诱导烟草细胞产生抗性反应的海洋真菌的筛选

植物细胞胞外碱化反应及氧爆发是植物免疫反应中的重要早期事件。通过这两个细胞反应特征来发现具有潜在的诱导植物抗性反应的真菌菌株。以分离自大连凌水桥附近海域潮间带繁茂膜海绵(Hymeniacidon perleve)的50株真菌为受试菌株,通过烟草植物细胞的胞外碱化反应筛选目标菌株,发现了菌株HMP-F96的粗代谢物能够显著诱导烟草细胞发生碱化反应并产生过氧化氢。通过形态学观察和分子生物学方法鉴定该菌株为布雷正青霉(Eupenicillium brefeldianum)。为进一步研究该菌株的活性代谢产物奠定了基础。     

草原兔尾鼠心电图的分析

本文采用标准双极导联（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ）、加压单极肢导联（ａＶＲ、ａＶＬ、ａＶＦ）和单极胸导联（Ｖａ、Ｖｂ、Ｖｃ）,对经１０％乌拉坦麻醉状态下的１１９只成体草原兔尾鼠进行心电图测定,同时对２０只昆明系小白鼠作为对照比较。结果表明,草原兔尾鼠的平均心率为５５８．５４±５４．５９次／ｍｉｎ,均为窦性心率,额面心电轴平均５９．６１±１２．６３度。ＰＤ－Ｒ、ＱＲＳ波、Ｑ－Ｔ、Ｐ波平均间期分别为３８．２９±６．４８、１２．７０±０．４６、２７．６２±７．３７、１２．３４±４．０９毫秒。Ｐ波和Ｔ波的方向与主波Ｒ波一致。在Ⅰ、Ⅱ、ⅢａＶＬ、ａＶＦ和Ｖａ导联为正,在ａＶＲ导联均为负向。无典型的Ｓ－Ｔ段,ＱＲＳ波群与Ｔ波部分重叠,Ｑ－Ｔ间期较短。     

单克隆抗体在呼吸道合胞病毒感染诊断和防治中的应用

呼吸道合胞病毒 (RSV)是世界范围内婴幼儿下呼吸道感染的重要病原 ,目前尚无成熟疫苗应用于临床。展开对RSV被动免疫的研究显得尤为重要。单克隆抗体成为深入研究和防治RSV感染的有力武器。本文综述了单克隆抗体在RSV感染的诊断、预防和治疗中的应用     

重组杆状病毒滴度免疫荧光法的建立及验证

目的 建立重组杆状病毒滴度间接免疫荧光法的检测方法,并对其进行验证。方法 构建含有重组质粒pGEX-6p-1-GST-GP64大肠埃希菌BL21(DE3),进行IPTG(isopropyl-β-D-thiogalactoside, IPTG)诱导,表达并纯化杆状病毒截短GP64糖蛋白。配伍佐剂后采用背部多点注射的方式免疫日本大耳白兔,制备兔抗杆状病毒GP64多抗作为免疫荧光结合抗体,在96孔板里贴壁培养Sf9细胞,接种10倍系列稀释的重组杆状病毒共孵育一定时间,80%冷丙酮固定、透化,一抗稀释比例为1∶200、荧光二抗稀释比例为1∶500,荧光显微镜下显色,计数荧光灶数目计算病毒滴度。并对建立的方法进行验证。结果 成功制备了GP64兔多抗;检测时Sf9细胞与重组杆状病毒共孵育时间4 d;重组杆状病毒感染细胞可与GP64抗体发生特异的荧光灶反应,未感染细胞对照组未出现特异性荧光灶;组内和组间测定结果的RSD均<5%;同一样品不同人员检测差异无统计学意义(F=1.86,F表);同一样品梯度稀释后,稀释倍数的对数与病毒滴度呈线性相关(R²     

LncRNA MIR31HG通过诱导细胞周期阻滞抑制食管鳞癌细胞增殖活性

本研究探讨lnc RNA MIR31HG对食管鳞癌细胞增殖活性的影响.利用定量PCR检测MIR31HG在食管鳞癌标本及其癌旁组织、人食管上皮细胞系Het-1A和食管鳞癌细胞系Eca-109、EC-1、KYSE30中的表达;采用过表达质粒pc DNA3.1-MIR31HG在食管鳞癌细胞系中过表达MIR31HG;MTT法和SRB法检测细胞增殖率;细胞周期分析试剂盒检测细胞周期进程;Caspase3活性检测试剂盒分析Caspase3活性;PCR和Western blot法检测p53、Caspase3及Bcl-2的m RNA和蛋白质表达水平.结果显示,食管癌组织中MIR31HG表达水平显著低于癌旁组织(P0.05);与Het-1A细胞相比,Eca-109、EC-1、KYSE30细胞中MIR31HG的表达均显著下调(P0.05),提示MIR31HG可能介导食管癌的发生发展.转染pc DNA3.1-MIR31HG可显著上调食管癌细胞中MIR31HG的m RNA表达(P0.01),且MIR31HG过表达可显著抑制食管癌细胞增殖活性(P0.05),减少S期细胞数(P0.05),增加G1期细胞数(P0.05),提示MIR31HG可能通过阻碍细胞周期G1期~S期进程抑制食管癌细胞增殖活性.此外,MIR31HG过表达显著增加Caspase3活性,增加Caspase3和p53的m RNA和蛋白质表达水平,同时抑制Bcl-2 m RNA和蛋白质表达水平.这表明,MIR31HG可通过抑制食管癌细胞的增殖活性阻碍食管癌的发生发展,这可能为食管癌的诊断和治疗提供新策略.