NGX6基因抑制高转移鼻咽癌细胞的侵袭运动能力

 NGX6 基因是我室利用定位候选克隆策略,在鼻咽癌的高频杂合性缺失区9p21-22克隆的新基因.前期研究结果提示,它与鼻咽癌细胞的侵袭转移密切相关.为了进一步阐明其作用的结构基础,本研究成功构建了含NGX6基因及突变体的pCMV-myc瞬时和pcDNA3.1-his-myc(-)B稳定表达载体.通过脂质体转染技术,构建了NGX6及突变体的稳定表达细胞系5-8F.用免疫荧光试验和免疫电镜观察了NGX6在5-8F细胞中的亚细胞定位主要位于胞膜、核膜以及胞浆中的膜质结构,缺失突变的功能域对其定位没有明显的影响.基质胶侵袭试验和划痕试验研究了NGX6及突变体对细胞运动的影响.NGX6能抑制高转移潜能的鼻咽癌细胞5-8F的运动和侵袭能力,缺失胞内区（CYTO）后NGX6不能抑制5-8F细胞的运动和侵袭,提示CYTO可能是其发挥作用的重要功能域.     

多发性骨髓瘤恶性相关基因快速表达克隆法的建立

为从多发性骨髓瘤细胞中克隆与鉴定恶性相关基因并试图阐明其发病分子机制,建立了一种改进的快速表达克隆法,简单、快捷、直接从多发性骨髓瘤细胞株ARH-77 cDNA文库中克隆恶性相关基因。其特点是常用的表达克隆法与经典的DNA介导的NIH／3T3转染实验相结合,直接从cDNA表达文库中克隆恶性相关基因。首先建立高质量的cDNA表达文库,将cDNA表达文库分成几个基因池,转染NIH／3T3细胞;将转化活性最强的基因池再分成几个亚基因池,转染NIH／3T3细胞;将转化活性最强的亚基因池再分成次级亚基因池,直到获得有明显转化活性的单个cDNA克隆。该技术亦可用于从其他肿瘤细胞中克隆恶性相关基因。     

采用SELDI蛋白质芯片技术研究氧化亚铁硫杆菌对磷酸盐缺失的反应

氧化亚铁硫杆菌(At.f)是能够利用Fe2 和硫化矿来获取能量的一种化能自养菌.这种细菌在金属硫化矿的生物浸出中起着重要的作用.在硫化矿的生物浸出过程中,浸矿细菌通常会遇到多种胁迫条件,如温度的变化、营养成分的缺失和pH值的变化等,这些因素会影响到细菌的活性.因此对在胁迫条件下这类细菌的应急反应生理机制的研究具有重要的意义.SELDI蛋白质芯片技术是近年一种高通量的蛋白质组学研究技术.测定了以Fe2 为能源正常条件培养的At.f和磷酸盐缺失培养At.f的生长情况,绘制了相应的生长曲线;采用NP20蛋白质芯片,对At.f总蛋白的蛋白质芯片上样量进行了优化.在此基础上,采用IMAC-Cu、SAX2、WCX2三种特异性SELDI蛋白质芯片技术,获取了磷酸盐缺失培养At.f与正常条件培养的At.f的比较蛋白质图谱,采用软件对比较蛋白质图谱进行分析,发现了磷酸盐缺失培养At.f的13个明显差异表达的蛋白质分子,为进一步分离鉴定这些差异表达蛋白质奠定了基础.     

嗜酸热硫球菌(S-5)对硫化物的氧化

从中国一热泉区分离到一种新的嗜热菌——嗜酸热硫球菌(Sulfosphaerellus thermoarido- philum)S-5能直接氧化元素硫(S)和黄铁矿(FcS2)等硫化物,氧化元素硫的温度范围是55—80℃,最适70℃;pH范围是1．0—5．5,最适2．5。在最适条件下,含元素硫1％,静置10天,细菌氧化元素硫溶液中的硫酸根(soi一)使浓度从1．10 g／L增加到6．56g/L,pH从2．35降到1．00。还发现嗜酸热硫球菌与中温的氧化亚铁硫杆菌(Thiobacillus ferrooxidans)T一9以同样方式氧化黄铁矿,但是前者的氧化能力比后者的更强,而且温度范围也更广。当使用一200目黄铁矿矿粉、矿浆浓度10％、振荡氧化20天时,在接人嗜热菌的溶液中,可溶性铁浓度从1．79 g/L增加到16．40 g／L,pH从2．23降到0．85,而接人中温菌的溶液中可溶性铁浓度从1．23 g,L只增加到7．37 g,L,pH从2．23只降到1．20。     

