体对野生及NOD小鼠糖耐量的影响.方法:酶联免疫吸附法(ELISA)检测3B4天然自身抗体与胰岛素及其它自身抗原识别情况;杂交NOD与3B4Tg+小鼠并回交5代以上得到3B4Tg+/NOD小鼠;对不同鼠龄WT、NOD、3B4Tg+/NOD和3B4Tg+小鼠进行口服糖耐量试验(OGTT);获取小鼠脾细胞和腹腔细胞,荧光抗体染色后用流式细胞仪分析不同基因型小鼠B细胞发育耐受情况.结果:3B4天然自身抗体可以识别包括胰岛素在内的多种抗原;10周、14周OGTT时3B4Tg+/NOD、3B4Tg+血糖较WT对照组均显著升高;与WT小鼠相比,NOD、3B4Tg+/NOD和3B4Tg+小鼠外周成熟B细胞明显向腹腔B1a及脾边缘带(MZ)B细胞分化.结论:天然自身抗体3B4转基因小鼠中天然免疫B细胞可以向特定亚群发育分化成熟并分泌自身抗体,高表达天然自身抗体小鼠无论是否具有NOD基因背景均可出现糖耐量异常,提示天然免疫失耐受可能是1型糖尿病糖代谢异常的发病因素之一.     

垂体功能减退症患者和低促性腺激素性性腺功能减退症患者糖脂代谢的研究

目的:比较垂体功能减退症患者(Hypopituitarism,Hypo-Pit)与低促性腺激素性性腺功能减退症(Hypogonadotropic hypogonadism,HH)的糖脂代谢状况。方法:收集从2013年6月至2016年9月在西京医院内分泌代谢科确诊的Hypo-Pit及HH男性患者的临床资料,分别有32例Hypo-Pit患者和43例HH患者纳入本研究,对照组为22例年龄、体质指数(BMI)与研究组相匹配,且无糖尿病等慢性疾病家族史的男性。采集空腹静脉血后测定血脂水平,行3h口服葡萄糖耐量试验(OGTT),测定血糖及胰岛素水平,计算葡萄糖、胰岛素曲线下面积、胰岛素抵抗指数等。3组间计量资料组间的比较应用LSD方差分析检验,非正态分布的数据经自然对数转换(ln)后进行分析。结果:各组间年龄、BMI均无统计学差异(P0.05);与正常对照组相比,Hypo-Pit患者及HH患者的高密度脂蛋白水平下降(均P0.05),甘油三酯水平升高(P0.05);与HH患者相比,Hypo-Pit患者的胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白升高(P0.05);与正常对照组相比,HH患者的稳态模型胰岛素抵抗指数及胰岛素敏感指数升高(P0.05);与对照组比较,Hypo-Pit患者及HH患者OGTT 3h血糖水平升高,差异有统计学意义(均P0.05);HH患者空腹、2h、3h血清胰岛素水平均明显升高,差异有统计学意义(均P0.05);与HH组相比,Hypo-pit患者的HOMA-IR水平降低(P0.05)。结论:Hypo-Pit患者存在糖脂代谢紊乱,且脂代谢紊乱较HH患者更差,而HH患者胰岛素抵抗水平高于Hypo-Pit患者。     

生物化学“TCA”特色课程思政模式的构建与应用

高等教育“四新”建设(新工科、新医科、新农科、新文科)背景下，生物化学课程思政建设质量直接关乎育人成效。本校经过6年生物化学课程思政教学实践，以学科重要名词三羧酸循环中的“TCA”(三羧酸)类比育人的“一心三力”(T-思考力与合作力、C-鉴别力、A-敬畏心),由此提出生物化学大学科通用的“TCA”特色思政理念，分别引导学生建立正确的认知观、科学观和生命观。同时构建了实现该理念、具有可操作性的实践创新体系，包括“一课三融”教的理念、“成长三思”学的理念、“创学三境”深度学习环境序贯创设，能够满足不同学校学情进而灵活设计高阶教学活动的基本需求。本校应用该模式，构建了突显军医大学特色的“TCA白兰鸽”生物化学思政体系，“白”代表医学，“兰”代表空军，“鸽”代表和平和谐。运用上述教与学的理念、学习环境序贯创设方法，个性化设计瞄准高阶育人目标的三大教学活动，包括“魔力生化圈”共学平台，注重主动建构与个性输出的思维训练；“基础-临床双师大班互动”启学课堂，侧重深度思考与讨论迭代的思辨表达；“虚拟仿真(VR)沉浸式任务”乐学应用，关注应对复杂与纠错担当的思感升华。上述“TCA白兰鸽”育人效果较满意，...