| 用丰富培基作为选择压力在酿酒酵母PRO+转化子中稳定遗传的分泌型表达载体 |
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| 引用本文： | 谢恒月,唐鹰,姜伟东,贺恒益,刘明,匡达人.用丰富培基作为选择压力在酿酒酵母PRO+转化子中稳定遗传的分泌型表达载体[J].遗传学报,2000,27(4). |
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| 作者姓名： | 谢恒月 唐鹰 姜伟东 贺恒益 刘明 匡达人 |
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| 作者单位： | 中国科学院上海细胞生物学研究所,上海,200031 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金，罗克菲洛生殖生物学基金 |
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| 摘 要： | 构建了一个含酿酒酵母ＰＲＯ３基因的分泌型表达载体ｐＣＢｙ３１０，在ｐＣＢｙ３１０上插入 βＨＣＧ（人绒毛膜促性腺激素β亚基）－ｃＤＮＡ以形成一个重组质粒ｐＣＢｙ３１４。利用酿酒酵母脯 氨酸合成酶基因缺陷株的独特属性，即它们不能在丰富培基中生长，ｐＣＢｙ３１４在酿酒酵母 Ｐｒｏ３~－缺陷株（ＭＢ２９９－Ａ）的转化子可以在丰富培基中生长，而且保持有丝分裂稳定性。在优 化条件（但尚非最佳条件）下，βＨＣＧ在培液中的产量是６５０μｇ／Ｌ。说明ＹＰＤ可以用为选择培 基，而且酿酒酵母在ＹＰＤ中比在选择培基中生长更旺盛，可以提高表达产物的产量，加之 ＹＰＤ的成分简单又便宜。因此得出结论，ＰＲＯ基因可以广泛地用于构建在酿酒酵母中克隆和 表达外源基因的载体，以便用丰富培基作为选择压力直接筛选。
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| 关 键 词： | 用丰富培基作为选择压力 稳定遗传的分泌型载体 Pro~ 转化子 βHCG-cDNA在酵母中表达 |
Yeast (Saccharomyces cerevisiae) Secretory Expression Vector Maintained Stably in Pro3+ Transformants in Rich Medium |
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| XIE Heng-Yue,TANG Ying,JIANG Wei-Dong,HE Heng-Yi,LIU Ming,KUANG Da-Ren.Yeast (Saccharomyces cerevisiae) Secretory Expression Vector Maintained Stably in Pro3+ Transformants in Rich Medium[J].Journal of Genetics and Genomics,2000,27(4). |
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| Authors: | XIE Heng-Yue TANG Ying JIANG Wei-Dong HE Heng-Yi LIU Ming KUANG Da-Ren |
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