小鼠Daintain/AIF-1基因启动子的克隆及其荧光素酶报告基因载体的构建

目的：对Daintain/AIF-1（大炎肽/同种异体移植炎症因子-1）基因启动子进行克隆并构建荧光素酶报告基因载体,为进一步研究Daintain/AIF-1的转录调控作用提供了质粒资源。方法：提取单核巨噬细胞系RAW264.7基因组DNA,以其为模板采用PCR方法克隆出Daintain/AIF-1基因5＇端UTR区1.6 kb DNA序列,将该序列同源重组到pGL3-Basic载体上,转化感受态DH5α并酶切鉴定和测序。结果：PCR产物片段与预期结果一致,Daintain/AIF-1基因5＇端UTR区1.6 kb DNA序列连接到pGL3-Basic载体上,构建成pGL3-Basic-Daintain/AIF-1（pGL3-Basic-DT）载体,酶切结果与理论预测值一致,经测序证实无碱基突变。结论：Daintain/AIF-1基因报告基因载体的构建为进一步研究Daintain/AIF-1转录调控作用提供了载体资源。     

小鼠Daintain/AIF-1 基因启动子的克隆及其荧光素酶报告基因 载体的构建

目的:对Daintain/AIF-1(大炎肽/同种异体移植炎症因子-1)基因启动子进行克隆并构建荧光素酶报告基因载体,为进一步研究Daintain/AIF-1的转录调控作用提供了质粒资源。方法:提取单核巨噬细胞系RAW264.7基因组DNA,以其为模板采用PCR方法克隆出Daintain/AIF-1基因5’端UTR区1.6 kb DNA序列,将该序列同源重组到pGL3-Basic载体上,转化感受态DH5α并酶切鉴定和测序。结果:PCR产物片段与预期结果一致,Daintain/AIF-1基因5’端UTR区1.6 kb DNA序列连接到pGL3-Basic载体上,构建成pGL3-Basic-Daintain/AIF-1(pGL3-Basic-DT)载体,酶切结果与理论预测值一致,经测序证实无碱基突变。结论:Daintain/AIF-1基因报告基因载体的构建为进一步研究Daintain/AIF-1转录调控作用提供了载体资源。     

金黄色葡萄球菌肠毒素研究进展

金黄色葡萄球菌肠毒素是由金黄色葡萄球菌分泌的一类胞外毒素,其中传统型为SEA-SEE,具有催吐活性。目前也发现了一些催吐活性未知的新类型肠毒素,命名为SEls。所有肠毒素的分子量都在22-28KDa之间,由单一肽链组成,其稳定性好,可耐大多数蛋白水解酶。金黄色葡萄球菌肠毒素具有较强的超抗原特性,可促使T淋巴细胞大量增殖,同时表现出对组织相容性复合物Ⅱ类分子(MHCⅡ)等位基因的不同偏爱性。超抗原的产生和调控依赖agr系统,同时也受其它因素的调控,如一些氨基酸。因此在免疫治疗中具有着重要作用。本文从性质、组成、结构、功能、检测方法等方面对金黄色葡萄球菌肠毒素进行简要介绍,为肠毒素的研究提供依据。     

Daintain/AIF-1:一个疾病相关的多功能炎症因子

Daintain/AIF-1(大炎肽/同种异体移植炎症因子-1)是一个分子量17 kD的激素样活性蛋白,进化上具有保守性,内舍一个Ca2+结合的EF-手形结构域、一些PDZ结构域结合基序、以及一些其它的生物学活性位点.Daintain/AIF-1主要由巨噬细胞和激活的T淋巴细胞表达和分泌,是巨噬细胞/小胶质细胞激活和作用过程中的一个免疫调节器,并能调节血管平滑肌细胞和内皮细胞的增殖和迁移.Daintain/AIF-1作为一个与炎症相关的细胞因子,具有广泛的生物学特性,在机体的血管病变、移植排斥、炎症病变和自身免疫疾病以及癌症中发挥重要作用.     

性别与自身免疫性疾病

自身免疫性疾病在人群中感染率5-10％,具有明显的性别差异,女性患者显著高于男性,具体机制仍未研究清楚。研究发现。除了机体自身的遗传易感体质外,雌激素,微嵌合体和性染色体都与自身免疫性疾病发病有关。     

细胞因子在1型糖尿病中的作用

1型糖尿病是T细胞介导的以胰腺β细胞特异性损伤为特征的炎症性自身免疫疾病,侵润胰岛的巨噬细胞,淋巴细胞等产生的细胞因子如白细胞介素-1β、肿瘤坏死因子-α、干扰素-α、干扰素-γ、肿瘤坏死因子-β和白细胞介素-2等通过诱导胰腺β细胞凋亡/坏死和胰岛素分泌缺陷、调节T细胞的活化和种群比例,以及调控T细胞对β细胞的免疫识别和杀伤等,在1型糖尿病的发生和发展中起关键作用。     

同种异体移植炎性因子-1：一种多功能的炎性蛋白质

同种异体移植炎性因子-1（allograft inflamuatory factor-1,AIF-1）是由143个氨基酸组成的小分子蛋白质,链内含有一个可与Ca^2＋结合的EF-手形结构域。AIF-1最初发现于同种大鼠的异体移植心脏。AIF-1被证明与机体的免疫应答、血管病变及生殖功能紧密相关,并能调节细胞的增殖及迁移,是一种多功能的炎症蛋白质。     

酵母双杂交及其衍生系统

酵母双杂交系统是一种研究蛋白质相互作用的分子生物学方法,过去20多年里,大量衍生系统的出现使得这套双杂交技术体系更加完善和高效,成为研究蛋白质-配体相互作用的重要技术手段,广泛应用于功能基因组学、蛋白质组学、病理学等研究领域。对酵母双杂交及其衍生系统的基本原理和应用进展进行综述。     

巨噬细胞因子daintain激活血液炎症反应

Daintain是我们鉴定并命名的巨噬细胞炎症因子。多个小组的研究表明daintain与炎症密切相关,但截至目前尚缺乏两者关联的直接证据。本实验研究了daintain对昆明鼠血液C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)和纤维蛋白原的影响,结果表明daintain促进血液CRP的增高,激活纤维蛋白原,此外还观察到daintain增加了血液粘度并加速血液凝固。这些结果提示daintain可直接激发血管炎症反应,可能促进心血管疾病的发生。