过氧化物酶体增生激活型受体γ与AS

过氧化物酶体增生激活型受体γ（PPARγ）在组织中较为广泛地表达,主要是调节脂肪细胞分化、糖稳态,为噻唑烷二酮类抗糖尿病药物的生物学受体。PPARγ表达增强或激活可调节脂质代谢,抑制单核／巨噬细胞功能,减少细胞粘附分子和其他炎症介质的产生和释放,并抑制血管平滑肌产殖和迁移;可能改善某些动脉粥样硬化（atherosclerosis,AS)的危险因素,在AS的发生发展过程中具有重要意义。     

辛伐他汀和非诺贝特对HepG2细胞载脂蛋白M表达的影响

目的:观察辛伐他汀和非诺贝特及两者联合对HepG2细胞载脂蛋白M表达的影响。方法:分别以不同浓度的辛伐他汀(0、1、5、10、25μmol/L)和非诺贝特(0、50、100mmol/L)及辛伐他汀(5.0μmol/L)+非诺贝特(50mmol/L)干预HepG2细胞24h。提取各组细胞总RNA和蛋白质,分别采用实时RT-PCR和WesternBlot检测apoM的mRNA和蛋白的表达。结果:辛伐他汀和非诺贝特均呈剂量依赖性上调载脂蛋白M基因和蛋白的表达(P<0.05)。联合用药比单药更能显著上调载脂蛋白M的表达(P<0.05)。结论:他汀类和贝特类药物均可上调载脂蛋白M表达,两药联合的作用更为显著。     

MEF2A基因突变对血管平滑肌细胞增殖迁移及其表型的影响

目的:观察肌细胞增强因子2A(MEF2A)基因突变对血管平滑肌细胞(VSMC)增殖迁移及其表型的影响。方法:分别将野生型(WT)MEF2A质粒(WT组)、21个核苷酸缺失突变型(△21,显性负突变)MEF2A质粒(△21组)以及MEF2A siRNA(siRNA组)转染进人主动脉血管平滑肌细胞(VSMC),通过溴化噻唑基蓝四唑(MTT)法和Millicell小室观察各组VSMC的增殖和迁移变化,免疫印迹(Western blotting)检测各组VSMC之间MEF2A蛋白、平滑肌α肌动蛋白(α-SM-actin)、SM22α、骨桥蛋白和丝裂素活化蛋白激酶(MAPK)信号通路表达差异。结果:MEF2A△21组和MEF2A siRNA组的VSMC增殖增加,迁移数量增多;同时此两组中α-SM-actin和SM22α表达减少,骨桥蛋白表达增加;磷酸化p38和ERK1/2表达也明显增强。结论:MEF2A基因显性负突变及沉默可使VSMC向合成型转化,其增殖和迁移能力增加。而p38和ERK1/2MAPK信号通路可能参与MEF2A基因介导的血管平滑肌细胞表型转化。     

DDAH/ADMA通路在HDL促进内皮细胞NO生成中的作用

目的:观察高密度脂蛋白(HDL)对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)抑制内皮细胞一氧化氮(NO)生成的保护作用,并探讨其与二甲基精氨酸二甲胺水解酶(DDAH)/非对称性二甲基精氨酸(ADMA)通路的关系.方法:Ox-LDL(1000 g/ml)孵育人脐静脉内皮细胞(HUVECs)24小时或不同浓度的HDL(10、50、100μ g/ml)预处理HUVECs细胞1小时,再与ox-LDL(100μ g/ml)共孵育细胞24小时,收集细胞培养上清液检测NO、ADMA的浓度,收集内皮细胞检测DDAH-Ⅱ的mRNA和蛋白表达以及DDAH的活性.结果:Ox-LDL(100μ g/ml)孵育HUVECs24小时后,细胞培养上清液中NO的浓度显著降低,ADMA水平显著增高,细胞内DDAH-Ⅱ的mRNA和蛋白表达以及DDAH的活性均显著降低.HDL(10、50、100μ g/ml)可以拮抗ox-LDL(100μ g/ml)的上述作用.结论:HDL能显著抑制ox-LDL诱导的内皮细胞NO产生减少,其保护作用与其调节DDAH/ADMA通路有关.     

烟酸对HepG2细胞载脂蛋白M表达的影响及其机制

目的:探讨烟酸对HepG2细胞载脂蛋白M表达的影响及其机制。方法:分别以不同浓度的烟酸(0、0.25、0.5、1.0、2.0mmol/L)干预HepG2细胞24h。提取各组细胞总RNA和蛋白质,分别采用实时R T-PCR和Western Blot检测载脂蛋白M的mRNA和蛋白的表达。采用实时R T-PCR检测肝细胞核因子-1αmRNA的表达。结果:烟酸呈剂量依赖性上调载脂蛋白M基因和蛋白、肝细胞核因子-1α基因的表达(P<0.05)。结论:烟酸可上调载脂蛋白M表达,其机制可能是通过上调肝细胞核因子-1α来实现的。     

吸烟对小鼠血清介导巨噬细胞胆固醇流出的影响及其机制

目的:探讨吸烟对小鼠血清介导巨噬细胞胆固醇流出的影响及其机制.方法:14只C57BL/6小鼠随机分为对照组和吸烟组.吸烟组小鼠被动吸烟8周后,检测血清总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、甘油三酯(TG)和丙二醛(MDA)浓度.采用液体闪烁计数法分别检测对照组小鼠血清、吸烟组小鼠血清、吸烟组小鼠血清+N-乙酰半胱氨酸(NAC,2mM)介导的细胞胆固醇流出效率.结果:与对照组相比,吸烟组小鼠血清中HDL-C显著降低,TG显著升高,TC和LDL-C无显著差别,并且吸烟组小鼠血清中MDA水平也显著升高.吸烟组小鼠血清介导巨噬细胞胆固醇流出效率明显降低,给予抗氧化剂NAC共同孵育可以显著增加吸烟组小鼠血清胆固醇流出效率.结论:吸烟显著降低小鼠血清介导的巨噬细胞胆固醇流出效率,其机制可能与吸烟降低HDL-C水平以及促进HDL脂质过氧化有关.