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软骨组织特异性表达Cre重组酶转基因小鼠的研制和鉴定 总被引:15,自引:2,他引:13
构建了含有软骨组织特异性Ⅱ型胶原A1启动子和Cre重组酶基因的转基因载体pcol2Al-Cre。323枚小鼠受精卵经显微注射引入转基因片段后,分别移植至14只假孕母鼠的输卵管使其发育。共得到仔鼠52只,PCR结果显示其中10只小鼠基因组上有Cre基因的整合,整合率为19.2%。用整合有Cre基因的转基因小鼠与基因组上携带LoxP位点的条件基因打靶小鼠交配,以检测Cre酶介导的重组及其组织特异性。PCR结果表明:col2Al-Cre转基因小鼠软骨组织中表达的Cre重组酶成功地介导了LoxP之间的重组。此结果通过Southern杂交得到了进一步的证实。 相似文献
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1 前言差减克隆是一种极为有用的技术,可以用来有效地分离出两种细胞标本中存在差异的核酸成分(图1),这种差异可以体现在每样标本中存在的RNA种类的水平上,也可以反映在各自基因组DNA的具体组成上。这些差异包括从表达差异性上可以区分不同细胞类型,同一细胞不同生长阶段以及可以区分细胞正常和疾病状态的一些基因。另一种相关技术即"正向"筛选,也已被用来从不同基因型细胞的cDNA和基因组DNA中分离出有差异的核酸成份。在本篇综述中,我们首先讨论差减技术的原理和起源,其历史在克隆技术的出现前就已存在。然后再评述当前的差减克隆策… 相似文献
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