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构建了一个含酿酒酵母PRO3基因的分泌型表达载体pCBy310,在pCBy310上插入 βHCG(人绒毛膜促性腺激素β亚基)-cDNA以形成一个重组质粒pCBy314。利用酿酒酵母脯 氨酸合成酶基因缺陷株的独特属性,即它们不能在丰富培基中生长,pCBy314在酿酒酵母 Pro3~-缺陷株(MB299-A)的转化子可以在丰富培基中生长,而且保持有丝分裂稳定性。在优 化条件(但尚非最佳条件)下,βHCG在培液中的产量是650μg/L。说明YPD可以用为选择培 基,而且酿酒酵母在YPD中比在选择培基中生长更旺盛,可以提高表达产物的产量,加之 YPD的成分简单又便宜。因此得出结论,PRO基因可以广泛地用于构建在酿酒酵母中克隆和 表达外源基因的载体,以便用丰富培基作为选择压力直接筛选。 相似文献
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