PMEA涂层技术在小婴儿体外循环中的应用研究

目的研究通过一些炎症、补体等指标的测定及临床效果来评价PMEA(Poly2methoxyethylacrylate)涂层管道在小婴儿体外循环手术中的生物相容性,为临床应用提供依据。方法将接受体外循环下修补的20例大型室间隔缺损合并肺动脉高压患儿随机分为PMEA涂层管道组(A组)和非涂层组(B组),每组10例。两组患儿一般资料相仿。所有患儿均在麻醉成功开胸前(T1)、体外循环30min(T2)、体外循环结束鱼精蛋白中和后(T3)、术后4h(T4)和术后24h(T5)5个时间点采取动脉血,测定血常规、C反应蛋白、白介素(IL)1B、IL-6、IL-8、IL-10、TNF-α、补体C3a、C5a、D二聚体和凝血功能。术前、术后24小时常规测定肝肾功能、白球蛋白及电泳、cTnI值,并进行术后机械通气时间、术后24h尿量、心包引流量、血制品用量、ICU滞留时间及术后肺功能比较。结果术后即刻、4h血小板计数A组明显高于B组(P<0.05)。各时间点白细胞计数、白介素(IL)-10、TNF-α无明显差异。IL-6在术后4h和24h、C反应蛋白、IL-1β、IL-8在术后24hA组升高低于B组(P<0.05)。补体C3a、C5a两组相仿,凝血功能测定术后即刻Fib含量A组高于B组(P<0.05)。术后肝肾功能两组相仿;而cTnI A组升高低于B组(P= 0.023)。术后机械通气气道峰压A组低于B组,术后肺功能好于B组。术后尿量、机械通气时间、ICU滞留时间相仿。A组心包引流量及血制品用量少于B组(P<0.05)。结论PMEA涂层体外循环管道具有良好的生物相容性,具有减轻体外循环诱发的全身炎症反应和保护血小板的作用,临床上体现出良好的结果和对肺功能的保护。     

缩短体外循环管道对新生儿和小婴儿心脏手术输血量的影响

目的回顾分析了逐步缩短体外循环管道对新生儿和小婴儿心脏手术输血量的影响。方法将2000年至2010年体重10kg以下病人4822例,分为3组：组1（n=1265）Dedico901/902/Medtronic氧合器＋Stockert II/Jostra HL20人工心肺机;组2（n=2534）Rx-05氧合器＋Stockert II/Jostra HL20人工心肺机;组3（n=1023）Rx-05氧合器＋Jostra HL30人工心肺机。比较各组预充总量,红细胞悬液的使用量和血球压积。结果组3和组2的预充量显著低于组1预充量（组1,718±15ml;组2,458±15ml;组3,334±8ml,P〈0.001）。围术期各组血球压积无显著差异;然而各组在预充液中加入的红细胞悬液有显著差异（组1,313±5 ml;组2,205±5ml;组3,167±8ml,P〈0.001）,体外循环转流中加入的红细胞悬液组间也有显著性差异（组1,117±8ml;组2,88±7ml;组3,60±8ml,P〈0.001）。结论通过改进氧合器和缩短管道长度能减少预充量和总用血量,逐步向不用血心脏外科迈进。     

用RAPD分子标志方法研究氧化亚铁硫杆菌遗传多样性

本文对采自7个不同环境的氧化亚铁硫杆菌进行了随机扩增多态性DNA（RAPD）分析,20个引物中筛选出扩增效果较好的4个引物,每个引物能产生1~9条DNA条带。通过4个引物的RAPD分析获得的平均相似性系数表明不同来源的菌之间的相关系数在44%~83%之间。 Abstract:Random amplified polymorphic DNA(RAPD) was used in analyzing the polymorphisms of Thiobacillus ferrooxidans from seven different places.Of the 20 primers,four could generate reproducible RAPD profiles,and each one produced 1~9 bands.The similarity coefficients obtained from profiles generated by four primers among Thiobacillus Ferrooxidans were about 44%~83%.